熊俊
- 作品数：12 被引量：60H指数：5
- 供职机构：南京医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金江苏省国际科技合作项目南京医科大学校科研和教改项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- INS-1细胞中生长激素及催乳素受体和IGFBP-3的表达调控被引量：1
- 2003年
- 目的 :研究生长激素 (GH)和催乳素 (PRL)受体在鼠胰腺肿瘤 β细胞中的表达和调控及GH调节IGFBP 3的表达调控 .方法 :Northern ,检测PRL ,GH和IGFBP 3的mR NA表达 .细胞培养 ,受体蛋白竞争结合实验 ,检测细胞膜受体特异结合 .Western共价杂交 ,检测INS I细胞中IGFBP 3蛋白表达 .结果 :在INS 1中 ,每个细胞有 6 6 0 0个人生长激素 (hGH)受体蛋白结合点 .GH受体的mRNA分子为 1 .6kb,PRL受体mRNA为 0 . 5kb.bGH和rPRL抑制GH受体mRNA的表达 ,而bGH和rPRL上调促进PRL受体mRNA的表达 .在INS 1中GH ,PRL和IGF I对IGFBP 3的mRNA和蛋白表达均有促进作用 .结论 :GH和PRL控制鼠胰腺β细胞的GH和PRL受体表达 ,GH对IGFBP 3表达作用不是通过IGF
- 德伟徐桦程志祥熊俊倪雪峰
- 关键词：IGFBP-3胰腺Β细胞
- 大鼠胰腺蛋白质组研究中双向电泳技术的初步建立被引量：5
- 2003年
- 目的:初步建立大鼠胰腺蛋白质组研究中双向电泳技术,提高其分辨率及重复性。方法:应用大鼠成年和胚胎18天胰腺组织提取的总蛋白,对以载体两性电解质pH梯度为第一向的双向电泳关键因素与环节,如样品处理、凝胶制备、电泳参数等进行一系列的优化。结果:获得了分辨率及重复性均很好的双向电泳图谱。结论:通过对各种条件的优化,初步建立了双向电泳技术,为研究胚胎胰腺不同时期特异性蛋白的表达及分子标志打下基础。
- 程志祥熊俊倪雪峰顾冬民德伟
- 关键词：双向电泳胰腺蛋白质组
- 急性肺损伤小鼠NF-κB的表达被引量：3
- 2004年
- 目的:研究核转录因子-κB(nuclearfactor-κB,NF-κB)在急性肺损伤的动态改变,以期找到NF-κB在肺损伤中的作用。方法:25只雄性小鼠随机分为5组,正常对照及不同时间点致伤组,致伤组腹腔注射脂多糖形成急性肺损伤模型,采用免疫印迹和免疫组化法检测正常鼠及致伤鼠肺组织中NF-κB的表达。结果:脂多糖注射后1hNF-κB即开始增高,3h达高峰,随后开始下降。结论:NF-κB可能是急性肺损伤发病中的一个关键性因子。
- 朱自路熊俊徐桦陆珊华孙爱民
- 关键词：急性肺损伤核转录因子-ΚB脂多糖
- 大鼠胰腺发育中巢蛋白的表达变化
- 目的:探讨巢蛋白(nestin)在大鼠胚胎后期、新生期、成年三阶段的核酸、蛋白水平表达的变化。方法:应用RT-PCR、免疫组化的方法进行半定量、定位分析。结果:在胚胎后期、新生期、成年三阶段nestin在核酸、蛋白水平均...
- 倪雪峰袁栎程志祥熊俊顾冬民朱自路周锦勇仲燕德伟
- 文献传递
- 巢蛋白在大鼠胚胎、新生及成年胰腺中的表达变化被引量：25
- 2004年
- 目的 :探讨巢蛋白 (nestin)在胚胎后期、新生期、成年三阶段的核酸、蛋白水平表达的变化 .方法 :取三个发育时期的胰腺 ,应用RT PCR、免疫组化的方法进行半定量、定位分析 .结果 :在胚胎后期、新生期、成年三阶段nestin在核酸、蛋白水平均有表达 ,阳性细胞主要分布在胰岛 ,在腺泡周围的外分泌中有少量分布 .结论 :随大鼠胰腺的生长发育 ,核酸、蛋白表达下调 .
