叶美琴
- 作品数：11 被引量：67H指数：6
- 供职机构：丽水市农业局更多>>
- 发文基金：浙江省科技厅资助项目国家高技术研究发展计划浙江省科技厅项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学经济管理更多>>
- 甜百合栽培技术
- 2001年
- 叶美琴周晓音詹武郑朝中
- 关键词：生物学特性栽培技术采收蔬菜
- 建立综合管理体系 促进蔬菜可持续发展
- 针对针对影响我国蔬菜生产可持续发展的主要问题——蔬菜产品质量安全问题、农药残留和蔬菜产地环境恶化问题等未来蔬菜生产如何进入可持续发展的良性循环,提出建立和健全蔬菜生产环境与资源保护管理体系的设想。
- 叶美琴
- 关键词：蔬菜可持续发展
- 文献传递
- 侵染浙江丽水亚洲百合的Potyvirus病毒分子鉴定被引量：1
- 2005年
- 从浙江丽水的亚洲百合病叶中得到两病毒分离物G和X,电镜观察病组织汁液中含有大量线状病毒粒子,病叶细胞质中存在着柱状内含体.按照Potyvirus成员和百合斑驳病毒(Lilymottlevirus,LMoV)的已知基因序列设计特异性引物,经RT-PCR扩增分别得到1692nt和1469nt两个片段,包含NIb、CP和3'-URT,3'-端含poly(A).将CP基因序列与侵染百合和郁金香的10个Potyvirus分离物进行同源性比较,结果表明G、X与LMoV的同源性分别为85.9%～99.4%、86.1%～99.2%(核苷酸)和87.0%～96.7%、89.9%～97.8%(氨基酸),两分离物均为LMoV.系统进化树分析显示G和X分别处在LMoV的两个群体中,同源性较低,不表现地域相关性及寄主相关性.
- 刘文洪洪健陈集双叶美琴黄东峰
- 关键词：亚洲百合百合斑驳病毒分子鉴定
- 百合黄瓜花叶病毒及其检测被引量：10
- 2006年
- 应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测了浙江丽水和杭州的东方百合、亚洲百合等栽培品种上黄瓜花叶病毒(CMV),64个田间样品中有26个带毒,检出率为40.6%;dsRNA检测结果与已知CMV-FQS株系的电泳条带相同,但百合组织中CMVdsRNA含量较低;电镜观察,受CMV侵染的样品中大多含有线状病毒,复合侵染率为35.9%;寄主反应测定显示从百合植株上获得的CMV株系均不能通过汁液摩擦接种侵染昆诺藜、苋色藜、普通烟、心叶烟等6科10种指示植物。
- 刘文洪洪健陈集双叶美琴黄东峰
- 关键词：植物病理学黄瓜花叶病毒百合ELISA
- 单抗免疫斑点法和组织印迹法检测百合无症病毒被引量：13
- 2006年
- 应用抗百合无症病毒(Lilysymptomlessvirus,LSV)的单克隆抗体,建立了快速检测田间样品的免疫斑点法(Dot-ELISA)和组织印迹法(Tissueblot-ELISA)体系。LSV单抗稀释2,000倍时,Dot-ELISA中病叶粗汁液可被检出的最大稀释度为1∶640。Tissueblot-ELISA中样品一次平切后第1次印迹与Dot-ELISA样品1∶40稀释的结果相当,前4次印迹均可获得满意的显色效果。常规Tissueblot-ELISA的灵敏度低于Dot-ELISA,但用丙酮处理点过样的硝酸纤维素膜后,二者的灵敏度相当,且Tissueblot-ELISA操作更简便,适合田间大量样品的快速检测。
- 李燕宏吴建祥洪健周雪平叶美琴
- 关键词：百合无症病毒单克隆抗体免疫斑点法
- 抗百合无症病毒的单克隆抗体及其用途
- 本发明公开了一种抗百合无症病毒的单克隆抗体及其用途。用提纯的百合无症病毒免疫的BALB/C鼠脾细胞与SP2/0鼠骨髓瘤细胞融合，经筛选克隆，获得4株能稳定传代并分泌抗百合无症病毒(LSV)单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞...
