袁小凤
- 作品数:71 被引量:538H指数:12
- 供职机构:浙江中医药大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金浙江省自然科学基金浙江省博士后科研项目择优资助项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 浙贝母内生真菌的分离筛选及抑菌活性菌株Aspergillus sp.BJ7性质的初步研究被引量:10
- 2012年
- 目的:分离筛选浙贝母内生真菌并对抑菌活性菌株性质进行初步研究。方法:通过组织分离印迹对照法从浙贝母植株中分离内生真菌。用牛津杯法进行抑菌活性筛选,对活性菌株进行发酵培养,绘制抑菌活性变化曲线、培养基消耗曲线和次生代谢产物浓度变化曲线,利用高效发酵体系对Aspergillussp.BJ7进行发酵,将发酵液进行分离浓缩,并利用石油醚、乙酸乙脂和正丁醇进行萃取。结果:分离得到36种,内生真菌,其中叶中14种,茎中9种,地下鳞茎中13种。发现地下鳞茎中分离的BJ7具有较高的抑菌活性。经鉴定,该活性菌株的外部形态和分子生物学特征与曲霉属有极高的相似性,初步确定为As-pergillussp.BJ7。发酵9天时BJ7的抑菌效果最好;发酵液分离浓缩后仅在正丁醇层出现抑菌效果,且当温度大于50℃时浓缩液失去抑菌活性,BJ7菌丝体提取液与碘化铋钾试剂反应结果呈阳性。结论:浙贝母分离得到了36种内生真菌,其抑菌活性菌株BJ7抑菌活性较高,其抑菌活性物质极性较大且热不稳定,具有产生生物碱的能力。
- 高俊杰袁小凤刘文洪马丽芳黄文龙李宗元徐旭婷
- 浙贝母土壤真菌DNA提取方法的优化被引量:5
- 2013年
- [目的]由于土壤理化性质的复杂性和真菌细胞壁结构的特殊性,从土壤样品中提取真菌基因组DNA往往比较困难,本实验通过方法优化以寻找适合浙贝母土壤真菌DNA的最佳方法。[方法]分别采用传统玻璃珠法,Ultra CleanTM土壤DNA提取试剂盒法及改进的试剂盒法等3种方法,提取宁波浙贝母种植区的根际土壤微生物总DNA,利用巢式PCR扩增真菌DNA片段。[结果]3种方法均可提取土壤微生物总DNA。其中改进的试剂盒法提取的DNA电泳结果条带最清晰,试剂盒法提取的DNA电泳结果次之,传统玻璃珠法提取的DNA电泳条带不清晰,且有拖尾。对上述三种方法所提取的DNA做巢式PCR分析真菌特异性,传统方法电泳无目的条带,试剂盒法只有第一次PCR电泳有目的条带,只有改进的UltracleanTM土壤DNA提取试剂盒法最终获得了350 bp左右的目的条带,而且利用变性凝胶梯度电泳技术(Denatured gradient gel elec-trophoresis,DGGE)成功地检测到不同种源以及根际与非根际土中微生物的差异。因此认为改进的试剂盒法为提取土壤真菌DNA的最优选择。[结论]在土壤真菌DNA提取中,合适的振荡方法是土壤真菌能否破壁的关键性因素。
- 袁小凤路京宋皓军刘文洪
- 关键词:浙贝母根际土壤DNA提取巢式PCR
- 蚕沙发酵有机肥对连作杭白菊根际细菌群落的影响被引量:8
- 2015年
- [目的]在杭白菊连作3年的土壤上采用小区实验方法施用蚕沙发酵有机肥,探讨施用蚕沙发酵有机肥对连作杭白菊根际土壤细菌群落的影响。[方法]田间实验设置3个处理组,依次为轮作组(杭白菊与玉米进行轮作),连作组(杭白菊连作3年),施肥组(在杭白菊连作田,第3年种植初期每株施用蚕沙发酵有机肥15 g)。在收获期进行采样,用HaeⅢ、HinfⅠ分别进行酶切后,采用末端限制性片段长度多样性(T-RFLP)检测。[结果]连作组、轮作组和施肥组的HaeⅢ酶切后Shannon指数分别为:3.08、3.24、3.24,HinfⅠ酶切后Shannon指数分别为3.31、3.60、3.57,可见连作组的细菌多样性明显低于轮作组和施肥组,说明连作使杭白菊根际细菌生物多样性下降,而轮作和施肥则可显著提高根际细菌多样性水平。