高大庆
- 作品数：45 被引量：79H指数：7
- 供职机构：东南大学医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金国家大学生创新性实验计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学文化科学更多>>
- 肺癌p53基因突变检测及临床意义被引量：2
- 2000年
- 目的:检测p53基因突变在肺癌组织中的表达,探讨其与临床分期与预后的关系。方法:采用银染聚合酶链反应-单链构象多态性分析法(PCR-SSCP),检测了48例肺癌组织中p53基因突变的表达。结果:在48例肺癌组织中,p53基因突变的检出率为47.9%(23/48),p53基因突变的表达与临床分期和淋巴转移有关。结论:p53基因突变在肺癌中发生率较高,检测p53基因突变对判定肺癌的临床分期与病人的预后有一定的帮助。
- 王剑高大庆傅翠梅黄锡金孙惠华成静
- 关键词：肺癌P53基因突变PCR-SSCP预后
- 转录因子Eha直接调控迟缓爱德华菌的靶基因
- 2019年
- 目的 Eha是一种重要转录调控因子,它可以影响迟缓爱德华氏菌(Et)的胞内存活,本实验探究Eha直接调控的靶基因如何抵御巨噬细胞杀灭细菌的分子机制。方法构建pGEX-4T-ehaflag重组质粒,电击导入eha基因缺失株的ET-13菌,得到Cehaflag ET13重组菌;用Western blot检测重组菌Eha-Flag融合蛋白的表达,并用细菌胞内存活实验检测细菌EhaFlag融合蛋白的活性;我们釆用染色质免疫共沉淀(CHIP)技术,用抗Flag标签抗体对靶基因沉淀Eha-DNA片段,除去结合的蛋白并纯化DNA片段;以RNA-Sequencing的差异表达基因设计引物,以CHIP得到的DNA样品为模板,进行qRT-PCR; PCR扩增靶基因的启动子区域,构建了pBAD-P_靶lac Z重组质粒,电击分别导入ET-13野生株和eha基因缺失株,比较它们β-半乳糖苷酶活性的差异;SDS-PAGE电泳比较野生株和缺失株外膜蛋白、厌氧C4二羧酸转运蛋白DcuA1和鞭毛钩蛋白FlgK表达的差异,并用细菌胞内存活实验比较野生株和缺失株的差异。结果 Western blot表明,Cehaflag ET13重组菌能够表达Eha-Flag融合蛋白;细菌胞内存活实验表明,该融合蛋白完全可以恢复缺失株在胞内降低的生存能力,Flag融合标签不影响Eha蛋白的功能;通过qPCR鉴定CHIP,富集到Eha的结合靶点,最终筛选出10个Eha直接结合的基因;通过野生株和缺失株中β-半乳糖苷酶活性的差异,证明eha基因对5个靶基因启动子有直接调控作用;通过检测野生株和缺失株表型的差异,证明eha基因对靶蛋白DcuA1,TnaA和FlgK的表达和活性有调控作用。结论 Eha可以通过直接调控这些靶基因,使Et菌在巨噬细胞内的存活受到影响。
- 田畅刘念郑恩金高大庆陆承平
- 关键词：迟缓爱德华氏菌转录调控因子CHIP
- 病原生物学与免疫学系研究生培养平台建设与实践
- 2012年
- 按国家研究生教育教学和培养要求,根据我系教学科研和人才培养实际,研制符合本学系实情的研究生培养方案,以探讨寻东南大学医学院免疫学与病原生物学专业研究生培养有效途径。
- 窦骏沈传来高大庆
- 关键词：免疫学病原生物学
- 毒力相关蛋白EseC影响迟缓爱德华菌胞内生存的初步探索
- 迟缓爱德华菌(Edwardsiella tarda,简称Et),为革兰氏阴性短杆菌,是一种重要的人兽共患病原菌。已有研究表明Ⅲ型分泌系统是Et的一个重要毒力因子,EseB、EseC和EseD已被证实是三型分泌系统的重要转...
