许颖
- 作品数：13 被引量：13H指数：2
- 供职机构：第三军医大学基础部更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金四川省教育厅科学研究项目四川省教育厅资助科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 疟原虫蛋白组学的研究进展被引量：2
- 2006年
- 蛋白组学研究是疟原虫研究中的重要组成部分。近年来,随着蛋白质组研究中新思路和新技术的不断涌现,研究方法的不断改进和完善,蛋白组学研究技术已被广泛应用于疟原虫研究。为进一步了解疟原虫生物学特性及其与宿主相互作用机制,该文就疟原虫蛋白组学研究常用技术及其应用作一综述。
- 许颖张锡林
- 关键词：疟疾蛋白组学
- 改进的一维二维电泳法分析疟原虫子孢子蛋白质的差异表达被引量：2
- 2005年
- 目的 建立及优化一维和二维凝胶电泳技术显示不同时期约氏疟原虫子孢子的蛋白差异表达的实验条件, 为进一步研究疟原虫具有感染性的唾液腺子孢子和不具感染性的卵囊成熟子孢子间的差异表达蛋白研究奠定基础。方 法 采用优化的蛋白质抽提试剂、方法分别获得疟原虫具有感染性的唾液腺子孢子和不具感染性的卵囊成熟子孢子蛋 白。采用一维和二维蛋白电泳技术对不同时期约氏疟原虫子孢子蛋白进行分析比较,建立约氏疟原虫子孢子蛋白质一 维、二维电泳图谱。结果 采用一维和二维蛋白电泳技术能够有效显示疟原虫具有感染性的唾液腺子孢子和不具感染性 的卵囊成熟子孢子蛋白,为以后进一步研究子孢子侵入相关蛋白,进行功能学的分析奠定基础。结论 所采用的一维和 二维蛋白电泳相结合的方法对分离斯氏按蚊中约氏疟原虫唾液腺子孢子和卵囊成熟子孢子蛋白质具有较好的重复性和 分辨率。
- 许颖张锡林段建华黄复生
- 关键词：疟原虫子孢子蛋白质电泳法约氏疟原虫斯氏按蚊蛋白电泳
- 约氏疟原虫子孢子侵入肝细胞相关基因及蛋白研究
- 蚊媒传播的疟疾是一种危害严重的热带传染病，在全世界人群中具有很高的发病率和致死率。近年来疟原虫多药抗性株的出现与迅速扩散，以及蚊媒对杀虫剂耐受性的增加，目前又无有效的抗疟疫苗，给疟疾防治工作带来很大的困难。传统方法已难于...
- 许颖
- 关键词：约氏疟原虫子孢子DD-PCRMALDI-TOF-MS肝细胞
- 文献传递
- 快速检测抗斯氏狸殖吸虫抗体的金标免疫渗滤法的建立和应用被引量：4
- 2004年
- 目的 :建立一种检测斯氏狸殖吸虫病患者血清抗体的快速、敏感和特异的新方法。方法 :以斯氏狸殖吸虫成虫可溶性抗原为上样抗原 ,胶体金标记羊抗人IgG为显色剂 ,建立检测斯氏狸殖吸虫病患者血清抗体的斑点金免疫渗滤法 (DIGFA) ;并以ELISA作平行对照。结果 :DIGFA和ELISA分别检测 83例斯氏狸殖吸虫病患者血清抗体 ,其阳性率分别为 95 .2 % (79/ 83)和 91 .6 % (76 / 83) ,两法差异无显著性 (P >0 .0 5 )。DIGFA分别检测正常人血清32例、华支睾吸虫病患者血清 2 3例和日本血吸虫病患者血清 36例 ,前者均为阴性 ,后两者的交叉反应率分别为 4 .3% (1 / 2 3)和 8.3% (3/ 36 ) ;DIGFA和ELISA两法的总符合率达 92 .3% (36 / 39)。结论 :DIGFA的特异性和敏感性与ELISA相近 ,但方法快速、试剂稳定 ,且不需特殊设备 。
- 陈文碧张锡林王光西许颖张跃辉毛樱逾湛蜀燕
- 关键词：斯氏狸殖吸虫病斑点金免疫渗滤法ELISA
- 原位杂交检测斯氏肺吸虫童虫半胱氨酸蛋白酶的基因表达部位
- 2005年
- 目的—从基因水平研究半胱氨酸蛋白酶基因在斯氏肺吸虫童虫的表达,并进行虫体定位。方法—利用地高辛标记原位杂交技术检测半胱氨酸蛋白酶基因在斯氏肺吸虫童虫的表达并定位。结果—在斯氏肺吸虫童虫的肠管上皮细胞中呈强阳性着色,在虫体皮层细胞中有弱阳性着色。结论—半胱氨酸蛋白酶主要在斯氏肺吸虫童虫的肠管上皮细胞中表达,在虫体皮层细胞中也有弱表达。
