赵运英
- 作品数：26 被引量：122H指数：4
- 供职机构：江南大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金天津市自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学化学工程轻工技术与工程文化科学更多>>
- 拆分获得(S)-酮基布洛芬脂肪酶基因在枯草芽孢杆菌中的克隆与表达被引量：2
- 2010年
- 【目的】筛选具有不对称拆分消旋酮基布洛芬氯乙酯能力的脂肪酶基因,构建其表达分泌型工程菌,并进一步提高该脂肪酶的立体选择性。【方法】以自筛选出的一株具有不对称拆分消旋酮基布洛芬氯乙酯能力的菌株NK13为材料,通过构建其基因组文库,筛选具有不对称拆分消旋酮基布洛芬氯乙酯能力的脂肪酶基因。通过构建该脂肪酶基因的分泌型诱导表达载体pHY300-plk-sacR-gene,将其转入枯草芽孢杆菌WB600,获得基因重组菌WB600(pHY300-plk-sacR-gene)。用SDS-PAGE检测其表达和转化情况,采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法纯化脂肪酶;并利用TLC和HPLC检测该酶的立体选择专一性。【结果】得到了具有专一性拆分获得(S)-酮基布洛芬能力、长度为633bp的脂肪酶基因(GenBank登录号为:EU381317)。该脂肪酶在枯草芽孢杆菌WB600中得到了分泌表达。TLC和HPLC检测结果显示,纯化的脂肪酶对底物转化40h时转化率为30%,生成(S)-酮基布洛芬的e.e.%值最高,达60.02%,与未加Tween-80的枯草芽孢杆菌转化子体系相同。而在含Tween-80的环境下,枯草芽孢杆菌表达重组菌对底物转化36h时转化率约为45%,生成(S)-酮基布洛芬的e.e.%值最高,达93.64%,是野生菌NK13的16倍。【结论】从NK13号菌株中筛选得到的新的脂肪酶具有很高的不对称拆分获得(S)-酮基布洛芬的能力,实现了NK13菌中633bp脂肪酶基因在枯草芽孢杆菌中的分泌表达,研究证明Tween-80能提高该脂肪酶的拆分专一性。
- 赵运英刘瑞恩许丽娟史斐斐赵玉红王善韦张金红
- 关键词：脂肪酶手性拆分
- 酿酒酵母中钙信号途径对crz1调控基因表达的影响
- 2018年
- 该文通过对酿酒酵母细胞中120个钙离子敏感性基因的启动子进行序列分析发现,24个基因的启动子上含有转录因子Crz1的结合位点(GNG GC[T/G]CA或GNG GCT G)。该研究检测了钙信号途径对24个基因表达和细胞定位的影响。实验结果表明,钙信号途径通过转录因子Crz1诱导19个基因的特异性表达及其编码蛋白的细胞定位。结果发现,5个基因的功能与代谢相关(TPS1、PHO86、ERG3、ARG82和AKR1)、5个基因的功能与离子稳态相关(CSG2、PMC1、VMA10、MNR2和VAM2)、4个基因的功能与蛋白质分选相关(PEP3、VPS36、VPS27和VPS4)以及5个基因的功能与转录相关(DEP1、IMP2′、THP1、SGF29和ROX3)。该文的研究结果为研究酿酒酵母细胞中钙离子稳态调控机制提供了理论基础。
- 卢艺婷王婧雅赵运英邓禹
- 关键词：酿酒酵母基因表达细胞定位
- 生物发酵产丁二胺的定量测定被引量：1
- 2020年
