龚强
- 作品数：4 被引量：11H指数：1
- 供职机构：中南大学湘雅医学院生物科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 基因诱捕技术及基因诱捕数据库被引量：1
- 2007年
- 基因诱捕(gene trap)是基于小鼠胚胎干细胞、报道载体(诱捕载体)建立的一种基因突变方法。诱捕载体在整合位点利用内源基因调控元件模仿内源基因表达,使其表达终止,从而可以阐明内源基因的功能。由于诱捕载体及其报道基因的特点,基因诱捕技术可用于高通量生产,便于小鼠基因功能的大规模研究,为各类疾病动物模型的建立奠定良好基础。
- 龚强胡维新
- 关键词：基因诱捕基因突变ES细胞
- 日本血吸虫基因表达谱研究进展
- 2008年
- 龚强秦志强胡维新
- 关键词：日本血吸虫毛蚴染色体组基因表达谱特异性基因裂体吸虫病
- 东方田鼠HSP90α和KPNA2基因表达及体内抗日本血吸虫效果比较观察
- 2019年
- 目的比较东方田鼠抗日本血吸虫基因HSP90α和KPNA2的表达差异及体内抗虫效果差异。方法RT-PCR扩增并比较健康东方田鼠新分离的心、肝、脾、肺、肾、脑、肌肉、皮肤、骨髓组织中HSP90α和KPNA2的表达情况。40只雄性昆明小鼠随机分为空白对照组(DMEM培养基)、阴性对照组(pLXSN质粒转染病毒)、pLXSN-HSP90α组和pLXSN-KPNA2组等4组,每组10只,各组分别于第1、3、7 d每鼠尾静脉注射重组质粒转染病毒(2×10^6 cfu/ml)或培养基0.2 ml。注射后第2天,各组小鼠腹部皮肤感染日本血吸虫尾蚴(30±2)尾/鼠。感染后第42天,剖杀小鼠,门脉灌注检获成虫,测量死亡后合抱及单性虫体长度,计算虫荷、减虫率、每克肝虫卵数(LEPG)、肝脏减卵率,HE染色观察肝脏病理变化,观察比较HSP90α和KPNA2对日本血吸虫感染小鼠的保护效果。结果RT-PCR结果显示,HSP90α在东方田鼠脑、骨髓中高表达,而KPNA2在心、肾和肌肉中高表达。体内实验结果显示,pLXSN-HSP90α组和pLXSN-KPNA2组小鼠的肝脏颜色分别呈灰黄色和灰黑色,虫荷分别为(11.3±1.1)、(11.6±1.3)条,血吸虫成虫体长分别为(1.19±0.04)、(1.21±0.05)cm,LEPG分别为1852.0±392.4、1035±485.4,与阴性对照组[(16.7±1.3)条、(1.39±0.06)cm、3644.0±523.6]比较差异均有统计学意义(P<0.05)。两个实验组的虫荷、成虫体长差异无统计学意义(P>0.05),而LEPG指标差异有统计学意义(P<0.05)。两组减虫率分别为40.8%和39.4%(P>0.05),肝减卵率分别为57.9%和76.5%(P<0.05),与阴性对照组(12.6%、17.3%)比较差异有统计学意义(P<0.01)。肝组织切片HE染色镜下观察显示,pLXSN-HSP90α组和pLXSN-KPNA2组小鼠的肝脏虫卵结节数量均远少于阴性对照。结论东方田鼠抗日本血吸虫基因HSP90α和KPNA2在脑、骨髓、心脏、肾脏和肌肉组织中表达存在差异;两者对日本血吸虫感染小鼠保护效果在减卵率和LEPG存在差异。
- 成钢王芊薄龚强熊德慧
- 关键词：东方田鼠HSP90Α日本血吸虫基因表达
- 东方田鼠骨髓基因池的构建及抗日本血吸虫抗性相关基因的筛选被引量：10
- 2004年
- 利用表达克隆法,从东方田鼠骨髓细胞中克隆出抗日本血吸虫抗性相关基因.首先提取高质量的mRNA,逆转录成cDNA,将cDNA与哺乳动物细胞瞬时表达载体pcDNA1.1/Amp连接,建立表达cDNA文库;将cDNA文库分成A-H8个基因池,转染HEK293细胞,48h后收集培养上清,获得条件培养基.将条件培养基与日本血吸虫童虫一起培养,观察杀虫效应,取对童虫抑制作用最强的基因池E再分成8个亚基因池E1-8,分别转染HEK293细胞,并将条件培养基与血吸虫童虫一起培养,获得具有明显抑制血吸虫童虫活性的亚基因池E77,按上述方法反复进行筛选,直到获得有抑制作用的单个克隆,该技术的建立为克隆东方田鼠抗日本血吸虫抗性相关基因以及研究其作用机制奠定基础.
- 秦志强胡维新邬国军许冰申群喜龚强吴驰
- 关键词：东方田鼠日本血吸虫抗性相关基因
