袁建刚
- 作品数:124 被引量:301H指数:9
- 供职机构:中国医学科学院北京协和医学院基础医学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 重组人色素上皮衍生因子的原核表达及其对血管内皮细胞增殖的抑制
- 目的:疾病或意外创伤所造成的神经及神经元损伤很难得到彻底治疗与修复。这是由于在神经损伤中,神经胶质细胞释放的炎性介质及肉芽组织的嵌入影响神经和神经元的正确再生。色素上皮衍生因子(pigment epithelium-de...
- 文中伟阴彬朱圣韬彭小忠袁建刚强伯勤
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- 在人正常神经胶质细胞与神经胶质细胞瘤中具有表达差异的基因NSPL1
- 本发明涉及一个在人神经系统中高度表达的基因(NSPL1),包括互补脱氧核苷酸(cDNA)序列和编码蛋白质的氨基酸序列。该基因编码的蛋白质定位于细胞的内质网膜上,在正常神经细胞元中高度表达,在正常神经胶质细胞与神经胶质细胞...
- 袁建刚强伯勤彭小忠黄晓玮
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- 人的类硫氧化蛋白基因及其编码蛋白的三维空间结构和生理功能
- 本发明涉及一个与人胎脑发育相关的基因/蛋白,人的类硫氧化蛋白的基因/蛋白(humanthioredoxin likegene/protein,hTRXL),包括编码蛋白质的氨基酸序列和该蛋白的三维空间结构。该基因在不同发...
- 袁建刚饶子和强伯勤彭小忠金鑑
- 文献传递
- ENC1的克隆,原核表达与数种细胞系表达谱分析被引量:2
- 2002年
- 以人 3月胎脑总RNA为模板 ,用RT PCR的方法得到了ENC1(ectoderm neuralcortex 1)基因的cDNA ,经测序证实该cDNA的长度为 180 0bp ,包含ENC1的完整编码区 .将之克隆入pGEX 4T 1载体构建重组表达质粒 ,转化大肠杆菌BL2 1表达 ,经Sepharose 4B纯化得到目的蛋白 .通过Northern印迹和RT PCR检验了该基因在数种细胞系中的表达 ,结果表明其在神经胶质母细胞瘤细胞系U2 5 1中有较高的表达 ,而在包括神经母细胞瘤细胞系SH SY5Y的其他数种细胞系中无表达 .与在正常生理状态下神经系统中两种细胞的表达情况相反 .
- 丰竹张斌刘瑾彭小忠袁建刚
- 关键词:原核表达细胞系表达谱分析蛋白纯化神经细胞基因克隆
- 北京协和医院1990~2000年副肿瘤综合征住院病例总结被引量:42
- 2002年
- 目的 了解副肿瘤综合征 2 6例患者的临床基本特征。方法 回顾性分析 1990~ 2 0 0 0年北京协和医院副肿瘤综合征患者的临床资料并加以总结。结果 副肿瘤综合征平均发病年龄 4 8.6± 2 6岁 ,男性占 6 9.2 % ,女性占 30 .8%。 3.8%患者在发现肿瘤后才出现神经症状 ;96 .2 %在出现副肿瘤症状后才发现肿瘤。诊断出副肿瘤综合征时 ,2 6 .9%肿瘤已出现转移。从出现神经症状至发现肿瘤平均时间为 18± 6个月 ,患者多为慢性隐袭或亚急性起病 ,症状进行性加重 ,对治疗无明显缓解。结论 副肿瘤综合征出现明显的临床症状可发生在肿瘤发现之前、之后或与之同时发生 ,它们的出现几乎均预示预后不良。
- 陈健华刘秀琴郭玉璞周严袁建刚
- 关键词:副肿瘤综合征小细胞肺癌肺肿瘤
- SARS冠状病毒PUMC_2株全基因组cDNA分段克隆被引量:2
- 2003年