- 丹磺酰氯作为衍生化试剂被用于微生物发酵产丁二胺的定量测定,然而实验发现,发酵液中的复杂成分会对检测产生严重干扰,导致结果显著偏差。通过解析发酵液成分对丁二胺检测的影响规律,更加准确地实现了微生物发酵产丁二胺的测定。在丹磺酰氯柱前衍生基础上,利用校准曲线进行校准以消除误差,成功地建立了一种定量检测发酵液中丁二胺含量的方法,其检测误差<7. 96%,可消除常规检测过程中的干扰。检测方法的改进,解决了丁二胺生物合成过程中的产物难以准确定量的问题,为生产菌株的性能测定及丁二胺的生物合成奠定了基础。
- 黄荻萱李国辉毛银毛银周胜虎赵运英
- 关键词：发酵培养基校准曲线高效液相色谱法
- 基于抗原蛋白评价的豆粕菌酶协同发酵研究被引量：3
- 2023年
- β-伴大豆球蛋白是豆粕饲料引起严重过敏反应的主要抗原蛋白,需要有效的发酵来降低或消除其抗原性,然而如何控制发酵终点和评价抗原蛋白含量成为了难题。该文利用纳米金适配体生物传感器,通过测定β-伴大豆球蛋白降解率确定发酵终点,并获得了最优的菌酶协同发酵工艺。最终得到的豆粕产品β-伴大豆球蛋白降解率达到75.27%,氨基酸和有机酸含量显著增加,营养价值和适口性明显提升。该研究利用纳米金适配体传感器解决了豆粕发酵过程中抗原蛋白含量评价和发酵终点控制的难题,为其在发酵豆粕的工业生产应用提供了参考与借鉴。
- 荀冉卢艳波杨小雁马忠玛李国辉赵运英赵运英
- 关键词：发酵豆粕枯草芽胞杆菌
- 酿酒酵母细胞中钙离子信号传导途径的研究进展被引量：9
- 2013年
- 酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)细胞可以通过Ca2+/钙调磷酸酶信号途径来应对许多外界环境胁迫。在交配信息素、盐或者其他环境压力存在的条件下,钙离子会通过细胞质膜上的未鉴定的钙转运蛋白X和M或者由Cch1和Mid1组成的钙通道进入细胞质。胞质内钙离子浓度的增加会激活细胞质里的钙调磷酸酶(calcineurin),钙调磷酸酶的一个非常重要的作用是去磷酸化细胞质内的转录因子Crz1,造成它快速地从细胞质转移到细胞核,从而诱导包括液泡膜上钙泵蛋白基因PMC1以及内质网膜和高尔基体膜上钙泵蛋白基因PMR1在内的目标基因的表达。这两个钙泵蛋白和液泡膜上的Ca2+/H+交换蛋白Vcx1一起作用,将细胞质内的钙离子浓度控制在50～200 nmol/L的正常生理浓度内,使细胞能够正常生长。该综述主要论述了酿酒酵母细胞内Ca2+/钙调磷酸酶信号途径的最新研究进展。
- 赵运英蒋伶活
- 关键词：钙调磷酸酶酿酒酵母
- 植物乳杆菌DY6主要抑菌代谢物的分析和鉴定被引量：27
- 2019年
- 【背景】被广泛应用于食品和饲料等多个行业的乳酸菌已成为制作生物防腐剂的研究热点。【目的】探究抑菌性能良好的植物乳杆菌DY6的抑菌物质,为其进一步应用提供参考依据。【方法】对植物乳杆菌发酵液中抑菌物质的理化特性进行研究,采用GC-MS分析发酵上清液代谢物,通过多元统计学分析方法推测主要抑菌物质,抑菌物质通过半制备进行初步分离后用GC-MS鉴定。【结果】植物乳杆菌DY6对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌都有较强的抑制作用。采用不同发酵时间的发酵液作为研究对象,测定发酵上清液的抑菌能力,发酵0-4 h上清液无抑菌能力,发酵至8 h抑菌能力逐步上升,发酵24-48 h发酵上清液抑菌能力趋于稳定,在48 h时抑菌能力最佳,抑菌直径为15.28mm。通过多元统计学分析乳酸菌发酵液差异标志物,发现主要差异物为有机酸(如乳酸、乙酸、丙酸等)和脂肪酸(如辛酸、癸酸等)。经过半制备液相分离发酵上清液得到的抑菌组分,主要有有机酸(如乳酸、乙酸、3-苯基乳酸、苯丙酸等)和脂肪酸(如癸酸、辛酸、壬酸等),另外还有少量的醛类和醇类物质。【结论】确定了植物乳杆菌DY6的抑菌物质主要为有机酸和脂肪酸,为其进一步防腐应用提供了理论基础。