对优势菌属进行比对分析发现,不同处理组间有较大的差异。连作组的9种优势菌属中梭酸属(Clostridium)、植原体属(Phytoplasma)、黄单胞菌属(Xanthomonas)为致病菌属;施肥组的8种优势菌属中梭酸属和黄单胞菌属为致病菌属,另6种为有益菌;轮作组的8种优势属中仅有梭酸属为致病属,其余7种均为有益菌。由此推测,施肥和轮作处理均会改变根际细菌群落结构,主要体现在减少致病菌的伤害。此外,在施肥组中还发现有被誉为生防菌的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。[结论]施用蚕沙发酵有机肥,能有效提高连作杭白菊的根际土壤细菌多样性水平,降低病原菌优势,促进功能菌和有益菌的生长,通过改善微生态环境缓解连作障碍。
- 彭三妹王博林徐建中丁志山袁小凤
- 关键词:杭白菊T-RFLP根际微生物连作
- 同步辐射X荧光分析海州香薷根中铜结合蛋白的微量元素被引量:7
- 2004年
- 利用 Sephadex G-50 凝胶过滤从 Cu 处理海州香薷根中分离得到两个不同的铜结合蛋白。用同步辐射 X荧光(SRXRF)分析了两个蛋白的微量元素,结果表明分子量较小的铜结合蛋白 2 与 Cu 络合能力要强于分子量较大的铜结合蛋白 1。另外,Pb、Fe 和 Zn 等金属元素可以与铜结合蛋白竞争结合。两个铜结合蛋白中 S 含量都很低,说明海州香薷根中铜结合蛋白可能并不以含硫量较高的金属硫蛋白(MTs)或植物络合肽(PCs)为主。实验证明 SRXRF 技术可以很好地用于凝胶过滤分离蛋白的元素分析。
- 施积炎陈英旭袁小凤武贝黄宇营何伟
- 关键词:海州香薷凝胶过滤
- 基于科技竞赛平台提升大学生创新能力被引量:6
- 2017年
- 科技竞赛平台为我省高等教育发展改革,特别是大学教育、技术创新和人才培养做出了重要贡献,竞赛对培养大学生的创新能力有很好的提升作用。
- 袁小凤窦晓兵黄燕芬黄在委李洪涛朱君华
- 关键词:大学生
- 《普通生物学》教学改革的探索和实践被引量:5
- 2009年
- 随着教学改革的进行,为了在短学时内有效地完成《普通生物学》课的教学任务,对教学内容进行了相应地缩减,并将教学内容制作成电子课件,充分利用多媒体进行教学,将"讲授法""讨论法""自学指导法""实验法""启发式教学""比较式教学"等教学方法进行优化组合,加强教学质量和效果,充分提高了学生的学习积极性.
- 袁小凤柴惠张林
- 关键词:普通生物学教学内容教学方法
- CAPOS综合征的听力学表型与初步干预讨论被引量:1
- 2023年
- 目的探讨小脑共济失调、腱反射消失、弓形足、视神经萎缩和感音神经性耳聋(CAPOS)综合征的听力学表型及干预方法。方法分析2例CAPOS综合征患儿的临床听力学资料,总结患儿听力学表型及干预效果。结果2例患儿均为高热后出现共济失调、视神经萎缩、感音神经性听力损失。基因检测结果显示均存在ATP1A3基因c.2452G>A位点突变,临床诊断为CAPOS综合征。听力学临床表型为226Hz声导抗双耳A型,听性脑干反应(ABR)最大刺激97dB nHL未引出,畸变产物耳声发射(DPOAE)通过,耳蜗微音电位(CM波)双耳可引出,符合听神经病谱系障碍(ANSD)的诊断。行为听阈和听性稳态反应(ASSR)呈相似上坡型曲线;助听听阈显著降低,且长期佩戴助听器后婴幼儿有意义听觉整合量表(ITMAIS)得分较助听前有显著提高。结论CAPOS综合征感音神经性听力损失属于迟发性ANSD,高烧是常见诱发因素之一,临床需预警高热、密切随访,高度关注高热后的听力变化。行为测听助听听阈提升的患儿可从助听器放大效应中获益,推测ASSR阈值与行为测听阈值存在相关性,对于无法得到可靠行为听阈的患儿,ASSR阈值可能可以作为重要的参考。
- 金冬冬晏小惠王晨露王永华史文迪袁小凤
- 关键词:感音神经性耳聋