- 目的分段克隆SARS冠状病毒PUMC2株的全基因组cDNA。方法以SARS冠状病毒PUMC2株基因组RNA为模板,用RT-PCR扩增cDNA片段,PCR产物经纯化后,连接入pGEM-T载体中,进行序列测定。结果获得了SARS冠状病毒PUMC2株基因组全长cDNA的分段克隆。结论SARS冠状病毒PUMC2株基因组全长cDNA分段克隆的获得,为SARS冠状病毒基因功能的研究和全长有感染性cDNA的克隆奠定了基础。
- 樊峥谈昕煜阴彬邹柯王婷沈岩倪安平秦川袁建刚强伯勤彭小忠
- SARS冠状病毒PUMC_2株N蛋白cDNA的克隆、表达和纯化被引量:2
- 2003年
- 目的原核表达并纯化SARS冠状病毒N蛋白。方法用RT-PCR技术克隆SARS冠状病毒PUMC2株N蛋白全长cDNA,cDNA经序列分析鉴定后,克隆到pET32a表达载体,转化E.coliBL21进行原核表达并纯化出SARS冠状病毒N蛋白。结果实现了SARS冠状病毒N蛋白的表达及纯化。结论用基因重组方法表达的SARS冠状病毒N蛋白可为其进一步功能研究提供条件。
- 谈昕煜樊峥王华瑾石磊阴彬倪安平秦川邹柯沈岩袁建刚强伯勤彭小忠
- 关键词:SARS冠状病毒N蛋白
- 大鼠高重复顺序DNA的核苷酸顺序分析及其与灵长类类α-DNA顺序的比较被引量:1
- 1990年
- 啮齿目动物高重复顺序DNA的结构特征,虽已有人进行过分析,并提出大鼠DNA中有酶切位点分布独特的高重复顺序,也有人认为在Sprague-Dawlay大鼠中有类似于α-DNA大小的高重复顺序,并命名为α型(α-type),是否大鼠中也含有类α顺序,并没有人讨论过。我们对Wistar大鼠高重复顺序DNA进行了分离、纯化、分子克隆及核苷酸序列分析,测定了全序列为370bp,它也是具有酶切点分布独特的高重复顺序,但与前者存在着18%的差异性。我们对此顺序与灵长类类α-DNA进行了比较分析,发现二者在几方面都不存在相似之处,如此序列G-C含量占全部碱基组成的37.3%,而类α顺序的G-C含量约在40%以上,一些酶切位点也与类α-DNA完全不相同,另外在此序列的相应位置上也不具有灵长类类α-DNA的三个“冷点区”等等,由此得出大鼠这一高重复顺序并非类α顺序,而类α顺序只是灵长类动物所特有的。
- 林海玉蔡■琬黄秉仁袁建刚
- 关键词:DNA
- 神经胶质瘤中蛋白甲基化转移酶PM-SW生物功能学研究
- 目的:研究蛋白甲基化转移酶PM-SW在神经胶质瘤增殖、凋亡中的生物学功能,为今后的神经胶质瘤蛋白甲基化方面的分子机制研究及靶向治疗奠定基础。方法:1.通过Western blot及RealtimePCR技术比较正常脑组织...
- 王珊韩为谈小超袁建刚彭小忠强伯勤
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- 人肿瘤坏死因子样蛋白全长cDNA的克隆及原核表达
- 2002年
- 目的分离、克隆编码人肿瘤坏死因子样蛋白(TNFLP)的全长cDNA,并对其功能进行初步研究。方法从本室构建的λZAP表达胎脑文库中分离到编码TNFLP的全长cDNA。应用多种软件对该基因及其编码蛋白进行分析,寻找其同源蛋白,分析其亲、疏水性及其存在的结构域和基序。以Northern印迹分析检测TNFLP的mRNA的组织分布,并用谷胱苷肽-S-转移酶(GST)原核表达系统分段表达TNFLP的N端和C端蛋白。结果TNFLP全长共2112bp,编码一208个氨基酸的蛋白。亲、疏水性分析显示,TNFLP有两个疏水区,且C端95个氨基酸与小鼠的TNF-α一致性为42%。基序分析显示,TNFLP的C端有一内质网膜定位信号-TYKRL,与TNF-α完全一致。人的TNFLP位于人的16号染色体上。Northern杂交显示,TNFLP在心、脑和胰腺中呈高表达,可见一个转录本。用GST原核表达系统,分段表达了TNFLP的N端和C端。结论初步分析了TNFLP的组织表达谱,并分段表达了其N端和C端,为进一步研究其功能提供了条件。
- 胡晓燕周严代芸陈建萌张斌彭小忠袁建刚强伯勤
- 关键词:肿瘤坏死因子原核表达基因克隆