袁月 作品数:18 被引量:47 H指数:4 供职机构: 第三军医大学西南医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 军队“十一五”科技攻关课题 国家科技支撑计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 理学 交通运输工程 更多>>
TRADD基因过表达慢病毒在抑制皮肤疤痕形成中的应用 本发明公开了TRADD基因过表达慢病毒在抑制皮肤疤痕形成或治疗皮肤疤痕中的应用,并具体公开了TRADD基因过表达慢病毒的制备方法。本发明的TRADD基因过表达慢病毒能同时改善皮肤疤痕的平整度和色泽均匀度。 彭贵勇 袁月 康秀峰 刘云杰 代剑华文献传递 结直肠癌组织中核干因子和增殖细胞核抗原的表达与血清叶酸水平的关系 被引量:3 2011年 目的探讨核干因子(nucleostemin,NS)和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)在结直肠癌组织中的表达与血清叶酸水平的关系。方法 2009年3-12月在肠镜下收集50例结直肠癌患者的组织,根据国际结直肠癌的病理分类标准分为高分化组(12例)、中分化组(17例)、低分化组(21例)和正常肠黏膜组(50例),同时取受检者静脉血5 ml;采用免疫组织化学法检测NS和PCNA结直肠癌组织和正常肠黏膜的表达,采用磁性颗粒化学发光免疫法检测血清叶酸水平。结果 NS和PCNA在结直肠癌阳性表达率分别是70.0%(35/50)和72.0%(36/50),两者在正常肠黏膜中未见表达。NS和PCNA在高分化结直肠癌阳性率为41.7%(5/12)和33.3%(4/12),分别显著低于中分化结直肠癌阳性率[76.5%(13/17)和82.4%(14/17)]与低分化结直肠癌阳性率[81.0%(17/21)和85.7%(18/21),P<0.05]。患者血清叶酸水平在结直肠癌NS和PCNA阳性组与阴性组无显著差别(P>0.05)。结论 NS和PCNA在结直肠癌组织中有表达,且与结直肠癌的恶性程度密切相关,但血清叶酸水平与NS和PCNA在结直肠癌组织中的表达无关。 赵海霞 牟东 薛世祥 代剑华 袁月 彭贵勇 房殿春关键词:核干因子 增殖细胞核抗原 血清叶酸 结直肠癌 TRADD慢病毒载体构建及其对增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响 被引量:1 2012年 目的构建抗食管支架术后再狭窄携人TRADD基因慢病毒表达载体,并检测其对增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响。方法以购买的人TRADD基因为模板,采用PCR法扩增目的基因片段,PCR产物经回收纯化后与线性化的慢病毒表达载体pLVX-EGFP-3FLAG-Puro重组。重组质粒转化DH5α感受态细胞。菌落PCR鉴定转化子,阳性克隆测序无误后,质粒共转染293FT细胞制备慢病毒。Real-time定量PCR法检测病毒滴度。Western blot检测TRADD-GFP-FLAG融合蛋白的表达。MTT法检测TRADD基因慢病毒对增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响。结果菌落PCR扩增产物经凝胶电泳,阳性克隆得到1 200 bp片段,基因测序显示重组质粒中TRADD序列与GenBank中序列一致。包装产生的慢病毒转染293 FT细胞48 h后,荧光显微镜下可见大量绿色荧光,病毒滴度为3.22×108IU/ml,Western blot检测到融合蛋白TRADD-GFP-FLAG在293FT细胞中获得有效表达,MTT法证实该融合蛋白具有生物活性,能有效抑制瘢痕成纤维细胞增殖。