胡海涛
- 作品数：55 被引量：197H指数：8
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- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 密花胡颓子果实主要类胡萝卜素组分及含量分析被引量：15
- 2014年
- 【目的】胡颓子属植物牛奶子果实大量积累番茄红素,高达番茄的17倍,而该属中果实大、口感好的密花胡颓子果实中主要类胡萝卜素组分及含量尚不清楚。研究利用高效液相色谱法检测德甜密花胡颓子1号和2号2个品种的成熟果实中主要类胡萝卜素组分及含量。【方法】以甲醇∶氯仿=1∶2(v/v)提取果实中类胡萝卜素,高效液相色谱法(Agilent 1260)进行类胡萝卜素定性定量分析。色谱条件:YMC C30分析色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为A(100%甲醇)、B(含0.2%乙酸铵的80%甲醇)和C(甲基叔丁基醚),采用梯度洗脱,洗脱程序为0—6 min由95%A+5%B组成,7 min时梯度改变为80%A+5%B+15%C,12—32 min梯度改变为30%A+5%B+65%C,48—50 min梯度改变为95%A+5%B,维持该浓度至分析结束(60 min),流速为1 mL·min-1,柱温25℃,进样量20μL,检测波长450 nm。【结果】德甜密花胡颓子1号和2号2个品种的成熟果实均积累了大量的番茄红素和β-胡萝卜素,品种间的积累量存在差异。其中德甜密花胡颓子1号果实中β-胡萝卜素积累量达(231.84±16.00)μg·g-1DW,是目前已报道植物中β-胡萝卜素含量高的物种之一;德甜密花胡颓子2号品种果实中的番茄红素含量高达(1 054.10±29.19)μg·g-1DW,是番茄果实(150μg·g-1DW)的7倍。【结论】密花胡颓子果实中高积累番茄红素和β-胡萝卜素,是继牛奶子之后,在胡颓子属中发现的又一高积累特异类胡萝卜素的野生植物资源,为今后研究果实高积累番茄红素和β-胡萝卜素的分子机理提供了理想的研究材料。
- 胡海涛金晓琴成龙平杨莉陈建华番汝昌杨玲
- 关键词：番茄红素Β-胡萝卜素高效液相色谱
- 超表达牛奶子EutPDS提高番茄果实番茄红素含量被引量：4
- 2017年
- 【目的】牛奶子果实中富含番茄红素,八氢番茄红素脱氢酶(PDS)是番茄红素生物合成上游的重要酶。特异性超表达牛奶子Eut PDS基因(Gen Bank登录号:GQ254067),以期提高番茄果实中的番茄红素含量。【方法】通过RT-PCR方法从牛奶子果实中分离EutPDS基因cDNA及基因组全长,Southern杂交分析基因的拷贝数,专用软件分析此基因及蛋白结构。采用番茄2A11启动子构建果实特异性超表达载体,转化根瘤农杆菌GV3101后,借助农杆菌介导的叶盘法转化至‘中蔬四号’番茄。半定量RT-PCR检测转基因植株果实EutPDS基因的表达,高效液相色谱仪、实时定量PCR分别用于分析转基因番茄果实主要类胡萝卜素组分含量和内源类胡萝卜素代谢相关基因表达的变化。【结果】从牛奶子中克隆的EutPDS基因长度为1 920 bp,含有1 749 bp ORF。其基因组序列无内含子,单拷贝。EutPDS编码1个582个氨基酸的蛋白,该蛋白与其他植物PDS有很高的同源性,具有典型的二核苷酸结合域、类胡萝卜素结合域。采用农杆菌介导方法转化番茄叶盘,PCR检测,潮霉素筛选,成功获得了2个EutPDS转基因番茄株系,其果实颜色较对照更红。半定量分析显示外源EutPDS基因在转基因番茄果实中超表达,实时定量PCR分析表明番茄红素生物合成上游2个内源基因Sl PSY和Sl ZDS受影响显著上调,同时1个下游基因Sl LCY-e的表达则显著下调,使得转基因番茄果实中番茄红素含量为野生型的2倍,但β-胡萝卜素含量无显著变化。【结论】在番茄果实中特异性超表达牛奶子EutPDS基因可有效促进番茄果实中番茄红素的合成和积累。
- 程珍霞胡海涛杨莉王长春郭卫东杨玲
- 关键词：番茄番茄红素
- 玉簪ACC氧化酶基因RNA干涉表达载体的构建被引量：4
- 2008年
- 以玉簪花瓣为材料,用改良的硼酸盐法提取总RNA。根据已报道的ACC氧化酶(1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid oxidase,ACO)基因的保守序列,设计带限制性内切酶位点的特异性引物,用RT-PCR技术获得约330 bp的片段。序列分析表明,该片段与GenBank已知ACO基因序列高度同源。将此片段以正向和反向插入到中间载体pBSin内含子两端。利用pCAMBIA35S-1301作为桥梁载体,构建RNA干涉表达载体pCAMBI-A-ACO。采用冻融法将pCAMBIA-ACO导入根癌农杆菌GV3101中,得到完整的Ti质粒表达载体系统。