- 王晓丽张健许颖段建华王英
- 关键词：斯氏肺吸虫半胱氨酸蛋白酶原位杂交童虫寄生虫
- 感染约氏疟原虫前后大劣按蚊血淋巴的差异表达蛋白分析被引量：2
- 2005年
- 目的获得并分析感染约氏疟原虫前后大劣按蚊血淋巴的差异表达蛋白。方法利用二维电泳方法分别分离感染约氏疟原虫前后的大劣按蚊血淋巴蛋白,进行考马斯亮蓝染色,并利用PDQuest 2D E lite软件分析和比较凝胶结果;对感染约氏疟原虫前后的差异表达蛋白进行质谱分析,获得肽质量指纹图谱;利用M ascot软件系统,在Sw iss-Prot等数据库中检索和分析所获得的肽质量指纹图谱。预测差异表达蛋白的生物学特性和在卵囊黑化中的功能。结果获得了分辨率和重复性均较好的二维电泳图,感染组凝胶可见120个蛋白点,正常组凝胶可见95个蛋白点,二者比较分析后发现有37个差异蛋白点;质谱分析获得3个肽质量指纹图谱,于蛋白数据库检索后未发现匹配分值很高的相关蛋白,其中差异蛋白点1与冈比亚按蚊一蛋白具有较高的同源性。结论获得了感染约氏疟原虫前后大劣按蚊血淋巴的差异蛋白和部分差异蛋白的相关信息,这为从蛋白水平认识蚊媒和疟原虫的相互关系和更深入地利用大劣按蚊-约氏疟原虫模型开展卵囊黑化的相关研究奠定了基础。
- 王英张锡林段建华许颖张艳玲张健黄复生
- 关键词：二维电泳差异表达蛋白约氏疟原虫大劣按蚊
- 约氏疟原虫子孢子侵入肝细胞相关基因及蛋白研究
- 本文以斯氏按蚊-约氏疟原虫为模型，从基因和蛋白两方面对子孢子侵入肝细胞相关分子进行研究：一方面应用DD-PCR技术筛选约氏疟原虫唾液腺和卵囊子孢子差异cDNA，检测与子孢子侵入肝细胞相关的基因;另一方面采用二维凝胶电泳（...
- 张锡林许颖段建华
- 关键词：约氏疟原虫肝细胞差异蛋白
- 文献传递
- 约氏疟原虫子孢子侵入肝细胞相关基因及蛋白研究
- 疟疾是一种严重危害人类健康的传染性疾病。近年来,疟原虫多药抗性株的出现与迅速扩散,以及蚊媒对杀虫剂耐受性的增加,加之又无有效的抗疟疫苗,给疟疾防治工作带来很大的困难。已经完成的恶性疟原虫、其媒介冈比亚按蚊和约氏疟原虫全基...
- 张锡林许颖段建华
- 文献传递
- 约氏疟原虫感染后大劣按蚊血淋巴的初步分析
- 2006年
- 王英张锡林段建华许颖张健黄复生
- 关键词：大劣按蚊血淋巴SDS-PAGE电泳
- 斯氏狸殖吸虫成虫可溶性抗原蛋白质分析
- 2005年
- 目的分析和检测斯氏狸殖吸虫成虫可溶性抗原的特异抗原组分,为建立特异、敏感的免疫学诊断方法、研制抗斯氏狸殖吸虫药物和疫苗提供理论基础. 方法用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、双向电泳(Two-dimensional gel electrophoresis,2-DE) 和免疫印迹(Western blot)等方法,对斯氏狸殖吸虫成虫可溶性抗原进行分析. 结果 SDS-PAGE分离出22条蛋白带, 其中主带8条,分子质量单位为13～64 ku,未见65 ku以上条带.Western blot显示20条显色带, 主带6条,分子质量单位分别为 13、18、22、28、35 和 64 ku.2-DE电泳分离出斯氏狸殖吸虫成虫可溶性抗原48个多肽斑点, 分子质量单位为14～70 ku,绝大部分分布于pI 3.10～7.14,少数分布于pI 8.78～9.85,在 pI 7.14～8.78之间几乎未见多肽斑点.Western blot分析出其中的10个主要多肽斑点能被斯氏狸殖吸虫病患者血清识别,大部分为集中在酸性区域的小分子多肽. 结论斯氏狸殖吸虫成虫可溶性抗原经SDS-PAGE电泳分离出的22条蛋白带中,有6条蛋白含量较高,能被斯氏狸殖吸虫病患者血清识别.2-DE电泳分离出的48个多肽斑点中,有10个含量较高,能被斯氏狸殖吸虫病患者血清识别,大部分为偏酸性的小分子多肽.
- 陈文碧张锡林王光西许颖张跃辉佘俊萍杨兴友
- 关键词：斯氏狸殖吸虫抗原双向电泳