结论成功构建并包装了pLVX-TRADD-EGFP-3FLAG-Puro慢病毒表达载体,其可明显抑制增生性瘢痕成纤维细胞的增殖。 袁月 康秀峰 牟东 薛世祥 代剑华 彭贵勇关键词:TRADD 慢病毒表达载体 基因治疗 经口内镜下肌切开术不同方式治疗贲门失弛缓症对比研究 被引量:4 2016年 目的比较经口内镜下环形肌切开术与全层肌切开术及切开长度≤5 cm与切开长度>5 cm治疗贲门失弛缓症的临床疗效。方法回顾性分析本院2013年2月至2014年8月诊断贲门失弛缓症并行经口内镜下肌切开术(peroral endoscopic myotomy,POEM)56例患者的临床资料。其中24例患者行环形肌切开为环形肌切开组,32例患者行全层切开为全层切开组;28例患者切开长度≤5 cm为短切组,28例患者切开长度>5 cm为长切组。分别比较4组治疗贲门失弛缓症临床症状缓解情况,术前、术后食管最大直径变化情况,术中、术后并发症发生情况。结果 4组术前一般资料,包括性别、年龄、体质量指数(BMI)、术前食管最大直径、术前Eckardt评分、病程等比较差异无统计学意义(P>0.05)。环形肌切开、全层切开、长切、短切4组术前Eckardt评分分别与术后1、6、12个月比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。全层切开组与环形肌切开组相比,术后Eckardt评分1个月[(0.50±1.07)vs(0.71±1.04)]、6个月[(0.53±1.10)vs(0.50±0.78)]、12个月[(0.37±0.75)vs(0.42±0.82)],术后6个月食管最大直径[(26.44±7.88)vs(24.00±5.82)mm]以及气体并发症[(5/24)vs(13/32)]差异均无统计学意义(P>0.05);短切组与长切组相比,术后Eckardt评分1个月[(0.46±0.83)vs(0.71±1.42)]、6个月[(0.39±0.68)vs(0.64±1.19)]、12个月[(0.32±0.72)vs(0.46±0.84)],术后6个月食管最大直径[(24.81±7.87)vs(25.98±6.37)mm]以及气体并发症[(9/28)vs(9/28)]差异均无统计学意义(P>0.05)。结论治疗贲门失弛缓症建议采用经口内镜下食管环行肌切开术,且以切开长度≤5 cm为宜。 蒲文凤 代剑华 袁月 陈瑶 吴宏博 彭贵勇关键词:贲门失弛缓症 经口内镜下肌切开术 并发症 谷氨酰胺联合维生素C对热应激致大鼠肠源性内毒素血症的预防作用 被引量:4 2011年 目的观察谷氨酰胺联合维生素C对肠源性内毒血症的预防作用,并初步探讨其机制。方法将160只SD雄性大鼠按随机数字表法分为谷氨酰胺联合维生素C组、谷氨酰胺组、维生素C组、高温应激组、正常对照组。用人工气候箱建立大鼠中暑内毒素血症模型,分别于1、3、7、15 d用2%的戊巴比妥钠腹腔麻醉取小肠组织并心脏采血。用试剂盒检测小肠组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及血清内毒素的含量,RT-PCR检测小肠黏膜Toll样受体2(TLR2)mRNA表达情况。结果在同时间段与正常对照组比,高温应激组SOD含量明显降低,MDA、血清内毒素、TLR2mRNA表达量明显升高(P<0.05),3种治疗组SOD、MDA含量无统计学差异(P>0.05),谷氨酰胺组、维生素C组血清内毒素及TLR2 mRNA表达量明显升高(P<0.05),但谷氨酰胺组联合维生素C组血清内毒素及TLR2 mRNA表达量无统计学差异(P>0.05)。