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家蚕hsp70启动子的克隆及功能研究被引量：6: 2011年; 该研究通过PCR的方法克隆得到家蚕热激蛋白70基因(Bombyx mori hsp70)的5'侧翼的两个长度分别为538 bp和305 bp的序列hsp70-538和hsp70-305。生物信息分析结果表明这两段序列在TATA序列的上游存在保守的热激元件HSE(heat shock element)CTnGAAnnTTCnAG。采用双荧光报告基因技术研究表明这两段序列在BmN细胞中都表现出热激活性,转基因家蚕实验证明hsp70-305在家蚕个体中也具有热激活性,可以认为这两个片段具有hsp70热激启动子特性。; 庄兰芳危浩林健荣钟伯雄; 关键词：热激家蚕

家蚕中部丝腺细胞合成分泌溶菌酶的方法: 本发明公开了一种家蚕中部丝腺细胞合成分泌溶菌酶的方法。是先构建家蚕合成分泌溶菌酶的载体pBSer1hLYZ-A3EGFP质粒，再利用显微注射转基因家蚕技术将这种质粒与能够提供转座酶的辅助质粒一起导入到家蚕受精卵内，依靠p...; 钟伯雄危浩庄兰芳; 文献传递

piggyBac转座子介导的转基因叉尾斗鱼的构建被引量：2: 2012年; 为探讨piggyBac转座子在鱼类动物中应用的可能性,以包含家蚕(Bombyx mori)肌动蛋白3启动子驱动的增强型绿色荧光蛋白(enhance green fluorescent protein,EGFP)基因的piggyBac质粒为载体,以及一个包含piggyBac转座酶的辅助质粒,采用显微注射的方法将其导入叉尾斗鱼(Macropodusopercularis)受精卵中,利用PCR技术证实了piggyBac转座子能够介导EGFP基因进入叉尾斗鱼基因组,并能够稳定遗传到下一代,符合孟德尔遗传规律。EGFP基因遗传到G1代的阳性鱼占交配鱼比率,即外源基因整合率为12.30%。实验证明,piggyBac质粒有可能成为水产动物转基因实验的新型载体。; 高强杨国梁钟伯雄王军毅陈雪峰危浩庄兰芳叶少群杨浩; 关键词：叉尾斗鱼 PIGGYBAC转座子转基因鱼显微注射

piggyBac转座子介导的转基因家蚕丝腺生物反应器研究进展被引量：5: 2011年; 综述了基于piggyBac转座子的转基因家蚕丝腺生物反应器表达外源蛋白的3个关键环节:(1)外源目的基因高效插入家蚕基因组;(2)转基因家蚕的高效、快捷的检测;(3)具有生物活性的外源目的蛋白的高效表达和纯化。同时介绍了有关转基因家蚕丝腺生物反应器表达外源蛋白的研究进展,为更好地利用转基因家蚕丝腺生物反应器表达外源蛋白提供了参考。; 钟伯雄危浩庄兰芳; 关键词：家蚕 PIGGYBAC 转基因

家蚕丝腺细胞合成分泌狂犬病病毒糖蛋白的方法: 本发明公开了一种家蚕丝腺细胞合成分泌狂犬病病毒糖蛋白的方法。是先构建家蚕合成分泌狂犬病病毒糖蛋白RVGP的载体pBSer1RVGP-A3EGFP质粒和pBFibLRVGP-A3EGFP质粒，再利用显微注射转基因家蚕技术将...; 钟伯雄周继勇庄兰芳阮系真危浩颜焰

家蚕丝腺生物反应器表达狂犬病病毒核蛋白被引量：3: 2013年; 【目的】采用家蚕丝腺生物反应器这一蛋白高效表达系统,尝试建立一种高效、低廉、稳定生产狂犬病病毒核蛋白(RVNP)的技术体系,为生产基因工程疫苗奠定基础。【方法】通过RT-PCR方法克隆获得RVNP序列,采用家蚕丝胶蛋白基因(Ser1)启动子为特异性启动子,将RVNP构建到含有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)筛选标记基因的piggyBac转座子表达载体(pBA3EGFP)中,并采用显微注射转基因家蚕技术构建家蚕丝腺生物反应器。【结果】G1代通过EGFP标记的筛选获得转基因家蚕阳性蛾区26个,蛾圈阳性率为59.09%。PCR实验证实RVNP已经整合到家蚕基因组中,Western blot分析表明RVNP蛋白可能附着于丝胶蛋白并随家蚕吐丝行为分泌到蚕茧中。【结论】获得了能够表达外源的RVNP蛋白的转基因家蚕品系,该系统有望成为高效、低廉、稳定地生产狂犬病基因工程疫苗的技术体系之一。; 尤征英危浩阮系真叶露鹏王少华周继勇钟伯雄; 关键词：狂犬病 PIGGYBAC 家蚕

基于piggyBac转座子的转基因家蚕丝腺生物反应器表达外源蛋白的研究: 家蚕是既是理想模式生物，又是重要的经济昆虫。应用转基因家蚕丝腺生物反应器表达外源蛋白有着广阔的前景。　　本文选择了狂犬病病毒核蛋白(RVNP)、狂犬病病毒糖蛋白(RVGP)和人溶菌酶蛋白(hLYZ)作为外源基因，再连...; 危浩; 关键词：转基因家蚕 PIGGYBAC转座子狂犬病病毒糖蛋白

家蚕丝腺细胞合成分泌狂犬病病毒糖蛋白的方法: 本发明公开了一种家蚕丝腺细胞合成分泌狂犬病病毒糖蛋白的方法。是先构建家蚕合成分泌狂犬病病毒糖蛋白RVGP的载体pBSer1RVGP-A3EGFP质粒和pBFibLRVGP-A3EGFP质粒，再利用显微注射转基因家蚕技术将...; 钟伯雄周继勇庄兰芳阮系真危浩颜焰; 文献传递

家蚕中部丝腺细胞合成分泌溶菌酶的方法: 本发明公开了一种家蚕中部丝腺细胞合成分泌溶菌酶的方法。是先构建家蚕合成分泌溶菌酶的载体pBSer1hLYZ-A3EGFP质粒，再利用显微注射转基因家蚕技术将这种质粒与能够提供转座酶的辅助质粒一起导入到家蚕受精卵内，依靠p...; 钟伯雄危浩庄兰芳

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危浩