- 陆春波毛银毛银赵运英邓禹
- 关键词：植物乳杆菌抑菌性能GC-MS有机酸脂肪酸
- 酿酒酵母异源合成己二酸被引量：4
- 2020年
- 以酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)为底盘生物,将来源于嗜热菌Thermobifida fusca B6中的己二酸逆降解途径基因搭配不同的酿酒酵母组成型启动子和终止子,构建在3个穿梭质粒上,并导入宿主细胞,成功实现了己二酸的异源合成。将AA-1菌株在YPD培养基中发酵,得到3.39 mg/L己二酸,是同一宿主中已报道的最高值。同时,敲除了酿酒酵母TCA循环关键基因LSC1,但未能使己二酸产量提高。通过发酵实验,研究了生物量、副产物乙醇与己二酸产量的联系;并通过改变初始碳源浓度对乙醇和己二酸产量进行了研究,为进一步提高己二酸产率、降低酿酒酵母葡萄糖效应提供了参考依据。
- 张熙李国辉周胜虎周胜虎赵运英毛银
- 关键词：己二酸酿酒酵母穿梭质粒生物量
- 酿酒酵母中与ScRch1定位相关的膜蛋白和脂质体蛋白的筛选被引量：3
- 2013年
- 酿酒酵母YMR034c基因与我们之前发现和鉴定的白念珠菌的CaRCH1基因同源,因此把它命名为ScRCH1,它编码的蛋白ScRch1在胞外高钙离子条件下定位于细胞质膜。为了研究酿酒酵母细胞对ScRch1质膜定位的调控机理,在编码细胞质膜和液泡膜等膜蛋白以及与脂质颗粒相关蛋白的402个基因的缺失株中,我们通过荧光显微镜技术检测了融合蛋白ScRch1-GFP的细胞膜定位情况。结果发现,ScRch1在其中10个基因的缺失株细胞里不能定位于质膜。这些基因包括两个编码细胞质膜运输蛋白的基因SNQ2和HXT1,一个编码液泡膜运输蛋白的基因AVT4,一个与液泡连接/融合相关的液泡膜蛋白基因PEP3,一个与细胞分化有关的内体膜蛋白基因DFG10,两个编码脂质体蛋白的基因EHT1和LDH1,以及三个功能未知的内体膜蛋白基因YBR219c、YBR224w和YDR417c。因此,ScRch1的细胞膜定位可能受到以上多个细胞过程的影响,这些研究结果为进一步阐明ScRch1的细胞质膜定位机制奠定了基础。
- 赵刚曹春蕾赵运英蒋伶活
- 关键词：钙离子基因筛选膜蛋白
- 以学-研-产模式培养生物工程专业应用型创新人才的研究被引量：1
- 2017年
- 文章以生物工程专业为试点,论述了学研产培养模式的含义和重要性,探讨了学研产一体化模式各环节的改革措施,总结了实行学研产模式培养生物工程专业应用型创新人才取得的成效,并提出了进一步培养人才的研究思路和方向。
- 赵运英毛银闫沐黄狄萱邓禹
- 关键词：学研产生物工程
- 酵母质膜蛋白ScRchl调控胞质内钙离子稳态但其表达受到钙/钙调磷酸酯酶信号途径的调控
- 证明酵母细胞中与脊椎动物细胞溶质转运蛋白相关的基因ScRCHl是白念珠菌基因CaRCHl的同功基因.ScRCHl缺失导致缺乏内质网钙泵蛋白酵母细胞对该的耐受性及其胞内钙/钙调磷酸酯酶信号途径的激活.应对外界高钙离子浓度胁...
- 赵运英赵刚杜敬彩柳宁宁闫洪波蒋伶活
- 关键词：磷酸酯酶
- 文献传递