在同时间段与高温应激组相比,3种治疗组SOD含量显著升高(除第7天谷氨酰胺组、维生素C组外);MDA、内毒素含量及TLR2 mRNA表达量明显降低(除第3天、第15天的维生素C组TLR2 mRNA表达量外)(P<0.05)。同时间段的谷氨酰胺联合维生素C组与谷氨酰胺组、维生素C组相比,其SOD含量相近,但MDA和血清内毒素含量及TLR2 mRNA表达量均显著降低(P<0.05)。结论谷氨酰胺联合维生素C可减轻高热应激对肠黏膜的损伤,保护肠黏膜屏障功能,有效的降低肠源性内毒素血症发生,可用于高热中暑的预防。 薛世祥 牟东 代剑华 王志中 赵海霞 袁月 彭贵勇关键词:谷氨酰胺 维生素C 内毒素血症 中暑 MDA 谷氨酰胺联合维生素C对军事训练中暑及内毒素血症的预防作用及机制研究 被引量:12 2010年 目的观察谷氨酰胺联合维生素C对中暑及肠源性内毒素血症的干预作用,初步探讨其作用机制。方法对48例在高热环境下进行军事训练的士兵按照区组随机化法分为预防组(24例)和对照组(24例),预防组士兵在常规口服补液的基础上加服谷氨酰胺联合维生素C预防中暑,对照组采用相同的常规补液加服安慰剂。比较2组中暑发生率,训练前后氧化应激指标、血浆内毒素、十二指肠粘膜超微结构及十二指肠粘膜热休克蛋白70(HSP70)表达变化。结果药物预防组和对照组中暑的发生率分别为8.3%(2/24)和33.3%(8/24),差异具有统计学意义(P<0.01);药物预防组较对照组血清超氧化物歧化酶(SOD)水平升高,血清丙二醛(MDA)及血清内毒素降低,差异均有统计学意义(P<0.01);透射电镜观察药物预防组十二指肠粘膜微绒毛、细胞器、内质网基本正常,对照组十二指肠粘膜多数微绒毛紊乱,细胞器、内质网均有肿胀,免疫组化结果表明药物预防组HSP70表达较对照组明显升高。结论谷氨酰胺联合维生素C可为小肠修复提供能量来源,提高热休克蛋白对小肠粘膜的保护作用,同时减轻氧化应激反应,从而保护小肠的屏障功能,降低肠源性内毒素血症发生。可用于中暑的预防性治疗。 牟东 薛世祥 代剑华 赵海霞 袁月 彭贵勇关键词:谷氨酰胺 维生素C 中暑 内毒素 热休克蛋白 莫沙必利对模拟急性高原暴露大鼠小肠动力的改善作用 被引量:1 2012年 目的观察莫沙必利对高原缺氧大鼠小肠动力及黏膜屏障的保护作用,初步探讨其对肠道急性缺氧损害的预防作用。方法将90只SD雄性大鼠按随机数字表法分为正常对照组、高原缺氧组、高原莫沙必利组;低压氧舱模拟海拔6 000 m,氧分压(9.31±0.05)kPa,氧含量(19.6±0.2)%,建立大鼠急性缺氧模型,高原莫沙必利组采用莫沙必利灌胃,3次/d,每天剂量0.27 mg/kg。分别于10、24、48、72、168 h取小肠组织。检测急性高原缺氧应激后小肠组织一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)的含量变化;墨汁灌胃实验计算推进距离,检测小肠动力;RT-PCR检测小肠黏膜闭锁连接蛋白1(ZO-1)mRNA的表达情况。结果与同时间段正常对照组比,高原缺氧组NO、NOS含量增高,24、48、72、168 h NO含量差异明显(P<0.05,P<0.01),48、72、168 h NOS含量差异明显(P<0.05,P<0.01);ZO-1 mRNA表达量降低,48、72、168 h差异明显(P<0.05,P<0.01);高原莫沙必利组NO、NOS含量较正常对照组增高,仅48 h NO含量增高明显(P<0.05);高原缺氧组与高原莫沙必利组(168 h除外)各时间点小肠推进距离均较正常对照组明显降低(P<0.05,P<0.01)。