李德富
- 作品数：84 被引量：330H指数：10
- 供职机构：中国药品生物制品检定所更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划“九五”国家科技攻关计划国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程经济管理更多>>
- 乙型乙脑病毒减毒中间株SA14-12-1-7基因组全序列的测定
- 目的 对乙型脑炎活疫苗减毒过程中间株SA14-12-1-7株进行全序列测定和分析,进一步了解乙脑活疫苗减毒及其稳定性的分子机制.方法 根据已发表的SA14-14-2株及SA14株的序列,设计6对重叠引物,涵括整个乙脑病毒...
- 曾明俞永新董关木范行良姚智慧李德富
- 关键词：乙型脑炎病毒基因组
- 文献传递
- 人巨细胞病毒感染的免疫反应及免疫逃逸机制被引量：2
- 2000年
- 人巨细胞病毒是一个广泛传播的机会致病原 ,也是不断利用和操作免疫系统的持续性慢性病毒感染的代表。其免疫反应及调控机制较复杂。本文综述了该病毒感染的免疫反应及免疫逃逸的分子机制的研究进展 ,将对其感染的防治起到有益的作用。
- 周铁群李德富
- 关键词：人巨细胞病毒HCMV感染免疫反应免疫逃逸机制
- 肝细胞肝癌中丙型肝炎病毒C区、E区、NS3区、NS4区抗原的表达被引量：1
- 1997年
- 本文报道研究丙型肝炎病毒抗原在肝细胞肝癌组织内的定位分布情况。以丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）的Ｃ、Ｅ、ＮＳ３、ＮＳ４区四种单克隆抗体用免疫组化方法检测了１３９例肝细胞肝癌（ＨＣＣ）的肝脏标本，结果总的阳性率为１５．１％。２１例阳性标本中，Ｃ区单抗检测阳性占８０．９％（１７／２１），Ｅ区占３３．３％（７／２１），ＮＳ３、ＮＳ４区均占５７．１％（１２／２１），表明应用多区段单抗有助于提高ＨＣＶ抗原的检出率。阳性物质主要存在于胞浆中，呈细、粗颗粒及块状，３例出现膜及膜下型，１例核内有阳性反应。ＨＣＶ感染与ＨＣＣ的发生发展有一定的关系。
- 王理富李德富邓卓霖邓卓霖郎淑慧尹红章郎淑慧
- 关键词：丙型肝炎病毒肝肿瘤
- 应用HIV免疫阳转血清评价HIV抗体检测试剂的质量
- 2002年
- 目的 应用免疫阳转血清对HIV抗体检测试剂质量进行评价。方法 采用HIV-1核心区p24、gp41、膜区gp120和全病毒抗原免疫家兔制备系列兔血清,评价国内外HIV抗体双抗原夹心法试剂的质量。结果免疫阳性血清可用于测定试剂对各不同区域抗体检测的能力。结论 对评价试剂盒敏感性有实际意义。
- 李秀华宋爱京孟淑芳尹红章李德富
- 关键词：免疫血清
- 乙型脑炎病毒减毒活疫苗生产株SA_(14)-14-2基因组全序列的测定被引量：42
- 2001年
- 目的 对乙型脑炎减毒活疫苗SA14 1 4 2生产株进行全序列测定和分析 ,为进一步了解其基因组结构与疫苗减毒机制的关系及研究疫苗生产的遗传学质控标准奠定基础。方法 根据已发表的SA14 1 4 2株及SA14株的序列 ,设计 6对相互重叠片段的引物 ,通过RT PCR扩增出SA14 1 4 2疫苗生产株的cDNA片段 ,分别克隆到pGEM T载体 ,转化至TG1受体菌中 ,挑取阳性克隆进行鉴定后测定全序列。结果 SA14 1 4 2生产株基因组全序列长 1 0 976个核苷酸 ,96到 1 0 3 94为一个长开放读码框 ,编码 3 43 2个氨基酸。与国外测定的SA14和SA14 1 4 2株的核苷酸序列和氨基酸序列相比 ,同源性均在 99%以上 ,突变位点分散于各个区域 ,以往推测的 7个可能与减毒相关的位点均未发生改变。1 2 96～ 1 50 6间有 4个突变位点 ,有可能作为疫苗质控的遗传学标记。结论 乙脑减毒活疫苗生产株的基因组全序列基本类似于已发表的序列 ,若干不同位点产生的原因可能在于病毒株的不同传代。全序列的测定对于研究疫苗株的减毒机理及疫苗的遗传学质控标准具有一定意义。
- 曾明俞永新董关木贾丽丽姚亚夫李德富
- 关键词：乙型脑炎病毒基因组
- 应用同功酶图谱鉴别动物细胞种属来源的研究被引量：2
- 1996年
- 采用薄层球脂糖凝胶电泳方法，对人、小鼠、兔、中国白鼠、豚鼠、拘、牛、猴等动物细胞进行MD、NP、LD和G6PD四种酶组成分析，获得了上述动物细胞四组同功酶图谱，将此图谱用于46株传代细胞的种局归类研究，确认来源于人的细胞有25株，小鼠有10株，仓鼠有3株，非洲绿猴有4株，其它来源4株，均与实验相符．说明所制备的图谱可靠并有较好的重复性、稳定性。
