郑爱华
- 作品数：6 被引量：9H指数：1
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- 转染maspin cDNA在胃癌细胞中的表达及其对uPA和uPAR表达的影响
- 2008年
- 目的研究转染maspin cDNA在胃癌细胞中的表达及其对uPA和uPAR表达的影响,探讨maspin基因抑制胃癌浸润转移的机制。方法构建maspin/PCR2.1表达载体,转染胃癌细胞株MKN28和SGC7901,用RT-PCR和Westernblot检测maspin基因,uPA和uPAR表达的变化。结果经酶切证实,得到正向插入的真核表达质粒maspin/PCR2.1。成功转染到MKN28和SGC7901细胞中并表达,uPA和uPAR的mRNA和蛋白表达均降低。结论成功构建了maspin/PCR2.1表达载体,maspin基因可在靶细胞表达,并能抑制uPA和uPAR的表达。
- 周文文易永芬郑爱华
- 关键词：MASPIN尿激酶型纤溶酶原激活物胃癌
- MASPIN真核表达载体的构建及对胃癌细胞SGC7901的诱导凋亡作用被引量：8
- 2008年
- 背景与目的:MASPIN基因与多种恶性肿瘤的发生密切相关,在细胞的生长、浸润、转移和凋亡中起着十分重要的作用。本研究通过构建MASPIN基因真核表达载体,分析MASPIN过表达对胃腺癌细胞株SGC7901凋亡的影响。方法:构建MASPIN/PCR2.1表达载体,转染胃癌细胞株SGC7901。RT-PCR和Western bolt检测MASPIN基因、Bax/Bcl-2基因表达变化;琼脂糖凝胶电泳检测凋亡特征性DNA梯形带;采用AnnexinV-FIFC/PI检测凋亡率。结果:酶切证实成功构建真核表达质粒MASPIN/PCR2.1;转染重组质粒组MASPIN mRNA(33.6±1.2)和蛋白水平(23.4±1.6)的表达明显高于未处理组(13.7±2.0、12.0±1.3)和空质粒组(15.0±1.5、12.3±1.5,P<0.05);凝胶电泳观察到特征性DNA梯带;各组细胞均有凋亡率的增加且呈时间依赖性:转染重组质粒∕TRAIL作用组最高,12、24、48h分别达到8.0%、16.3%、25.8%,转染重组质粒组为3.0%、8.2%、14.4%,TRAIL作用组为4.1%、9.8%、15.9%(P<0.05);48h转染重组质粒∕TRAIL组BaxmRNA和蛋白表达(55.3±2.1、75.4±1.3)高于转染重组质粒组(34.3±1.2、40.7±1.8,P<0.05)和TRAIL作用组(43.2±1.8、36.2±1.3,P<0.05);48h转染重组质粒∕TRAIL组、转染重组质粒组、TRAIL作用组Bcl-2mRNA表达为28.3±2.5、34.3±1.2、32.8±2.1(P<0.05),蛋白表达为17.4±1.5、45.1±2.1、42.8±1.5(P<0.05)。结论:上调MASIPIN基因的表达能显著增加胃癌细胞对凋亡刺激的敏感性。其机制可能通过上调Bax,下调Bcl-2基因的表达诱导胃癌细胞凋亡。
- 郑爱华易永芬周文文
- 关键词：MASPINTRAILBAX/BCL-2凋亡
- MASPIN真核表达载体的构建及对胃癌细胞SGC7901凋亡与增殖的影响
- 目的:
1.构建MASPIN基因真核表达载体,转染至胃癌细胞株SGC7901,检测其对SGC7901细胞MASPIN表达的影响。
2.检测转染MASPIN对胃癌细胞SGC7901细胞增殖、细胞周期和凋...
- 郑爱华
- 关键词：MASPINTRAIL
- 文献传递
- MASPIN真核表达载体的构建及其对胃癌细胞株SGC7901增殖的影响被引量：1
- 2009年
- 目的构建MASPIN真核表达载体,分析MASPIN过表达对胃腺癌细胞株SGC7901的影响。方法PCR扩增MASPIN基因全长,用载体PCR2.1构建重组质粒,转染至胃癌细胞株SGC7901。RT-PCR、Western blot检测MASPIN基因表达变化,MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞仪(FCM)分析细胞周期,观察过表达MASPIN对SGC7901细胞株的影响。结果成功构建MASPIN/PCR2.1表达载体并转染至胃癌细胞株SGC7901,转染上调了SGC7901细胞株MASPIN在mRNA、蛋白水平的表达。转染MASPIN的SGC7901细胞增殖率随时间而减慢,第24、48、72小时的细胞增殖率分别为93.07%、81.97%、66.5%,明显低于转染空载体组(95.98%、95.79%、95.59%,P<0.05)。与转染空载体组相比,过表达MASPIN的SGC7901细胞株在G0/G1期所占比例明显提高(70.3%vs55.6%),S期细胞减少(19.8%vs34.9%,P<0.05)。结论成功构建MASPIN/PCR2.1表达载体,过表达MASPIN可抑制SGC7901细胞株的增殖。
- 郑爱华易永芬周文文
- 关键词：胃肿瘤SGC7901细胞MASPIN增殖
- Exenatide通过p38MAPKγ途径调节2型糖尿病大鼠心肌缺血再灌注能量代谢模式
- 第一部分：Exenatide对正常SD大鼠心肌缺血/再灌注心功能及底物选择的影响 目的：探讨胰高血糖素样肽-1(Glucagon-like peptide-1, GLP-1)类似物艾塞那肽(Exenatide,Ex)对...
- 郑爱华
- 关键词：2型糖尿病能量代谢心肌缺血再灌注损伤
- 反义MUC2对胃癌细胞粘附活性影响的体外实验研究
- 目的探讨应用反义脱氧寡核苷酸 （ASODN）体外抑制粘蛋白MUC2对人胃癌细胞株SGC7901粘附活性影响。方法应用人工合成的MUC2 ASODN经阳离子脂质体包裹后转染入胃癌细胞株SGC7901,采用RT-PCR、免疫...
- 易永芬张晓艳何婷婷周文文郑爱华
- 关键词：MUC2反义寡核苷酸粘附
- 文献传递
