曾燕燕
- 作品数:2 被引量:1H指数:1
- 供职机构:南京医科大学附属脑科医院更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- MRP1 siRNA逆转胶质瘤多药耐药的体外研究被引量:1
- 2011年
- 目的探讨siRNA对人神经胶质瘤细胞U251的多药耐药的影响,为RNAi的体内研究提供依据。方法利用已初步筛选有效的MRP1 siRNA序列,转染U251等三种肿瘤细胞,采用逆转录酶聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测MRP1 mRNA和蛋白的表达;采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT)法检测细胞对化疗药物的敏感性改变。结果细胞转染siRNA2和siRNA4,反转录聚合酶链式反应(reverse transcription-PCR,RT-PCR)和Western blot结果显示转染后多药耐药相关蛋白1(multidrugresistanec-associated protein 1,MRP1)mRNA和蛋白的表达较未转染组均明显下降;药敏结果显示,转染后肿瘤细胞对表柔比星和长春新碱的敏感性增加,而对紫杉醇的敏感性没有明显改变;RT-PCR、Western blot和MTT实验证实siRNA2是最有效的siRNA序列。结论 siRNA2是体外实验中筛选出的最有效的抑制MRP基因表达的序列,针对MRP1的siRNA通过降低MRP1 mRNA和蛋白的表达,可使肿瘤细胞对化疗药物的敏感性增强,逆转肿瘤细胞的多药耐药。
- 陈玲李骁博曾燕燕王媛武卓章文斌刘宏毅杨竟肖红
- 关键词:SIRNAMRP1多药耐药U251细胞
- 逆转肿瘤多药耐药的MRP1 siRNA序列筛选研究
- 2011年
- 目的筛选有效的MRP1 siRNA序列,为RNAi的体内外研究提供依据。方法利用Dharmacon公司的RNA在线工具,设计了4对针对MRP1基因不同区域的siRNA序列,分别转染至U251等三种肿瘤细胞,采用荧光转染试剂观察转染效率;采用RT-PCR和Western blot检测MRP1 mRNA和蛋白的表达。结果 siRNAl、siRNA2、siRNA3、siRNA4四对序列分别转染上述三种肿瘤细胞后的RT-PCR实验结果说明siRNA2和siRNA4对MRP mRNA有较强的抑制作用。结论 siRNA2、siRNA4是可有效抑制MRP基因表达的序列。
- 曾燕燕刘宏毅王媛李骁博武卓章文斌杨竟肖红
- 关键词:SIRNAMRP1多药耐药肿瘤细胞