王宝琴
- 作品数：69 被引量：242H指数：9
- 供职机构：滨州学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划山东省自然科学基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 巴马香猪氨基肽酶N截短基因的克隆与原核表达被引量：1
- 2017年
- 为获得猪流行性腹泻病毒(PEDV)受体猪氨基肽酶N(pAPN)抗原,提取巴马香猪小肠绒毛上皮的总RNA,PCR扩增获得pAPN基因的主要抗原区片段,并将其克隆至原核表达载体pET-32a中,将重组质粒pET-32a-pAPN转化大肠埃希菌BL21,通过不同浓度的IPTG、不同诱导时间进行诱导表达,以确定目的蛋白表达的最佳条件。经SDS-PAGE和抗组氨酸标签的单抗进行Western blot检测重组蛋白在大肠埃希菌中的表达,结果显示,原核表达产物在诱导温度37℃、IPTG浓度为0.8mmol/L,诱导4h可获得最佳表达,产物分子质量约为45ku,获得的目的蛋白大小与预期一致。
- 王文秀张艳王宝琴谢金文刘博沈志强
- 关键词：克隆原核表达
- 高钙高钠日粮致蛋仔鸡代谢障碍的研究被引量：5
- 2000年
- 王宝琴李增魁贺普霄
- 关键词：蛋仔鸡代谢障碍生长发育剖检变化存活率生化指标
- 角鲨烯的来源及其制备方法研究进展被引量：10
- 2015年
- 简述了角鲨烯生物活性及其应用、来源和自然分布,比较了不同来源角鲨烯的传统制备方法;介绍了通过新型产油植物和微生物进行角鲨烯生产;提出利用基因工程和人工合成获取角鲨烯的方法;展望角鲨烯未来研究方向与应用。
- 王宝琴任丽丽
- 关键词：生物活性
- 灰树花β-葡聚糖的镇痛抗炎作用被引量：4
- 2009年
- 初步探讨灰树花β-葡聚糖的抗炎和镇痛作用。通过小鼠热板舔足反应和小鼠扭体反应,观察灰树花β-葡聚糖的镇痛作用;通过二甲苯诱导小鼠耳肿胀试验和松节油诱导大鼠气囊肉芽增生模型,观察灰树花β-葡聚糖的抗炎作用。肌肉注射4.0mg·kg-1灰树花β-葡聚糖,可显著减少冰醋酸引起的小鼠扭体反应次数和抑制二甲苯诱导的小鼠耳肿胀,肌肉注射3.2mg·kg-1灰树花β-葡聚糖,就可明显抑制松节油诱导的大鼠气囊肉芽肿增生。研究结果初步表明,灰树花β-葡聚糖对实验动物急性、慢性炎症均有明显的抗炎作用;并且对冰醋酸引起化学刺激引起的疼痛反应有明显镇痛作用。
- 张彬彬徐泽平王宝琴孙红武张艳
- 关键词：灰树花多糖Β-葡聚糖抗炎镇痛
- FMDV vp1基因在烟草中表达及转基因烟草的免疫效果被引量：1
- 2005年
- 通过三亲杂交法,构建克隆有阿克苏(Akesu/58) O 型口蹄疫病毒vp1 基因的双元表达载体pBin FMDVVP1。采用农杆菌介导法转化NC89烟草叶盘,经卡那霉素筛选,共获得49株抗性植株。对抗性植株总DNA进行目的基因的PCR检测,有40株阳性植株。对阳性植株总RNA进行目的基因的RT PCR检测,有21株阳性植株。将7株ELISA和Western blot检测阳性植株叶片提取物分别与弗氏佐剂乳化,在0、15、30 和45d 腹膜腔接种Balb/C小白鼠,于第4次免疫后第9d进行血清抗体检测;第12d用104SM50 LD的同源强毒进行攻击;攻毒后24h采血,通过乳鼠病毒血症试验判定攻击Balb/C小白鼠的发病和保护情况。结果表明:双元表达载体pBin FMDVVP1构建正确;vp1基因转入NC89烟草并获得表达;7组中有2组Balb/C小白鼠血清抗体呈阳性,攻毒保护率分别为100%和63%。证明2株转基因烟草表达的VP1蛋白具有较好的免疫原性,所免疫的2 组Balb/C小白鼠对同源强毒攻击有一定的抵抗能力。
- 王宝琴张永光王小龙王永录潘丽王文秀董金杰吕建亮
- 关键词：口蹄疫病毒烟草免疫
- 冬枣轮纹病病原真菌的分离及其拮抗菌的初筛被引量：4
- 2014年