- 赵凯英高大庆
- 三型分泌系统蛋白EseC影响迟缓爱德华菌胞内生存的初步探索
- 赵凯英高大庆
- eha基因调控迟缓爱德华菌抵抗巨噬细胞氧化杀菌作用被引量：2
- 2015年
- 目的迟缓爱德华菌(E.tarda)能够在巨噬细胞内生存和繁殖,必须抵抗细胞产生活性氧的杀菌作用。eha基因是该菌一个重要的转录调控基因,本研究探讨eha基因调控E.tarda抵抗巨噬细胞氧化杀菌的机制。方法光镜观察野生株和缺失株分别感染RAW264.7巨噬细胞的过程,及菌落计数法测定细菌胞内存活数目;测定细菌在不同H2O2浓度中的存活率;流式法检测细菌感染巨噬细胞后产生活性氧的细胞比率;qRT-PCR测定细菌超氧化物歧化酶基因sodC和过氧化氢酶基因katB的转录水平。结果 eha基因的缺失,使E.tarda在巨噬细胞内的繁殖速率明显下降(P<0.05),使该菌在不同H2O2浓度中的存活率显著降低(P<0.05),使该菌感染细胞组产生活性氧的细胞比率升高;qRT-PCR结果显示,eha基因的缺失使得该菌的超氧化物歧化酶基因sodC和过氧化氢酶基因katB转录水平下降。结论 eha基因通过调控E.tarda菌分解H2O2相关基因的表达,从而影响该菌分解巨噬细胞中活性氧的能力和在胞内外的存活率。因此,eha基因调控了E.tarda菌抵抗巨噬细胞内氧化杀菌作用,有助于该菌在巨噬细胞内生存和繁殖。
- 徐泽炎李玉红成静郑恩金高大庆盛安康陆承平
- 关键词：巨噬细胞活性氧
- 迟缓爱德华菌eha基因对大肠埃希氏菌溶血基因clyA的调控
- 迟缓爱德华菌(Edwardsiella tarda,简称Et),属于肠杆菌科,爱德华菌属,其致病范围广泛,是冷血动物出血性败血症的主要病因,也是爱德华菌属中唯一对人类致病的病菌。 Et菌的致病因子主要包括溶血素、血凝素、...
- 成静高大庆
- 文献传递
- 试用层次分析法确定疑难病症的治疗方案被引量：1
- 1999年
- 医生在为疑难病症制定治疗方案时，涉及到患者病情、经济状况、治疗条件和费用等方面的因素，通常是以经验或主观判断为主，而数学在医学中的应用还不多为避免医生或患者的主观选择影响治疗，本文应用数学方法，将可以采用的治疗方案、医患者客观存在的条件及最后拟采用的治疗方案建立成层次结构模型，阐述了将层次结构模型构造成对比较阵、确定一致性检验指标、计算组合权向量及检验组合一致性的方法当因素和层次较多，计算工作量较大，特别是通不过一致性检验时，需重新调整、重建成对比较阵，进行反复计算，因此采用计算机编程对模型进行电算是必要的最后。
- 高大庆卢泽民吴守一张定一
- 关键词：层次分析疑难病
- 迟缓爱德华氏菌新的溶血活化基因功能的研究被引量：5
- 2001年
- 目的 探讨新的迟缓爱德华氏菌溶血活化基因 (eha)的功能。方法 PCR扩增部分溶血活化基因 ,制成地高辛探针和 2 6株Et菌进行斑点杂交和Southernblot。结果 新的迟缓爱德华氏菌 (Et)溶血活化基因以单拷贝形式存在于一部分Et菌染色体上 ,且pED10 2菌的Vero细胞毒和溶血活性作用主要位于胞浆蛋白和胞隙蛋白中。将有溶血活化基因的 pED10 2重组质粒电击入不溶血的Et菌和大肠杆菌 (LE3 92、JM 10 9) ,Et菌仍无溶血现象 ,大肠杆菌有溶血现象。结论 eha基因不是溶血素结构基因 。
- 高大庆黄锡全阚飙陆承平刘延清吴守一
- 关键词：迟缓爱德华菌杂交
- 肠膜明串珠菌对常见致病菌的拮抗试验被引量：8
- 1999年
- 黄锡全孙惠华成静高大庆傅翠梅闻平殷立风彭张
- 关键词：肠膜明串珠菌致病菌拮抗试验
