方翔
- 作品数：15 被引量：64H指数：5
- 供职机构：杭州市第一人民医院更多>>
- 发文基金：浙江省医药卫生科学研究基金杭州市医药卫生科技计划项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 悬浮芯片系统快速检测常见葡萄球菌的初步实验研究被引量：2
- 2008年
- 目的建立以悬浮芯片为技术基础的临床常见葡萄球菌的快速检测方法。方法以细菌16S rRNA基因保守区序列设计1对通用引物，分别采用对称PCR和不对称PCR扩增5种葡萄球菌，经测序确定后，采用悬浮芯片系统对不同的PCR产物进行检测。结果2种PCR均扩增出5种葡萄球菌目的片段（780-820bp），不对称PCR得到了大量单链产物，其产物在悬浮芯片系统的检测信号高于对称PCR，悬浮芯片系统对5种葡萄球菌的鉴定率为100％。结论16SrRNA可以作为细菌快速鉴定的靶序列，不对称PCR产物可以显著提高与悬浮芯片杂交检测的灵敏度，悬浮芯片系统在鉴定细菌方面具有简单快速、高通量、高检出率等特点，可以作为细菌快速鉴定的一种新方法进行深入开发利用。
- 余道军陈岳明方翔范建中张卫英
- 关键词：芯片分析技术葡萄球菌属聚合酶链反应
- 亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌小鼠肺部感染模型研究
- 余道军俞云松方翔王贤军潘熠健
- 亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌小鼠肺部感染模型建立被引量：7
- 2010年
- 目的 建立亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌小鼠肺部模型,为泛耐药鲍曼不动杆菌抗感染研究提供实验动物模型.方法 随机选取120只约4周大雄性BALB/C小鼠,平均分成3组：微量气管注射法组、超声雾化法组和滴鼻法组.每组小鼠用甲氨蝶呤化疗降低BALB/C小鼠的免疫力,然后将亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌分别用微量气管注射法、超声雾化法、滴鼻法感染免疫力低下和正常的BALB/C小鼠,检测微量气管注射法、超声雾化法、滴鼻法感染的小鼠感染率、死亡率、细菌清除率、肺部病理变化.结果 微量气管注射法、超声雾化法感染免疫力低下的BALB/C小鼠的肺部感染率均为100%（30/30）,死亡率分别为100%（10/10）,33%（3/10）,2组小鼠肺部细菌感染12～24 h后支气管周及肺泡间质内见中性粒细胞、淋巴细胞、巨噬细胞为主的炎症细胞浸润,微量气管注射法感染的小鼠部分肺泡组织结构崩解,肺泡腔内可见脓肿形成及较多细菌集落,超声雾化法感染的小鼠24 h见肺部部分区域存在细胞变性,但支气管及肺泡组织结构基本正常,肺泡壁血管轻度扩张伴淤血,24～48 h后可见支气管和支气管周围变性,部分肺组织血管高度扩张,伴有水肿,48 h后炎症逐渐恢复.滴鼻法感染免疫力低下的BALB/C小鼠的肺部感染不明显,未见小鼠死亡（0/10）,肺部无明显病理变化.结论 免疫力低下BALB/C小鼠可以通过微量气管注射法和超声雾化法建立亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌肺部感染模型,超声雾化法可以大批量同时操作,简单经济快速,实用性强.亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌难以感染免疫力正常小鼠.
- 余道军俞云松方翔王贤军潘熠健
- 关键词：鲍氏不动杆菌不动杆菌感染亚胺培南
- 妊娠诱导非编码RNA在TNF-α介导血管内皮细胞炎症性凋亡中的作用
- 蒋春明方翔江彦秋黄先玫
- 蟾酥体外抑菌活性的实验研究被引量：6
- 2010年
- 目的:探讨蟾酥的体外抑菌活性。方法:采用琼脂扩散法和微量稀释法研究蟾酥对临床常见分离菌株的抑菌圈直径和最小抑菌浓度,以及不同抗菌药物与蟾酥联合作用对临床常见分离株最小抑菌浓度的改变。结果:醇提蟾酥对临床常见分离株均具有一定的抑菌效果,最小抑菌浓度可达3.125mg/mL。醇提蟾酥与不同的抗菌药物联合使用,可以降低抗菌药物的最小抑菌浓度。不同的提取方法影响蟾酥的体外抑菌活性。结论:乙醇能有效提取蟾酥抗菌活性成分。醇提蟾酥对常见临床分离株,特别是阴性杆菌具有一定的抑菌活性。蟾酥与不同抗菌药物具有协同抑菌作用。
- 吴盛海方翔徐丽慧余道军
- 关键词：蟾酥醇提水提抑菌活性最小抑菌浓度
- 溶血对16项生化指标的影响及其结果的校正系数的探讨被引量：11
- 2010年
