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病毒载体与造血干细胞基因治疗被引量：7: 2003年; 多种获得性和遗传性疾病累及造血细胞。造血干细胞是人类基因治疗的重要靶细胞。成功的造血干细胞基因治疗不仅需要高效基因转移 ,还需要治疗基因的长期、高水平表达。反转录病毒载体是造血干细胞基因治疗的常用载体 ,结合优化的造血干细胞转导条件 ,其介导的腺苷脱氨酶缺陷引起的严重联合免疫缺陷和X染色体连锁的严重联合免疫缺陷的基因治疗已经获得初步成功 ;其他整合型病毒载体如慢病毒和腺相关病毒载体 ,也在临床前造血干细胞基因治疗研究中得到广泛应用。从病毒载体。; 董文吉祖振响刘德培梁植权; 关键词：造血干细胞反转录病毒载体慢病毒载体腺相关病毒载体基因治疗

4.1B蛋白的抑制肿瘤作用被引量：2: 2008年; 4.1R和Merlin是4.1蛋白超家族中两个功能比较清楚的成员,前者通过结合肌动蛋白和血影蛋白维持红细胞骨架结构的完整性;后者为抑癌蛋白,其缺失与脑膜瘤发生有关。4.1B蛋白是4.1R和Merlin的同源蛋白,与二者的结构和功能具有相似性。4.1B蛋白由三个保守的结构域构成,即FERM、SABD和CTD,通过这三个结构域,能与一系列蛋白质相互作用。4.1B蛋白表达缺失与脑膜瘤、乳腺癌和非小细胞肺癌的发生相关,而过量表达则可激活JNK信号途径,促进细胞凋亡;此外,4.1B蛋白还具有抑制肿瘤转移的功能。因此,目前多认为4.1B基因可能是一个抑癌基因。; 盛誉乔梅珊祁元明董文吉; 关键词：抑癌基因细胞信号蛋白质相互作用

一种简便的染色质免疫沉淀法的建立被引量：3: 2003年; 染色质结构和基因表达调节是当前国际前沿研究的热点 .染色质免疫沉淀法是研究染色质结构的首选方法 ,它不仅可用来研究体内反式因子与DNA的相互作用 ,也可以用来研究组蛋白修饰与基因表达的关系 .综合国外相关文献 ,建立了一种简便的染色质免疫沉淀法 ,并通过对诱导前后的MEL细胞中 β 珠蛋白基因簇组蛋白H3乙酰化的研究 ,证实了其可操作性 .结果表明 :高敏位点HS2和活跃基因 βmaj的启动子区域存在较高的组蛋白乙酰化水平 ,且诱导前后变化显著 ,而不活跃基因Ey的启动子区域则几乎检测不到组蛋白的乙酰化 ,且诱导前后无明显变化 .; 傅湘辉刘德培辛立郝德龙董文吉黄粤梁植权; 关键词：染色质组蛋白乙酰化基因表达调节

蛋白激酶AKT1磷酸化SATB1的效应研究: 目的:鉴定具有肿瘤转移促进或抑制功能的AKT1的新底物,进而阐明AKT在特定肿瘤和肿瘤发生与转移的特定阶段的具体作用。方法:1.SATB1是参与核组构和宏观基因表达调控的核基质蛋白,其含有潜在的AKT磷酸化模体,应用抗磷...; 陈勃薛征石秉炀闫月敏董文吉; 文献传递

腺相关病毒介导带基因座控制区核心序列的β-珠蛋白基因在红系细胞中整合与表达: 2000年; 为提高人β-珠蛋白基因在基因转移中的稳定性与在红系细胞中的表达水平,构建了带单个和多个基因座控制区核心序列的人β-珠蛋白基因腺相关病毒(ade-no-associated virus,AAV)载体AV53HS2Δβ2Neo和AV53HS432ΔβNeo。利用AAV载体介导的基因转移将两种重组体导入红系细胞(MEL),分析了它们在MEL细胞中的整合与表达。结果表明,AAV载体介导带多个基因座控制区核心序列的人β-珠蛋白基因在MEL细胞中较稳定整合,呈现与内源α-珠蛋白基因可比的表达水平。; 李斌刘德培王晶董文吉郭志晨夏薇梁植权; 关键词：Β-珠蛋白基因

病毒载体介导的β-地中海贫血基因治疗研究进展被引量：1: 2001年; β-地中海贫血是一种常见的造血系统遗传病,β-珠蛋白基因簇中的缺失或突变导致β-珠蛋白肽链合成减少或完全不能合成,从而造成α-珠蛋白肽链与β肽链的不平衡,出现贫血症状。β-珠蛋白基因簇基因座控制区(locus control region,LCR)的发现及整合型病毒载体的研究进展使β-地中海贫血基因治疗成为可能。LCR中单一DNaseI高敏位点或不同高敏位点核心序列组合构成miniLCR,能够指导病毒载体介导的基因转移中人珠蛋白基因在鼠红白血病细胞系中呈现高水平表达,而且在间接体内基因转移中可检测到人珠蛋白基因在骨髓移植受体动物中的长期存在和红系特异的一定水平的人珠蛋白基因的表达,为进行临床研究提供了可行性参考;另一方面,也对珠蛋白基因表达调控、病毒载体介导的基因转移效率和整合效率、靶向性整合和克服位置效应等方面的深入研究提出了更高要求。; 董文吉刘德培梁植权; 关键词：Β-地中海贫血基因治疗病毒载体

一种宏观基因调控分子SATB1: 2010年; 自身多聚化的SATB1(special AT-rich sequences binding protein 1)围绕异染色质形成笼状结构分布在细胞核中,SATB1不仅结合染色质DNA的核基质结合区(matrix attachment regions,MARs),也结合核基质,能够使DNA锚定在核基质并形成袢环状结构(loop)。SATB1的磷酸化、乙酰化和小泛素化样修饰可调节其DNA结合能力和细胞核内亚结构的定位;SATB1与多种蛋白质相互作用,能够募集染色质重塑复合物和组蛋白修饰酶,实现对其靶基因表达的时空特异性调控。SATB1在调节细胞分化、细胞凋亡、肿瘤生长与转移和X染色体失活等方面起到重要作用,并有可能成为肿瘤转移的治疗靶点。; 王娟王娟王娟; 关键词：SATB1 核基质结合区翻译后修饰肿瘤转移

丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶AKT2的体外激酶活性分析: 2010年; 目的建立蛋白激酶AKT2体外磷酸化检测体系.方法构建携带AKT2 cDNA编码区的pLNCX2逆转录病毒重组载体,包装重组病毒,转导293A细胞,G418筛选得到稳定表达组成型活化的AKT2细胞株,应用免疫沉淀获得蛋白激AKT2;将核基质结合蛋白SATB1的1～204的氨基酸序列及其47位丝氨酸的突变体S47A、S47D,分别与GST基因融合表达载体pGEX4T-1进行重组,经测序鉴定后转化大肠埃希菌BL-21,IPTG诱导表达经亲和纯化得到GST-SATB1 1-204、GST-SATB1 1-204 S47A和GST-SATB1 1-204 S47D融合蛋白;利用免疫沉淀的AKT2磷酸化GST-SATB1融合蛋白,应用免疫印迹检测其是否被磷酸化.结果细胞表达的蛋白激酶AKT2能高效的将野生型SATB1 1-204 磷酸化,而不能磷酸化其两种突变体.结论成功建立了一个蛋白激酶体外磷酸化系统.; 王娟王娟关洪斌闫月敏石秉炀杨奔薛征

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董文吉