各时间点高原莫沙必利组NO、NOS含量较高原缺氧组降低,72 h NO,72、168 h NOS含量差异明显(P<0.05);各时间点高原莫沙必利组小肠推进距离及ZO-1 mRNA的表达量较高原缺氧组增高,48、72、168 h的小肠推进距离及72、168 hZO-1 mRNA的表达量差异明显(P<0.05)。结论莫沙必利可有效促进小肠动力,减轻高原缺氧应激引起的小肠动力障碍及肠道黏膜屏障的损伤,可用于高原缺氧肠道损害的预防。 薛世祥 彭贵勇 杨红勤 牟东 代剑华 袁月 康秀峰关键词:莫沙必利 缺氧 小肠动力 ZO-1 MRNA 经口内镜环形肌切开术与全层肌切开术治疗贲门失弛缓症临床疗效对比研究 目的 比较经口内镜下环形肌切开术与全层肌切开术及比较切开长度≤5cm与切开长度>5cm治疗贲门失弛缓症(AC)的临床疗效。方法 回顾性分析2013年02月至2014年08月在西南医院诊断AC并行经口内镜肌切开术(POEM... 蒲文凤 代剑华 袁月 陈瑶 吴宏博 彭贵勇关键词:贲门失弛缓症 经口内镜下肌切开术 氩离子凝固术治疗食管病变的安全性研究 被引量:4 2013年 目的研究氩离子凝固器不同输出参数对活体犬食管损伤的影响,探讨氩离子凝固术(argon plasma coagu-lation,APC)治疗食管疾病的安全范围。方法①采用氩离子凝固器,通过选择不同的输出功率(50、60、70、80 W)、氩气流量(1.6、2.0、2.4 L/min)及作用时间(2、4 s),对3只活体犬食管黏膜进行凝固,切片HE染色,光学显微镜下观察组织损伤深度。②固定氩气流量(2.0 L/min)与作用时间(3 s),选择不同输出功率(50、60、70、80、90、100 W),对2只活体犬食管黏膜切片进行HE染色,光学显微镜下观察组织损伤深度。③将8只活体犬分为2组,采用60 W(2 L、3 s)与70 W(2 L、3 s)输出参数对2组犬食管黏膜(距门齿40 cm处)进行环形烧灼,第2、4周时用胃镜与超声胃镜观察黏膜瘢痕增生及食管狭窄情况。结果①APC输出功率、氩气流量及持续作用时间与食管组织损伤深度之间均存在正相关关系,其中功率变化对损伤深度的影响最大;②氩气流量及作用时间固定的条件下,功率增加,食管组织损伤深度相应增加,在70~90 W内,功率变化而组织损伤变化不显著;③APC输出参数为60、70 W(2 L、3 s)作用于犬食管黏膜,第2、4周时观察,70 W(2 L、3 s)作用后均显示食管损伤部位瘢痕增生,管腔狭窄而60 W(2 L、3 s)作用后瘢痕增生,管腔狭窄均不明显。结论通过选择合适的APC输出参数,可控制食管损伤程度,当输出功率≤60 W时可有效预防APC术后食管狭窄等并发症的发生。 康秀峰 刘培君 袁月 王志中 代剑华 彭贵勇关键词:氩离子凝固术 食管损伤 并发症预防 拉曼光谱分析癌变胃黏膜组织中蛋白质改变的研究 被引量:2 2014年 目的研究正常和癌变胃黏膜组织中蛋白质的拉曼特征峰的差异及其意义。方法提取12例正常和癌变胃黏膜组织的蛋白质相关特征峰进行对比分析,结合统计学方法,观察癌变胃黏膜组织中蛋白质构型构象、氨基酸组成等改变。结果和正常胃黏膜组织比较,癌变胃黏膜组织中蛋白质相关拉曼特征峰758cm-1、879cm-1、938cm-1、1271cm-1、1660cm-1等发生了不同程度的移位,蛋白质的氨基酸组成及空间构象等出现了改变;结合蛋白质特征峰的相对峰强进行Fisher判别分析,建立判别函数获得了91.7%准确判别率。结论拉曼光谱是研究癌变胃黏膜组织中蛋白质分子的生化改变的新型有效手段,有助于胃癌的基础机制及临床诊疗研究。 陈瑶 代剑华 周学谦 刘云杰 袁月 彭贵勇关键词:拉曼光谱 胃肿瘤 蛋白质类