蒋静
- 作品数：6 被引量：26H指数：3
- 供职机构：重庆医科大学附属儿童医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 氧化应激状态下肺泡Ⅱ型上皮细胞修复存活、凋亡及调控因子Bcl-2／p53的变化被引量：2
- 2008年
- 多种慢性肺疾病包括支气管肺发育不良（bronchopulmonary dysplasia，BPD）、肺纤维化等的病因之一是长时间吸人高浓度氧而导致肺氧化应激性损伤，其防治的根本难题是内源性肺泡上皮不能自行恢复，而由成纤维细胞替代形成肺纤维化。抗凋亡蛋白Bcl-2和促凋亡蛋白p53可参与细胞凋亡调控过程，但在氧化应激性肺损伤中仍少有报道。本文以体外培养的大鼠原代肺泡Ⅱ型上皮细胞（ATⅡ）为研究对象，以不同浓度过氧化氢（H2O2）处理，模拟活性氧（reactive oxygen species，ROS）攻击损伤ATⅡ细胞的体内情况，探讨氧化应激状态下ATⅡ细胞修复存活、凋亡及Bcl-2／p53的变化。
- 蒋静许峰陈娟方芳
- 关键词：蛋白BCL-2细胞凋亡调控蛋白P53细胞修复应激状态
- 大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的培养、鉴定及体外特性初步研究被引量：6
- 2010年
- 目的建立成年大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(ATⅡ细胞)分离、纯化、原代培养和鉴定的技术方法 ,并观察其体外生长特性及SP-A表达情况。方法将0.08%胰蛋白酶消化液从气管注入肺组织,消化分离ATⅡ细胞。将大鼠IgG包被的培养皿免疫吸附纯化后,进行原代培养。用倒置相差显微镜观察细胞生长情况,透射电镜(TEM)鉴定细胞,改良巴式染色法鉴定并计算细胞纯度,MTT法检测细胞增殖情况,Western blot检测细胞表达SP-A动态变化。结果细胞产量约为2.2×107个/只大鼠。电镜下观察到ATⅡ细胞特征性结构——板层小体;纯度大于90%。体外培养36～72h时细胞生长良好,细胞质内有较多颗粒;96h后细胞呈长索形,细胞内颗粒减少,并出现空泡。ATⅡ细胞表达SP-A在36h左右达高峰,之后表达减弱。结论利用0.08%胰蛋白酶消化分离和大鼠IgG免疫吸附纯化可获得满意的原代ATⅡ细胞。培养36～72h时细胞增殖旺盛,生长良好,SP-A表达丰富,是进行体外实验的良好时期。
- 符跃强蒋静陈娟陈聪方芳卢仲毅许峰
- 关键词：细胞培养板层小体
- 氧化应激状态下肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡变化和ERK信号转导机制
- 目的:探讨氧化应激状态下肺泡Ⅱ型上皮细胞(alveolar typeⅡepithelial cell,ATⅡ)修复存活、凋亡及其细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinas...
- 陈娟许峰蒋静方芳匡凤梧卢仲毅王兴勇
- 文献传递
- 氧化应激与肺细胞损伤凋亡信号途径被引量：7
- 2005年
- 氧化应激产生的活性氧 (ROS)与细胞凋亡关系密切 ,氧化应激导致肺泡上皮细胞的损伤和 (或 )凋亡 ,其作用方式可以是直接的 (通过打破细胞内氧化还原状态平衡 ) ,也可以是间接的 (通过激活氧化还原敏感的细胞信号转导通路 )。本文就肺细胞凋亡与氧化应激的关系作一概述 ,旨在为氧化应激相关疾病的抗氧化剂治疗和凋亡信号途径干预治疗提供理论依据。
- 蒋静许峰
- 关键词：氧化应激凋亡肺细胞
- 氧化应激状态下肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡及细胞外信号调节激酶信号转导机制的研究被引量：11
- 2007年
- 目的 探讨氧化应激状态下肺泡Ⅱ型上皮细胞（ATⅡ型细胞）修复存活、凋亡及其细胞外信号调节激酶（ERK）对凋亡的调控作用。方法 采用过氧化氢（H2O2）处理体外分离纯化培养的原代大鼠ATⅡ型细胞；用蛋白质免疫印迹法（Western blotting）检测H2O2刺激后ATⅡ型细胞磷酸化ERK1／2（p—ERK1／2）的表达，用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法（MTT）检测细胞存活率；用流式细胞仪检测细胞凋亡率，并观察ERK特异性抑制剂PD98059干预后细胞凋亡的变化。结果 与对照组比较，10μmol／L和100μmol／L的H2O2处理对ATⅡ型细胞存活率和凋亡率无明显影响；500μmol／L和1000μmol／L的H2O2处理可导致ATⅡ型细胞的存活率明显降低，凋亡率显著升高（P均＜0．05），呈剂量依赖性。500μmol／LH2O2处理ATⅡ型细胞30min，细胞存活率和凋亡率均无显著变化；处理180min细胞存活率明显降低，凋亡率明显增高（P均＜0．05），呈时间依赖性。500μmol／LH2O2可刺激P—ERK1／2阳性表达，以刺激30min表达最强；使用ERK抑制剂（PD98059）干预后，ATⅡ型细胞凋亡率明显增高。结论 H2O2可以剂量和时间依赖的方式诱导ATⅡ型细胞凋亡，ERK信号转导途径参与了ATⅡ型细胞的凋亡调控，对氧化应激状态下的ATⅡ型细胞可能起到保护作用。
- 陈娟许峰蒋静方芳匡凤梧卢仲毅王兴勇
- 关键词：细胞凋亡细胞外信号调节激酶活性氧
- 氧化应激状态下肺泡Ⅱ型上皮细胞修复存活、凋亡及其调控机制
- 目的:探讨氧化应激状态下肺泡Ⅱ型上皮细胞(alveolgur type Ⅱ cell,ATⅡ)修复存活、凋亡及其调控机制。方法:采用胰酶消化、IgG黏附的方法分离纯化spraque-Dawley大鼠ATⅡ细胞进行原代培养...
- 蒋静许峰陈娟方芳匡凤梧卢仲毅王兴勇
- 文献传递
