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黄健

作品数:1 被引量:0H指数:0
供职机构:昆明医学院第二附属医院更多>>
发文基金:“重大新药创制”科技重大专项更多>>
相关领域:生物学更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇生物学

主题

  • 1篇原核
  • 1篇原核表达
  • 1篇原核表达及纯...
  • 1篇原核细胞
  • 1篇细胞
  • 1篇基因
  • 1篇基因合成
  • 1篇核表达
  • 1篇恒河猴
  • 1篇白细胞
  • 1篇白细胞介素
  • 1篇白细胞介素-...
  • 1篇纯化

机构

  • 1篇昆明医学院第...

作者

  • 1篇黄健

传媒

  • 1篇中国生物制品...

年份

  • 1篇2011
1 条 记 录,以下是 1-1
排序方式:
恒河猴白细胞介素-4基因的合成、原核表达及纯化
2011年
目的人工合成恒河猴白细胞介素-4(Macaca mulatta Interleukin-4,Mamu IL-4)基因,并在大肠杆菌中高效表达及纯化。方法根据大肠杆菌遗传密码偏爱性优化设计并人工合成Mamu IL-4(mIL-4)基因,克隆入pET43.1a(+)表达载体,构建重组表达质粒pET43.1a-mIL-4,转化大肠杆菌BL21-CodonPlus(DE3)-RIPL,经IPTG诱导表达。通过阳离子交换层析及稀释复性等步骤对表达的重组mIL-4蛋白进行纯化,纯化产物经Western blot进行鉴定。结果双酶切及测序证实重组表达质粒pET43.1a-mIL-4构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为15 000,表达量约占菌体总蛋白的40%,主要以包涵体形式存在,经纯化复性后纯度可达95%以上;Western blot检测其能与鼠抗mIL-4单克隆抗体特异性结合。结论 在大肠杆菌中高效表达了重组mIL-4蛋白,纯化的蛋白纯度较高,为其生物学活性及佐剂的相关研究奠定了基础。
陈丹刘娟黄健刘新颖王冉史洪娜王维龙沈林李鼎锋
关键词:恒河猴白细胞介素-4基因合成原核细胞纯化
共1页<1>
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