- 目的:探讨不同溶血程度对常用16项生化指标的影响,并对溶血与生化指标相关性进行回归分析。方法:采用HITACHI7600-010全自动生化分析仪测定200份标本溶血前后的16项生化指标,以基础血清为对照,进行相关性分析,观察结果的变化与结果回归的可能性。结果:溶血对常规生化指标的GOT,TP,ALB,TG,CKMB,HDBH,LDH,K+有明显的相关性,并产生正干扰,对TBIL,DBIL,IDBIL、GLU的相关性及产生的干扰与溶血的程度相关,并有明显的临界性,对GSP中度相关,AKP、GPDA负相关,而对LP-a相关性较低。结论:溶血对不同生化检测指标的干扰机制不同,不同溶血程度对生化常规指标产生不同的影响,不同生化指标的检测结果应采用不同回归处理。
- 方翔余道军王贤军赵洪灿张卫英施新颜
- 关键词：溶血生化指标
- 多功能悬浮点阵技术快速检测肠道致病菌的初步应用研究
- 2010年
- 目的建立以多功能悬浮点阵技术为基础的临床常见肠道致病菌的快速检测方法。方法以细菌16S rDNA基因保守区序列设计1对通用引物,采用不对称PCR扩增7种临床常见肠道致病菌标准菌株,多功能悬浮点阵技术对不同菌株的PCR产物进行检测以验证相应菌种探针的特异性,最后对48份粪便标本进行肠道致病菌高通量快速检测。结果 7种临床常见肠道致病标准菌株的不对称PCR得到了大量单链产物,其产物用多功能悬浮点阵技术的检测特异性为100%,48份粪便标本不对称PCR产物可与相应探针发生特异性结合,且在多功能悬浮点阵技术的相应检测信号大于阴性对照3倍以上,5种细菌的多功能悬浮点阵技术检测结果与培养鉴定结果符合率100%,48份标本PCR产物均与志贺菌属探针发生杂交反应(阳性率100%)。结论 16S rDNA可以作为细菌快速鉴定的靶序列,不对称PCR产物可以显著提高与悬浮芯片杂交检测的灵敏度,多功能悬浮点阵技术在鉴定细菌方面具有简单快速、高通量、高检出率等特点,可以作为细菌快速鉴定的一种新方法,但无法鉴别志贺菌属和大肠埃希菌属。
- 余道军陈岳明方翔吴盛海张卫英
- 关键词：芯片分析技术肠道致病菌粪便标本
- 鸡葡萄球菌的生物学特性及快速鉴定被引量：5
- 2008年
- 目的探讨鸡葡萄球菌的生物学特性、可能存在的毒力因子及快速检测方法。方法首先观察鸡葡萄球菌的培养特性，镜下观察菌体结构。采用自动微生物分析仪（VITEK60、VITEK-Ⅱ）和分子生物学方法（细菌的通用引物16S rRNA进行PCR扩增）进行鉴定。以金黄色葡萄球菌的5种毒力因子基因序列设计引物，采用PCR方法扩增鸡葡萄球菌相应的毒力因子，同时采用悬浮芯片技术对该菌进行快速检测。结果鸡葡萄球菌的初始菌落形态与金黄色葡萄球菌类似，48h后菌落变粗糙，颜色加深；在VITEK60上细菌不能鉴定，在VITEK—Ⅱ上鉴定为鸡葡萄球菌并且该菌的16S rRNA的PCR产物序列与标准序列同源性达99％；鸡葡萄球菌的毒力因子均为阴性，悬浮芯片技术可以在4—6h内检测出鸡葡萄球菌。结论VITEK-Ⅱ可以鉴定鸡葡萄球菌等罕见细菌，分子生物学方法可以对该菌进行快速准确鉴定；鸡葡萄球菌的致病性和毒力有限；鸡葡萄球菌可能引起新的人畜共患病，应引起足够重视。
- 余道军陈岳明俞少勇范建中方翔
- 关键词：鸡葡萄球菌人畜共患病毒力因子生物学特性RRNA
- 全自动酶免分析仪在肝炎酶联免疫吸附试验中的应用评价被引量：17
- 2018年
- 目的比较国产全自动酶免分析系统与进口酶免分析系统及手工操作方法三者间检测性能方面的差异。方法 2016年于杭州市第一人民医院随机收集的乙型肝炎、丙型肝炎阴性血清标本各196份,乙型肝炎、丙型肝炎阳性血清标本各20份。1套珠海丽珠公司乙肝检测试剂盒和1套北京康彻斯坦公司抗HBV国家标准物质,1套北京万泰丙肝试剂盒和1套北京康彻斯坦公司抗HCV国家标准物质,分别于国产全自动酶免分析系统、雅培i2000SR和手工操作平行试验,测定吸光度值,计算3种方法的灵敏度、精密度、准确率、特异度,并利用SPSS 17.0统计软件对3种数据进行分析。结果雅培i2000SR系统灵敏度明显高于Addcare ELISA 600系统和手工法,Addcare ELISA 600系统灵敏度高于手工法,比较差异有统计学意义(P<0.05)。乙肝五项和丙肝抗体的标准物质手工操作、国产全自动酶免分析系统和雅培i2000SR系统的试验CV相互比较分别为14.5%>12.3%>2.1%、17.0%>12.5%>3.5%、10.8%>8.4%>3.0%、24.4%>19.6%>4.4%、20.0%>19.4%>2.0%、12.7%>11.1%>3.2%,手工操作法的CV大于国产全自动酶免分析系统的CV大于雅培i2000SR系统的CV,比较差异有统计学意义(P<0.05),3种方法对抗HBV和抗HCV试剂盒阳性、阴性参考品检测符合率为100.0%。3种方法对176份阴性标本的特异度均为100.0%。结论国产全自动酶免分析系统和雅培i2000SR系统与手工操作相比,重复性更好,且三者的诊断符合率、特异度均一致,国产全自动酶免分析系统可以替代手工操作用于临床常规标本检测。
- 方翔项国谦寿明霞邵文霞蒋春明边振宇
- 关键词：全自动酶免分析系统乙型肝炎丙型肝炎酶联免疫吸附试验
- 蟾酥体外抑菌活性的实验研究
- 王晓磊吴盛海方翔徐丽慧余道军