- 倪雪峰袁栎程志祥熊俊顾冬民朱自路周锦勇仲燕德伟
- 关键词：巢蛋白胰腺逆转录-聚合酶链反应免疫组化
- 血管内皮抑素的原核表达及多克隆抗体的制备被引量：1
- 2002年
- 背景与目的:本实验拟在原核系统中表达并纯化人血管内皮抑素(endostatin),制备鼠抗人血管内皮抑素多克隆抗体。方法:设计引物扩增内皮抑素的cDNA,重组入原核表达载体并在大肠杆菌中诱导表达,应用纯化产物免疫3只小鼠。结果:构建成制备人血管内皮抑素的原核表达载体pQE-30,并转化入大肠杆菌BL21中得到表达产物,经Ni亲和层析柱纯化后进行SDS-PAGE鉴定结果为单一组分。利用纯化的人血管内皮抑素成功制备高滴度的鼠抗人血管内皮抑素多克隆抗体,并由Westernblot分析证实。结论:高纯度表达产物及多克隆抗体的制得为今后的研究提供了素材。
- 张一鸣王若宁李艳利顾冬民程志祥熊俊德伟陈丙莺
- 关键词：血管生成因子血管内皮抑素原核表达多克隆抗体
- 重组腺病毒ΔN IκBα的构建及其对A549细胞中NF-κB活性的抑制
- 2005年
- 目的: 探讨ΔNIκBα基因对NF -κB活性的调节作用。方法: 构建去除Ser32和Ser36磷酸化位点的IκBα重组腺病毒Ad- ΔNIκBα。A549细胞分为 3组: 即LPS组、Ad- LacZ+LPS组和Ad -ΔNIκBα+LPS组。LPS组单纯用内毒素(LPS)激活NF -κB; Ad -LacZ+LPS组及Ad ΔNIκBα+LPS组在用LPS前 2d, 分别感染Ad -LacZ和Ad- ΔNIκBα。用West ernblot、电泳迁移率变动分析 (EMSA)和ELISA法分别检测LPS刺激后 5h, 细胞总蛋白中NF κB的活性和培养上清中TNF -α及IL- 6的含量。结果: Ad -ΔNIκBα+LPS组NF -κB的活性, TNF- α和IL -6的含量, 均显著低于LPS组及Ad- LacZ+LPS组。结论: 突变后的IκBα可明显抑制NF- κB活化, 减少TNF- α和IL- 6的释放, 有望成为一种强有力的抗炎治疗制剂。
- 朱自路程志祥熊俊陈丙莺
- 关键词：IKB重组腺病毒
- 胰岛素样生长因子Ⅱ基因在大鼠INS-1细胞中表达的调控
- 2002年
- 目的 研究不同浓度葡萄糖对INS 1细胞IGF Ⅱ基因表达的调节及对INS 1细胞增殖的作用 ,并比较其对IGF Ⅱ与胰岛素基因表达的关系。方法 采用Northern杂交分析IGF ⅡmRNA表达 ,用3 H 胸腺嘧啶掺入法检测细胞增生。结果 IGF Ⅱ在INS 1细胞中表达。当葡萄糖浓度为 10～ 2 0mmol/L时 ,IGF ⅡmRNA表达量提高 3倍以上。佛波醇十四乙酸对INS 1细胞的IGF ⅡmRNA的表达及增生不起作用 ,而Forskolin可抑制INS 1细胞的IGF ⅡmRNA表达。结论 高浓度葡萄糖促进INS 1细胞中IGF ⅡmRNA表达 ,低浓度的葡萄糖环境中胰岛素mRNA的表达量高。
- 德伟吴月徐桦程志祥熊俊Paul Czernichow
- 关键词：胰岛素葡萄糖基因表达
- 巢蛋白和胰岛素在大鼠胰腺不同发育阶段的表达被引量：7
- 2004年
- 目的:探讨巢蛋白(nestin)在胚胎后期、新生期、成年3阶段的mRNA、蛋白水平表达的变化。方法:应用RT-PCR、免疫组化的方法进行半定量、定位分析。结果:在胚胎后期、新生期、成年3阶段Nestin在mRNA、蛋白水平均有表达,Nestin阳性细胞主要分布在胰岛中,腺泡周围的外分泌组织中有少量分布。结论:Nestin随大鼠胰腺的生长发育,核酸、蛋白表达下调,胰岛内Nestin阳性细胞百分数表达也下调。
- 倪雪峰彭韬程志祥熊俊顾冬民徐桦德伟
- 关键词：巢蛋白胰岛素胰腺RT-PCR
- 咪喹莫特抑制哮喘大鼠气道炎症转录水平的研究被引量：13
- 2003年
- 目的 探讨咪喹莫特拮抗支气管哮喘气道炎症的分子机制。方法 卵清蛋白腹腔注射与雾化吸入建立大鼠哮喘模型,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定了不同剂量咪喹莫特对哮喘大鼠肺组织白介素(IL)-4mRNA、IL-5mRNA、IL-12mRNA和干扰素(IFN)-γmRNA表达的影响。结果 咪喹莫特各治疗组及地塞米松组能显著抑制哮喘大鼠肺组织中IL-4、IL-5mRNA的表达(与哮喘组比,均为P<0.001;与空白对照组比,均为P>0.05),各咪喹莫特组同时能显著增加IL-12、IFN-γmRNA表达(与哮喘组比,均为P<0.001;与空白对照组比,均为P>0.05),而地塞米松组不能增加IL-12、IFN-γ mRNA的表达(与哮喘组比,均为P>0.05;与空白对照组比,均为P<0.001)。咪喹莫特各治疗组间无显著性差异。结论 咪喹莫特能降低哮喘大鼠肺组织中IL-4和IL-5基因转录,增加IL-12和IFN-γ基因转录,进而抑制嗜酸性粒细胞的聚集、活化,发挥其抗气道炎症的作用。
- 吴巧珍殷凯生王祥熊俊德伟
- 关键词：哮喘咪喹莫特气道炎症逆转录-聚合酶链反应
