王朝绚
- 作品数:4 被引量:9H指数:2
- 供职机构:北京化工大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学化学工程农业科学更多>>
- 大肠杆菌中插入表达信号肽提高吡咯喹啉醌产量的研究被引量:3
- 2013年
- 本文将载体pET-22b的信号肽基因pelb插入pET-28a-pqq的T7启动子和pqq基因之间,得到重组工程菌E.coli BL21(pET-28a-pelb-pqq),发酵生产吡咯喹啉醌(PQQ)。结果表明PQQ最高产量可达40.73 mg/L,比对照菌E.coli BL21(pET-28a-pqq)提高了24.36%。此外,工程菌和对照菌前3 h发酵的单位菌体产量及单位菌体产率均较高,且此后呈下降趋势。而E.coli BL21(pET-28a-pelb-pqq)在21h后的PQQ产量及生物量均增加,推测PQQ产量与菌体生物量之间存在同促关系。
- 王朝绚葛喜珍田平芳
- 关键词:吡咯喹啉醌信号肽大肠杆菌
- 紫外线—氯化锂诱变选育吡咯喹啉醌高产菌被引量:1
- 2013年
- 以K.pneumoniae为出发菌株,通过紫外线和氯化锂诱变筛选PQQ高产菌。结果表明,当紫外照射时间为45 s时,致死率为85%;当氯化锂剂量为0.3%时,致死率达85%。紫外诱变所得菌株U1和U2的PQQ产量分别是出发菌株的2.7倍和6倍。氯化锂诱变所得菌株L1的PQQ产量是出发菌株的5倍。紫外线和氯化锂复合诱变所得菌株F1的PQQ产量是出发菌株的1.4倍。紫外诱变所得菌株U2经连续传代15次,其PQQ产量仍能达到原代菌的95%,表明该菌能稳定生产PQQ。该研究为进一步提高PQQ产量奠定了基础。
- 王朝绚李会玉王爽葛喜珍
- 关键词:吡咯喹啉醌肺炎克雷伯氏菌紫外线氯化锂诱变
- 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因的克隆与原核表达被引量:2
- 2012年
- 以筛选得到的鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii)基因组DNA为模板,PCR扩增了磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)基因,构建了克隆载体pET-28a-PEPC。将测序结果正确的重组子转化到大肠杆菌BL21中,获得重组菌BL21-pET-28a-PEPC。经IPTG诱导,该重组菌实现了PEPC的高效表达,并且生长速度明显快于对照菌大肠杆菌BL21,可作为宿主用于构建碳固定工程菌。
- 辛鑫王朝绚葛喜珍刘辉田平芳
- 关键词:鲍曼不动杆菌磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶CO2固定基因克隆
- 吡咯喹啉醌工程菌构建及关键基因研究
- 吡咯喹啉醌(PQQ),是一种新型辅酶,利用微生物产PQQ是目前研究的热点也是难点,本论文以肺炎克雷伯氏菌(Klebsiellapneumoniae)、大肠杆菌(E.coli BL21)为宿主菌,采用诱变和分子生物学的方法...
- 王朝绚
- 关键词:吡咯喹啉醌肺炎克雷伯氏菌孔蛋白信号肽葡萄糖脱氢酶