王爱丽
- 作品数：6 被引量：26H指数：3
- 供职机构：吉林大学白求恩医学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划吉林省科技厅科研基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生化学工程更多>>
- 金属鳌合亲和层析填料的制备及其在重组六聚组氨酸融合蛋白中的应用被引量：3
- 2008年
- 目的:制备Ni2+螯合金属层析填料,分离HSP65-MUC1-histag基因工程蛋白质。方法:应用Sepharose4B作为载体,亚氨基二乙酸(IDA)为起始材料合成金属鳌合层析填料,同时应用5-Br-PADAP一阶导数光度法对Ni2+的吸收峰进行鉴定和定量。最后应用制备的Ni2+-Sepharose4B纯化HSP65-MUC1-histag。结果:Ni2+最佳吸收峰为574nm,凝胶中螯合的Ni2+为5.2mg.g-1,Ni2+-Sepharose4B金属螯合亲和层析纯化重组蛋白纯度≥98%,回收率≥90%。结论:制备了能应用于蛋白质亲和层析的高效金属鳌合层析填料。
- 张培因王燕媚卫红飞王爱丽于永利王丽颖
- 关键词：纯化
- 8R-MUC1核心肽融合蛋白的原核表达及纯化被引量：4
- 2005年
- 目的 :构建蛋白质转导结构域 8个精氨酸聚合体 (8R)与 MUC1核心肽融合蛋白的原核表达载体 ,并表达、纯化出具有生物学活性的 8R- MUC1核心肽融合蛋白。方法 :以 PCR法从 HSP6 5 - MUC1- p ET2 8a质粒中钓取 MUC1核心肽 2个重复序列片段 ,连入 p MD18- T载体 ,然后用酶切、连接的方法从 T载体上获得 MU C1核心肽 6重复序列片段 (MU CPT) ,将其克隆入含 8R的 p ET2 6 b+ 原核表达载体中构建 8R与 MU CPT融合蛋白(8R- MU CPT)表达载体。用 IPTG诱导转化 8R- MU CPT表达载体的大肠杆菌 BL2 1(DE3) ,并以镍螯合层析法纯化 8R- MU CPT融合蛋白。结果 :构建了 8R与 MU C1核心肽 6个重复序列片段的融合蛋白原核表达载体8R- MUCPT- p ET2 6 b+ ,并在 BL2 1(DE3)中表达了 8R- MU CPT融合蛋白 ,经镍螯合层析获得纯度为 95 .5 %的8R- MUC1核心肽融合蛋白。结论 :构建了 8R- MU C1核心肽融合蛋白原核表达载体并成功表达与纯化出具有生物学活性的融合蛋白。
- 唐艳李慧张培因李大鹏王燕媚卫红飞王爱丽于永利王丽颖
- 关键词：MUC1重组融合蛋白质类
- 建立一种用重组蛋白检测抗口蹄疫病毒抗体的间接ELISA方法被引量：5
- 2007年
- 目的研究以重组蛋白作为包被抗原检测口蹄疫病毒(FMDV)感染后的动物血清中特异性抗体的可能性,为建立一种非病毒颗粒的ELISA检测试剂盒提供实验依据。方法利用自行构建表达的O型口蹄疫病毒VP1表位肽重组蛋白(VP1epi)作为包被抗原,采用间接ELISA方法确定抗原的最佳工作浓度和包被方法,优化各项实验条件,并以FMDV感染后的豚鼠血清作为标准阳性血清确定ELISA方法的特异性和灵敏度。结果FMDV感染后的阳性豚鼠血清可以很好地识别VP1epi重组蛋白,用此蛋白包被检测抗FMDV抗体的灵敏度可达1∶3200,并证明所检测的抗体是FMDV特异性的。结论VP1epi重组蛋白可以替代FMDV颗粒用于建立检测抗FMDV抗体的ELISA试剂盒。
- 胡大利冯宇张培因冉波卫红飞邵明玉王爱丽王丽颖于永利
- 关键词：口蹄疫病毒间接ELISA
- 热休克蛋白65-MUC1融合蛋白对小鼠干扰素γ产生细胞的诱生作用被引量：1
- 2004年
- 目的 :研究热休克蛋白 6 5 - MU C1 (HSP6 5 - MU C1 )融合蛋白对小鼠免疫细胞的激活作用。方法 :用HSP6 5 - MU C1融合蛋白免疫 C5 7BL/ 6小鼠 3次后 ,取脾脏和淋巴结 ,分离淋巴细胞 ,体外用 HSP6 5 - MU C1融合蛋白、 MUC1肽或非特异性刺激剂如 Cp G ODN和 Con A进行刺激 ,采用酶联免疫斑点法 (enzyme linkedim munospot,EL ISPOT)检测免疫细胞分泌干扰素 γ的情况。结果 :HSP6 5 - MU C1融合蛋白免疫后小鼠的淋巴细胞在特异性或非特异性抗原刺激下所分泌的干扰素 γ比 PBS组明显增多。结论 :HSP6 5 - MUC1融合蛋白对小鼠干扰素
- 李大鹏王莉卫红飞张培因吴秀丽万敏王燕媚王爱丽杨世杰王丽颖
- 关键词：诱生作用
- DNA自动测序中的常见影响因素及测序反应体系的优化被引量：2
- 2004年
- 目的 :分析和研究 DNA测序过程中影响因素及其测序反应体系的优化。方法 :对 DNA测序体系中模板、引物、测序产物的纯化及 3种测序反应体系对测序结果的影响进行比较。结果 :采用 5 μL (含 1μLTRR)、 5 μL (含 2 μL TRR)和 10 μL (含 4 μL TRR)测序反应体系对同一质粒 DNA进行测序 ,其可判读序列都能达到 72 0 bp以上。结论 :DNA自动测序的质量与模板的纯度、浓度、所用引物、测序反应体系及测序反应产物的纯化有直接的关系。采用 5 μL (含 1μL TRR)测序反应体系在保证测序质量的同时可降低 DNA测序成本。
- 许艳卫红飞胡小平包木胜王爱丽程岩王丽颖
- 关键词：DNADNA电泳毛细管成本及成本分析
- 不同诱导剂对工程菌发酵及重组蛋白表达的影响被引量：11
- 2005年
- 目的观察不同诱导剂对工程菌发酵及HSP-MUC1重组蛋白表达的影响,从而选取最佳诱导表达条件。方法分别用IPTG和乳糖作为诱导剂,发酵表达HSP-MUCI重组蛋白质,并对重组蛋白质表达量和性状进行分析。结果用IPTG诱导发酵的菌体经普通匀浆法即可将细菌破碎;而用乳糖发酵的菌体经普通匀浆法不能破菌,通过延长发酵时间也能达到与IPTG诱导相同的表达量。结论乳糖可以作为基因工程重组蛋白的理想诱导剂。
- 卫红飞万敏杨世杰王燕媚李大鹏王爱丽于永利王丽颖
- 关键词：诱导剂工程菌重组蛋白细菌发酵乳糖