- 姜典才张宁高光尹红章李德富
- 关键词：动物细胞同功酶
- 全文增补中
- 丙型肝炎病毒抗原检测方法的建立被引量：28
- 2001年
- 目的 以特异性单克隆抗体为基础建立丙型肝炎病毒 (HCV)抗原检测的酶联免疫吸附(ELISA)法 ,探索从血浆或血清中检测HCV抗原的可能性。方法 利用我们制备的抗 HCV核心及NS3区单克隆抗体 (McAbs) ,进行多种交叉组合模式的分析 ,确立实验室模式 ,并测定 34 8份义务献血员血样 ,确定此方法的Cutofff值 ,并分析 146份抗 HCV阳性及 2 2 5份抗 HCV阴性血浆 ,阳性结果用套式PCR试剂盒确证。结果 构建了以抗 HCV核心区单抗C39及NS3区单抗C7 6为包被抗体 ,以C39及NS3区C7 5 7为标记抗体的夹心ELISA检测模型 ,以C7为抗原 ,其检出灵敏度为 5ng ml,其Cutoff值为阴性对照均值± 0 2 5。 146份抗 HCV阳性样本中 ,11份为抗原反应阳性 ,2 2 5份抗 HCV阴性样本中 ,16份为抗原阳性 ,这些阳性样本经PCR检测后 ,2 3份为HCVRNA阳性。结论 用单抗构建的HCV抗原检测方法分别从抗 HCV阳性及阴性样本中检测出HCV抗原反应阳性样本 ,并经PCR确证 ,表明直接从血浆样本中检测HCV抗原是可能的 ,这将对于HCV和基础研究及控制HCV的传播有重要意义。
- 孟淑芳李秀华尹红章李德富
- 关键词：丙型肝炎病毒单克隆抗体酶联免疫吸附测定聚合酶链反应
- PERT-ELISA法用于细胞逆转录病毒检测的再研究
- 2009年
- 目的进一步分析PERT-ELISA法在细胞逆转录病毒检测应用中的意义。方法分析不同细胞培养液及其添加成分对PERT-ELISA法检测结果的影响及检测方法的精密性和检测用试剂的稳定性,将该方法用于不同来源细胞的逆转录酶活性的检测,并通过共培养法对我国金黄地鼠肾细胞中逆转录酶活性是否具有感染性进行初步分析。结果不同细胞培养液及其添加成分逆转录酶活性检测均为阴性,不会影响样本的检测结果。PERT-ELISA法具有良好的试验间精密性及重现性,检测用试剂在保存条件下,至少在1年内可保持稳定。近250株细胞的检测结果显示,含有逆转录病毒颗粒的细胞,无论是否具有感染性,均为逆转录酶活性阳性;除部分人淋巴瘤来源的细胞外,大部分人源细胞为逆转录酶活性阴性;8种91株猴肾来源的细胞包括74株Vero细胞均为逆转录酶活性阴性;而鼠源细胞则大部分为阳性,其中20株CHO来源的细胞均为阳性;3株猪源细胞及1株猫源细胞为阳性,而2株水貂细胞、2株牛源细胞及1株犬源细胞均为阴性。被检测的15株组织工程产品用人源细胞逆转录酶活性均为阴性,而我国不同地区来源的金黄地鼠肾细胞上清中,逆转录酶活性均为阳性。金黄地鼠肾细胞与人2BS细胞共培养后连续传代7次,细胞上清中逆转录酶活性仍为阳性,但随着传代次数的增加呈下降趋势。结论PERT-ELISA法可用于细胞逆转录病毒的检测,但对于阳性细胞,还需要进一步分析其与逆转录病毒或逆转录病毒样颗粒的相关性及是否具有感染性。
- 孟淑芳李秀华林林冯建平李修兰王佑春李德富
- 关键词：细胞逆转录酶活性感染性
- 非甲基化CpG的免疫学功能及免疫佐剂的应用被引量：2
- 2001年
- 曾明徐沪济李德富
- 关键词：免疫学功能免疫佐剂
- 我国血液制品中人细小病毒B19污染情况及基因型的初步研究被引量：4
- 2009年
- 目的分析我国血液制品凝血因子Ⅷ及原料血浆中人B19病毒污染情况及B19病毒的基因型。方法以B19病毒VP1／VP2区引物采用套式PCR法分别检测16批凝血因子Ⅷ成品及10批混合原料血浆中B19病毒的污染情况，并对阳性样品中B19病毒DNA的NS1-VPlu区进行测序和基因型分析。结果16批凝血因子Ⅷ中B19病毒DNA阳性率为75％（12／16），10批混合原料血浆中B19病毒DNA阳性率为100％（10／10）。序列测定结果表明，所有B19阳性样品中的病毒序列高度保守，同源性为98．3％～100％，且均为基因型Ⅰ型。结论我国凝血因子Ⅷ及原料血浆中B19病毒Ⅰ型污染率高，病毒核苷酸具有较高的保守性。
- 吴瑜耿彦生王菁舟张勇朝赵晨燕孟淑芳李德富
- 关键词：人细小病毒B19基因型
