单敬轩
- 作品数:6 被引量:1H指数:1
- 供职机构:复旦大学生命科学学院遗传学研究所更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 脆壁克鲁维酵母KfADE5,7基因的克隆及其结构与功能的研究
- ADE5,7基因是腺嘌呤从头合成途径中一个重要的基因,在酵母中它编码催化第2步和第5步反应的两个酶.该文首次通过补偿乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis)KlADE5.7基因突变,从脆壁克鲁维酵母(K...
- 单敬轩
- 关键词:基因中断
- 文献传递
- RIOK3促进了caspase-10对PAK2的酶解激活被引量:1
- 2012年
- RIO3为非典型激酶RIO家族的成员之一,仅在多细胞真核生物中出现,为研究RIOK3蛋白的功能,以其作为诱饵蛋白对成人肝cDNA文库进行酵母双杂交筛选,得到其相互作用蛋白PAK2,并通过细胞内免疫共沉淀和免疫荧光共定位实验验证了该相互作用。实时定量PCR和免疫印迹检测结果显示,RIOK3能够在蛋白水平上降低PAK2表达量。通过CCK-8和细胞凋亡检测,发现二者共表达可以抑制增殖并促进凋亡,并且这一促凋亡效应可以被caspase-10的无酶活最短剪切本caspase-10G所抑制。实验结果显示,RIOK3可能促进了caspase-10对PAK2的酶解,在PAK2的酶解激活途径中发挥重要作用。
- 林颖李璞单敬轩陈晓静施慧莉霍克克
- 关键词:酵母双杂交细胞凋亡
- 人类激酶RIOK3的功能研究
- 蛋白激酶是负责催化磷酸基团向丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸的转移,在细胞内信号传导过程中发挥重要作用,在对体内各种生理活动调控中扮演重要角色。RIOK3含有一个RIO结构域,是人类RIO蛋白激酶家族成员,但是其结构与其他RIO家...
- 单敬轩
- 文献传递
- CRK是PTPN4新的相互作用蛋白
- 2008年
- 以PTPN4为“诱饵”,利用酵母双杂交系统筛选人肝cDNA文库,获得了一个与PTPN4相互作用的蛋白:CRKⅠ.从cDNA文库中通过PCR得到CRK家族的3个成员的基因,把这3个基因与PTPN4共转酵母,发现CRKⅠ、CRKⅡ和CRKL均能与PTPN4发生很强的相互作用.通过截断体证实它们之间的相互作用是通过CRKs的SH3结构域与PTPN4的462-468位的脯氨酸富集区介导的.免疫共沉淀以及免疫荧光共定位实验进一步证实了CRKI与PTPN4的相互作用.通过酪氨酸磷酸化特异性抗体检测发现PTPN4可以明显降低CRKI的磷酸化水平.
- 周娟万兵兵单敬轩吴冬华施慧莉霍克克
- 关键词:CRK酵母双杂交免疫荧光定位酪氨酸磷酸化
- 脆壁克鲁维酵母KfADE5,7基因的克隆及其5’非编码区结构与功能研究
- 2003年
- 通过补偿乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis)KlADE5,7基因突变,从脆壁克鲁维酵母(Kluyveromyces fragilis)基因组文库中克隆了KfADE5,7基因。该基因全长4975bp,编码793个氨基酸,氨基酸序列与已知的酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)ScADE5,7基因编码区有68.3%的同源度。利用KfADE5,7-lacZ融合基因,对5’非编码区进行缺失分析,发现了具有完整启动子功能的区域,在启动子上游还发现了两个增强转录和两个减弱转录的区域。
- 单敬轩霍克克李育阳
- 关键词:乳酸克鲁维酵母腺嘌呤核苷酿酒酵母转录
- 人类HDAC4和MIF4GD蛋白相互作用的初步研究
- 2008年
- 以HDAC4为"诱饵",利用酵母双杂交系统筛选人肝cDNA文库得到"猎物"蛋白,通过GST Pull-down,Co-IP,荧光共定位等技术验证HDAC4和"猎物"的特异性结合,并通过成人多组织cDNA Panel确定"猎物"的组织表达谱.通过体内、外蛋白结合实验证实了HDAC4与MIF4GD(MIF4G domain containing)蛋白特异性互作,且两者亚细胞共定位于细胞质内,并确定了MIF4GD在胎盘、肝脏和胰腺中有特异性表达.本实验发现并验证了HDAC4与MIF4GD的特异性互作,并确定了MIF4GD的特异性表达谱,为深入研究两种蛋白的功能及其所参与的生理过程提供了新的线索.
- 吴冬华周娟单敬轩施慧莉霍克克
- 关键词:酵母双杂交蛋白质相互作用