陈德忠
- 作品数：6 被引量：6H指数：1
- 供职机构：广州医学院第二附属医院神经科学研究所更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 大鼠GAD65重组腺病毒载体的构建和鉴定被引量：1
- 2007年
- 目的构建大鼠GAD65重组腺病毒载体。方法将目的基因大鼠GAD65 cDNA亚克隆到穿梭质粒pShutile启动子CMV的下游,再通过I-CeuⅠ和PI-SceⅠ两个稀有酶切位点,将目的基因GAD65与腺病毒质粒DNA(pAdeno-X)进行体外连接,获得含目的基因GAD65重组腺病毒质粒DNA,后者经限制性内切酶PaeⅠ切割后,两端露出反向末端重复序列(rTR),利用脂质体转染293细胞,获得含目的基因重组腺病毒上清。PCR双引物检测含有目的基因GAD65的片段。结果在挑选的5个空斑中,有4个含GAD65 cDNA阳性重组腺病毒。GAD65重组腺病毒可感染293细胞并在293细胞内进行有效的复制。PCR双引物检测证明含有目的基因GAD65片段,表明利用体外连接法成功构建了含目的基因GAD65重组腺病毒转移载体。结论成功构建了GAD65重组腺病毒,为进一步研究GAD65重组腺病毒的功能提供了条件。
- 陈盛强刘启才陈德忠林勇平孙卫文廖卫平
- 关键词：腺病毒DNA重组谷氨酸脱羧酶65
- 携带大鼠GAD65基因的腺病毒载体的构建
- 2003年
- 陈盛强邓维意陈德忠孙卫文柳息洪郑德枢廖卫平
- 关键词：腺病毒载体基因转染细胞
- 大鼠脑组织中GAD65基因的克隆
- 2003年
- 陈盛强邓维意陈德忠孙卫文柳息洪郑德枢廖卫平
- 关键词：脑组织克隆
- 大鼠脑组织中谷氨酸脱羧酶65基因的克隆和序列测定被引量：1
- 2004年
- 目的探讨克隆大鼠脑组织中谷氨酸脱羧酶65基因。方法采用RT-PCR方法,将大鼠脑组织中的mRNA逆转录成cDNA,再以cDNA为模板,扩增谷氨酸脱羧酶65基因片段,克隆入T载体,并经序列测定。结果RT-PCR法扩增出一特异产物与预期长度1758bp相符,T载体克隆测序与大鼠谷氨酸脱羧酶65100%同源。结论采用RT-PCR和T载体技术获得了大鼠脑组织中的谷氨酸脱羧酶GAD65基因克隆,为该基因的体外表达打下基础。
- 邢州陈德忠陈盛强
- 关键词：谷氨酸脱羧酶脑组织克隆测序T载体体外表达
- 大鼠大脑组织中谷氨酸脱羧酶GAD67基因的克隆和序列测定
- 2004年
- 目的 克隆大鼠脑组织中谷氨酸脱羧酶GAD6 7基因 .方法 采用RT -PCR方法 ,大鼠脑组织中的mRNA逆转录成cDNA ,再以cDNA为模板 ,扩增谷氨酸脱羧酶GAD6 7基因片段 ,克隆入T载体 ,并经序列测定 .结果 RT -PCR法扩增出一特异产物与预期长度 1795bp相符 ,T载体克隆测序与大鼠谷氨酸脱羧酶GAD6 710 0 %同源 .结论 采用RT -PCR和T载体技术获得了大鼠脑组织中的谷氨酸脱羧酶GAD6 7基因克隆 ,为该基因的体外表达打下基础 .
- 邓志刚陈盛强陈德忠
- 关键词：CDNA克隆逆转录聚合酶链式反应
- 马桑内酯致慢性癫痫鼠海马谷氨酸脱羧酶阳性神经元的变化被引量：4
- 2004年
- 目的 :观察马桑内酯慢性癫痫模型中谷氨酸脱羧酶 (glutamicaciddecarboxylase ,GAD)阳性神经元的变化与癫痫的关系。方法 :用马桑内酯 (coriarialactone ,CL)亚致惊剂量肌注的方法建立慢性癫痫模型 ,对照组以生理盐水注射。用振动切片机连续冠状切片 ,选取含海马结构中部的相邻切片 ,行GAD65/GAD67免疫组织化学染色。结果 :1.马桑内酯致痫组大鼠均被点燃 ,且随着注射次数的增加 ,发作的潜伏期逐渐缩短 (从 5 0min减少到 10min左右 ) ,发作时间逐渐延长 (从数分钟到数十分钟 ) ,对照组均无发作。 2 .海马各区和齿状回GAD65/GAD67阳性神经元数在马桑内酯致痫组明显低于正常组 ,免疫反应减弱。结论 :马桑内酯致痫鼠中GAD65/GAD67神经元数目的减少 ,免疫反应减弱 ,与癫痫关系密切。
- 陈德忠廖卫平陈盛强
- 关键词：马桑内酯癫痫海马
