李明卓
- 作品数:5 被引量:13H指数:1
- 供职机构:安徽农业大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金安徽省自然科学基金安徽省高校省级自然科学研究项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 一种黄酮醇3-O-半乳糖基转移酶CsUGT78A15基因及其编码蛋白和应用
- 本发明公开了一种黄酮醇3‑O‑半乳糖基转移酶CsUGT78A15基因,该基因从茶叶鲜叶中分离获得,具有如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列,该基因的编码蛋白具有如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列;本发明首次克隆...
- 高丽萍刘亚军代新龙姚胜波李明卓夏涛
- 文献传递
- 茶树丝氨酸羧肽酶基因的克隆及表达分析被引量:1
- 2013年
- 近年来,人们发现丝氨酸羧肽酶类蛋白(SCPL)参与植物次生代谢产物的酰基转移过程,即具有转酰基功能。本研究采用RT-PCR技术,获得了3个茶树丝氨酸羧肽酶基因的全长序列;生物信息学分析表明,3个CsSCPL蛋白均包含了1个底物结合位点、3个催化作用保守区和多个N-糖基化位点,及其Ser-Asp-His三联体催化中心等SCPL家族的典型特征;进化树分析表明,3个CsSCPL可能具有酰基转移酶的功能。实时荧光定量PCR结果表明3个基因在芽叶茎根中都有表达,其中,CsSCPL1和CsSCPL3在叶中的相对表达量明显高于茎和根,而CsSCPL2则在根中高表达。本研究成功地将CsSCPL重组到表达载体pET32a(+)上进行原核表达,并对诱导时间及诱导温度进行了优化;经IPTG诱导、SDS-PAGE检测,目标蛋白条带分子量为70 kD,与预测大小相符。
- 仇传慧李伟伟王云生李明卓骆洋刘亚军高丽萍夏涛
- 关键词:茶树生物信息学分析原核表达
- 茶树CsMYB4a转录因子以及靶基因Cs4CLs的功能验证
- 茶树是重要的非酒精饮料之一,富含的苯丙烷类化合物是其主要的功能成分。有关茶树体内苯丙烷类化合物合成调控机理的相关研究报道较少。第四亚组R2R3MYB转录因子是植物一类能够抑制苯丙烷以及木质素途径的转录抑制因子。苯丙烷途径...
- 李明卓
- 关键词:茶树靶基因
- 茶树肉桂酸4-羟基化酶基因的克隆及表达分析被引量:11
- 2015年
- 肉桂酸4-羟基化酶(Cinnamate 4-hydroxylase,C4H)是茶树苯丙烷代谢途径中的关键酶,能够影响木质素和类黄酮等次级代谢物的生物合成。本文采用5′-RACE技术,克隆了茶树肉桂酸4-羟基化酶基因(Cs C4H)的全长序列,其中开放阅读框长1 518 bp,编码505个氨基酸,推测蛋白分子量为58.15 k D,理论等电点为9.29。利用基因组步移技术克隆得到该基因上游1 840 bp的启动子序列。该启动子区域除了分布有TAAT-box和CAAT-box等基本转录元件外,还存在多个诱导型和组织特异型的顺式作用元件。实时荧光定量PCR结果表明该基因在芽、叶、茎、根中都有表达。将该基因重组至表达载体p YES-DEST52上,并在酿酒酵母WAT11中进行真核表达。利用LC-MS方法检测酶反应产物,结果表明目的蛋白能够催化肉桂酸生成p-香豆酸。
- 姚胜波王文钊李明卓许玉娇王云生刘亚军高丽萍夏涛
- 关键词:茶树启动子真核表达
- 一种黄酮醇3-O-半乳糖基转移酶CsUGT78A15基因及其编码蛋白和应用
- 本发明公开了一种黄酮醇3-O-半乳糖基转移酶CsUGT78A15基因,该基因从茶叶鲜叶中分离获得,具有如SEQ?ID?NO:1所示的核苷酸序列,该基因的编码蛋白具有如SEQ?ID?NO:2所示的氨基酸序列;本发明首次克隆...
- 高丽萍刘亚军代新龙姚胜波李明卓夏涛