- 补肾活血法防治大鼠膝骨性关节炎的实验研究被引量:40
- 2012年
- 目的:探讨补肾活血法、活血法、补肾法、祛风法对SD大鼠膝骨性关节炎血液流变学及滑液IL-1β、TNF-α的作用及其机制,明确筋痹到骨痹的演变及中药疗效的比较。方法:取体重为(200±15)g的3月龄雄性SD大鼠180只,采用木瓜蛋白酶大鼠膝关节腔注射的方法制作膝骨性关节炎动物模型,随机分为活血组、预防组、祛风组、补肾组、补肾活血组和模型组。于中药灌胃后30、60、90d分批处死动物后进行各种指标的检测,包括对大鼠的精神状态、活动度、皮毛、体重、关节肿胀情况,大体形象,血流变学,炎症指标和HE染色的病理切片。结果:大鼠造模成功后出现膝关节瘀血肿胀,爬行困难。中药治疗30,60,90d后对比,补肾活血汤组血液流变学各项指标较模型组差异有统计学意义;病理组织学表现软骨面较模型组光滑,完整,软骨细胞排列整齐;白细胞介素-1β(IL-1β)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量明显低于模型组。模型组早期IL-1β及TNF-α含量高于晚期。结论:膝骨性关节炎早期主要表现为滑膜炎症,早期炎症反应较晚期严重。补肾活血方能抑制大鼠膝关节软骨损伤,改善血液循环及抑制局部炎症反应。早期活血方、补肾活血方均有一定疗效,但晚期补肾活血方疗效较活血方,补肾方更显著。
- 季卫锋施伟峰陈林马镇川袁小凤许健厉驹童培建肖鲁伟
- 关键词:骨关节炎膝关节血液流变学
- 大连化工废弃地的植被组成及植物对重金属元素的积累影响被引量:3
- 2019年
- 通过大化集团废弃地重金属污染状况及其优势植物体内元素分布的研究,探索重金属污染对植物的影响,并筛选超富集植物。采集5块样地的植物与土壤,利用ICP-OES检测土壤与植物中元素的含量与分布。土壤pH在7.71~8.43之间,呈弱碱性,有机质含量3.91~9.07 g/kg之间,低于土壤肥力3级水平。5块样地的Zn、As、Cd均超标5倍以上,个别样地还有Pb超标;11种植物中Cu均超标;合成氨厂的何首乌和向日葵中As超标,可见土壤重金属污染对植物的元素分布产生影响。刺藜中Cr、Cu、As及Cd的转移系数均居11种植物之首,其次是龙葵和葎草;但所有植物的重金属富集系数均小于1。虽未筛选到超富集植物但也可以看出刺藜、龙葵和葎草的富集和转移重金属能力较强。大化集团废弃地的Cd-As-Zn的复合污染严重,对生长的植物造成了不同程度的重金属污染。为修复该地污染的土壤,建议引入Cd、Zn、As的超富集植物蜈蚣草和东南景天,并配合当地生长的耐性植物刺藜、龙葵、葎草,构建复合生态屏障。
- 宋腾蛟杨远强徐红梅倪方方袁小凤
- 关键词:重金属土壤重金属污染超富集植物ICP-OES
- 纳米银颗粒的毒性效应及作用机制研究进展被引量:4
- 2016年
- 纳米银(AgNP)是指粒子直径在1~100nm的金属银单质,现已广泛应用于多个领域.研究发现,AgNP的毒性特征与其粒径大小有一定的关系,粒径越小,毒性越强,一般来说20nm左右毒性最强.进入机体后在体内各器官均有分布,但浓度有明显差异,有的在肾脏中还表现出性别差异.AgNP进入生物机体各器官会产生一定的毒性效应.AgNP对体外细胞的毒性往往表现出剂量效应,而体内实验中,其毒性效应会随着作用对象及作用方式的不同而不同.此外,AgNP还会产生一定的生殖毒性,使亲代生殖特性降低,并可通过母体胎盘传递到子代体内,对子代的生长发育造成一定的影响.AgNP毒性作用机制主要通过产生自由基导致器官的氧化应激损伤;药酶代谢活力降低导致代谢障碍;亦有相关基因表达的缺陷,及某些分子如转录因子NF-E2相关因子2(Nrf2)所致的蛋白酶表达异常.总之,AgNP可对生物有机体产生毒性,我们在应用的同时要对其生物安全性进行评价,最大程度地减少甚至避免其对我们的损害.
- 倪方方王博林宋腾蛟袁小凤
- 关键词:纳米银颗粒粒度特性毒性效应氧化应激NRF2