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陈兰明
作品数:
2
被引量:4
H指数:1
供职机构:
复旦大学生命科学学院遗传学研究所
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
生物学
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合作作者
毛裕民
复旦大学生命科学学院遗传学研究...
盛祖嘉
复旦大学生命科学学院遗传学研究...
钱吉
复旦大学生命科学学院遗传学研究...
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2002
1篇
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嗜热脂肪芽孢杆菌质粒DNA的高压电穿孔转化研究
被引量:4
2000年
采用高压电穿孔法将穿梭质粒导入了嗜热脂肪芽胞杆菌(Bacillus stearothermophilus)K1041和T521菌株。以对数生长后期的菌体制备K1041转化细胞,以LB平板上于50℃培养的过夜菌制备T521转化细胞,细胞密度为5~7×109细胞/mL。电击条件如下:电容25μF,电场强度10.0KV/cm,脉冲控制器设定200。 K1041和 T521最高转化效率分别达2.01×10和1.19 ×10转化子/μg DNA。此外,研究发现T521和K1041中存在着DNA的限制/修饰系统。
陈兰明
盛祖嘉
毛裕民
关键词:
质粒
电击转化
嗜热脂肪芽孢杆菌pgiB基因上游452bp序列的功能分析
2002年
用化学诱变剂N 甲基 N′ 硝基N 亚硝基胍进行随机诱变 ,获得了穿梭启动子探测质粒pPGV5的温度抗性突变型pPGV5 (tr6 5 ) ,序列分析发现质粒上卡那霉素核苷转移酶基因kan的 +2 3 8位碱基发生了G→T的单点突变。以来自嗜热脂肪芽孢杆菌FDTP 3菌株的耐热邻苯二酚 2 ,3双加氧酶基因pheB作为报道基因 ,构建了转录融合质粒pPGVPB45 2 ,用高压电穿孔法将其转化嗜热脂肪芽孢杆菌 ,通过报道蛋白活性的分析 ,证明了嗜热脂肪芽孢杆菌T5 2 1菌株的 6 磷酸葡萄糖异构酶同工酶基因pgiB上游含启动子样序列的 42
陈兰明
钱吉
盛祖嘉
毛裕民
关键词:
嗜热脂肪芽孢杆菌
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