- 以患轮纹病的冬枣果肉组织作为分离对象,将筛选出的真菌经单孢分离纯化后进行回接试验。依据回接试验中接菌枣果的发病症状确定出冬枣轮纹病的病原真菌,并通过其形态特征、培养特性及ITS序列分析对该菌株进行鉴定。摸索该病原菌的最适培养条件,同时测定了该病原菌的胞内毒素及胞外毒素的毒力。利用平板对峙培养法筛选有拮抗作用的细菌,并进行该拮抗细菌的形态特征观察、生理生化试验及16S rDNA序列分析。结果表明:本研究中分离的致冬枣轮纹病病原真菌为Botryosphaeria dothidea,该菌最适碳源为蔗糖,最适氮源为蛋白胨,最适pH值为5,最适生长温度为27℃。筛选获得对该致病真菌有一定拮抗作用的细菌JK,初步鉴定为芽孢杆菌属(Bacillus sp.)。即本研究中筛选的芽孢杆菌属(Bacillus sp.)细菌在冬枣轮纹病的生物防治方面有潜在的应用价值。
- 刘雪红王宝琴
- 关键词：冬枣轮纹病病原真菌拮抗细菌
- 口蹄疫病毒Akesu/O/58株结构蛋白基因的克隆和细胞受体结合位点初探被引量：1
- 2008年
- 将Akesu/O/58口蹄疫病毒分离株牛舌皮毒适应乳鼠,通过RT-PCR法分别获得了该病毒结构蛋白基因vp1和p1。结果表明:vp1和p1基因分别为639 bp和2 208 bp,与Akesu/O/58细胞适应株FMDV的vp1和p1基因核苷酸序列的同源性分别为83.9%和84.7%,氨基酸序列的同源性为89.7%和95.1%。本试验分离株与OHK99、O1K、Tai wan97病毒株的细胞受体结合位点均为RGD(Arg-Gly-Asp),而Akesu/O/58细胞适应株的细胞受体结合位点为SGD(Ser-Gly-Asp)。
- 王宝琴张永光潘丽王文秀吕建亮
- 关键词：口蹄疫病毒结构蛋白基因克隆
- 水稻类黄酮3'-羟化酶基因克隆及植物表达载体的构建被引量：1
- 2012年
- 参考GenBank中发布的水稻品种日本晴位于10号染色体的F3'H基因序列设计特异引物,用PCR方法从水稻基因组中克隆F3'H基因片段,并将该片段克隆到pMD18-T载体进行测序和序列分析。结果表明,克隆的F3'H基因全长1 789 bp,GenBank登录号为HQ876708,该基因与日本晴基因组序列同源性为100%。分别将F3'H基因插入植物双元表达载体pPZP2Ha3(-)和pPZP2Ha3(+)中,获得F3'H基因正义和反义植物表达载体,同时转入根癌农杆菌中。该研究为利用农杆菌介导法转化F3'H基因,进一步研究F3'H基因功能奠定基础。
- 刘南南王宝琴李敏刘雪红管宇
- 关键词：水稻PCR扩增
- 一种β-葡聚糖铁复合物及其制备方法
- 本发明涉及生物工程技术领域和食品医药领域，具体提供了一种利用真菌β-葡聚糖为配体化合物，以三价铁为配位中心离子制备的β-葡聚糖铁及其制备方法，所制备的β-葡聚糖铁复合物含铁量高，水溶性好，不含游离铁离子，体外环境中稳定，...
- 王宝琴徐泽平
- 白缘(鱼央)5S rDNA的扩增分析及其在染色体上的FISH定位
- 2016年
- 本文分别对雌雄白缘(鱼央)(鱼央)的5SrDNA进行了PCR扩增和序列分析,并采用双色荧光原位杂交(FISH)技术,以白缘(鱼央)的5SrDNA序列和小麦的45SrDNA为探针,对其在白缘(鱼央)雌雄中期染色体上进行了FISH定位研究。结果表明,白缘(鱼央)5SrDNA序列无雌雄差异;5SrDNA的保守区序列为117bp;5SrDNA和45SrDNA分别被定位于白缘(鱼央)的性染色体和第5号染色体上。同时从GenBank中获得了22种鱼的5SrDNA,运用DNAman软件构建了23种鱼的系统发育树,对白缘(鱼央)的进化地位进行了初步研究。本研究为阐明白缘(鱼央)在鱼类系统进化中的位置、重复序列在脊椎动物性染色体上的分布状况以及与性别决定与分化的关系,提供了资料积累和分析依据。
- 张伟伟付元帅邵燕王宝琴石东里张兰
- 关键词：PCRRDNA系统进化树染色体FISH