- 徐强王长春胡海涛王芳杨玲
- 关键词：玉簪ACC氧化酶RNA干涉
- 2,4-表油菜素内酯对高温胁迫下金线莲的影响被引量：2
- 2022年
- 为了探讨EBR(2,4-表油菜素内酯)对金线莲耐高温胁迫的影响,本文研究了高温胁迫下喷施EBR对金线莲叶片中活性氧代谢的影响。结果表明,高温胁迫导致金线莲大量积累ROS,使细胞受到伤害,其O_(2)^(-)产生速率和H2O2含量显著增加,AsA含量显著下降,SOD、CAT、APX、MDHAR、DHAR、GR等酶活性显著下降;而外源喷施1.0μmol·L^(-1) EBR可显著提高SOD、CAT、MDHAR、DHAR和GR的活性,AsA含量上升,O_(2)^(-)产生速率和H_(2)O_(2)含量显著下降。由此可见,外源EBR处理可以提高金线莲叶片抗氧化酶活性,有效清除活性氧,增强植株抵抗高温胁迫的能力,本研究结果为生产上喷施EBR缓解金线莲高温胁迫提供了理论依据。
- 叶巧玲董向阳颜丹红屈雨晨刘永立胡海涛
- 关键词：金线莲高温胁迫抗氧化系统
- 浙江省野生牛奶子资源调查被引量：8
- 2008年
- 对利用价值较高的野生植物资源牛奶子(Elaeagnus umbellata Thunb.)在浙江省的分布进行了实地调查.结果表明,牛奶子在浙江省各地分布较为广泛,但是由于开荒造田、乱砍滥伐、生态自身竞争等原因,很多地区的牛奶子种质资源遭受严重破坏,个别地区现存数量急剧下降.对浙江省野生牛奶子种质资源的保护、扩增以及合理开发利用等相关研究亟待进一步加强.
- 郭新伦王长春胡海涛陈建华杨莉杨玲
- 番茄红素生物合成调控基因工程研究进展
- 2015年
- 番茄红素对人体的健康有着至关重要的作用,在清楚高等植物类胡萝卜素生物合成代谢相关基因的基础上,利用生物工程手段调控上游基因的超表达和下游基因的沉默,以提高番茄红素的含量已取得了进展。
- 程珍霞胡海涛
- 关键词：番茄红素基因表达调控生物工程
- 手指柠檬茎段离体再生体系建立
- 2023年
- 以手指柠檬(Citrus australasica)茎段为外植体,通过离体器官发生途径诱导形成不定芽,探讨不同植物生长调节剂组合、培养基类型以及暗培养时间对其愈伤组织诱导和植株再生的影响,建立手指柠檬离体再生体系。结果表明,1/2MS+4.0 mg·L^(–1)ZT+30.0 g·L^(–1)蔗糖为手指柠檬茎段不定芽诱导的最佳配方,14天暗培养后转移到光下培养效果最好,愈伤组织及不定芽诱导率均为100%,每外植体平均再生不定芽数达4.83。诱导不定根的适宜培养基配方为1/2MS+0.5 mg·L^(–1)NAA,生根率达94.43%,平均再生根数为3.9;在草炭:珍珠岩:蛭石=2:1:1(v/v/v)的混合基质中组培苗长势最好,成活率在90%以上。该研究建立了手指柠檬茎段离体再生体系,为手指柠檬的遗传改良和优良品种快繁奠定了基础。
- 谢纯刚刘哲章书声胡海涛
- 关键词：茎段离体再生
- 疣粒野生稻抗白叶枯病新基因的初步鉴定被引量：16
- 2008年
- 以10个菲律宾白叶枯病菌小种和1个中国白叶枯病菌小种为供试菌系,以高感白叶枯病水稻品种IR24及携有不同抗白叶枯病基因的近等基因系IRBB1等16个材料作为参照,对粳稻品种8411/疣粒野生稻体细胞杂交获得的两个抗白叶枯病新种质SH5和SH76进行了白叶枯病抗谱鉴定。结果表明SH5和SH76在苗期的抗谱较广,并且与已知抗病基因的抗谱不同,但与IRBB5(xa5)和IRBB7(Xa7)相似。分别用xa5和Xa7的分子标记2F_1R和M5进行检测,确定SH5和SH76中不含有xa5和Xa7基因。初步推测SH5、SH76可能含有一个新的抗病基因或者一个连锁的基因簇群。
- 黄佳男王长春胡海涛马伯军严成其杨玲
- 关键词：疣粒野生稻白叶枯病抗性基因分子标记
- 基于选择性域鉴别器的单细胞自动注释方法及装置
- 本发明提供基于选择性域鉴别器的单细胞自动注释方法及装置。该方法对包含批次信息的单细胞参考数据和单细胞查询数据进行统一处理,获得低维编码特征；通过选择性鉴别器，将不同来源的低维编码特征对齐，达到降低数据噪音的目的；以参考数...
- 杨晓春胡海涛曹戟何俏军严芳洁郭越尹昊
- 秋橄榄异戊烯焦磷酸异构酶基因的克隆及其表达特性分析
- 秋橄榄(Elaeagnus umbellate Thunb.)是一种胡颓子科胡颓子属植物，其成熟果实中富含番茄红素，含量相当于普通番茄的5～18倍.异戊烯焦磷酸异构酶(IPI)是萜类合成途径的关键酶，蛋白双向电泳图谱发现...
- 程珍霞成龙平胡海涛杨玲木
- 关键词：基因克隆实时荧光定量PCR