- 吴建祥洪健刘成科周雪平叶美琴
- 文献传递
- 单抗I-ELISA和TAS-ELISA检测百合无症病毒的研究被引量：7
- 2006年
- 以抗百合无症病毒(Lily symptom less virus,LSV)的单克隆抗体为核心,建立了间接ELISA(I-ELISA)和三抗体夹心ELISA(TAS-ELISA)的检测方法。I-ELISA检测体系中,病叶汁液和单克隆抗体腹水的工作浓度分别为1∶20和1∶6 000,对病叶汁液的检测灵敏度达到了1∶2 560,可检测到提纯病毒绝对量为1.35 ng。TAS-ELISA检测体系中捕获抗体和单克隆抗体腹水的工作浓度分别为1∶200和1∶6 000,检测病叶汁液的灵敏度达到了1∶5 120,对于提纯病毒可检测到0.68 ng。使用美国Agd ia公司双抗体夹心ELISA(DAS-ELISA)检测试剂盒对病叶汁液的检测灵敏度为1∶2 560,提纯病毒检出量1.35 ng。用3种ELISA方法检测了采自浙江省丽水市的46个田间样品,I-ELISA、TAS-ELISA和DAS-ELISA测出的阳性样品数分别为19、21和18个,阳性率为41%、46%和39%。灵敏度检测和田间样品检测结果显示,TAS-ELISA的灵敏度高于DAS-ELISA和I-ELISA。相同样品I-ELISA所测出的OD405值和P/N值普遍高于DAS-ELISA,表明LSV单抗比多抗具有更强的特异性和更高的灵敏度。
- 刘成科吴建祥洪健周雪平叶美琴
- 关键词：百合无症病毒TAS-ELISADAS-ELISA
- 百合病毒病原的检测诊断被引量：26
- 2004年
- 应用电镜和ELISA检测查明浙江丽水和杭州栽培的百合受到黄瓜花叶病毒(CMV)及多种线状病毒侵染。寄主反应测定显示侵染百合的植物病毒寄主范围都很窄,不能通过汁液摩擦接种侵染昆诺藜、苋色藜、普通烟、心叶烟等6科12种指示植物。在64个ELISA检测样品中有26个受到CMV侵染,侵染率达40 6%;在75个负染色检测样品中有58个观察到线状病毒,侵染率达77 3%;在40个被线状病毒侵染的样品中有27个观察到细胞质风轮状内含体,表明受到马铃薯Y病毒属成员的侵染,侵染率达67 5%。从不同线状病毒粒子形态及所引起的细胞病理变化来看,可能分属于马铃薯Y病毒属、麝香石竹潜隐病毒属和马铃薯X病毒属。
- 刘文洪洪健陈集双叶美琴
- 关键词：百合植物病毒病原诊断电镜分析侵染率
- 百合无症病毒单克隆抗体的制备及检测应用被引量：10
- 2005年
- 用百合无症病毒(Lilysymptomlessvirus,LSV)免疫的BALBC鼠脾细胞与SP20鼠骨髓瘤细胞融合,经筛选克隆,获得4株能稳定传代并分泌抗LSV单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞(2A2、5H9、5H2和5E12),并分别制备它们的单抗腹水。4株单克隆抗体腹水间接ELISA效价达10-6,5H9和5E12的抗体类型及亚类均为IgG1,而2A2和5H2均为IgG3,4株单克隆抗体的轻链均为κ链。利用单克隆抗体建立了抗原包被间接ELISA(ACP-ELISA)检测LSV的方法。病叶作1300倍稀释、提纯LSV病毒浓度为18ngmL(每孔的病毒绝对量为1.8ng)时,该方法仍能检测到病毒。利用ACP-ELISA检测了田间样品,发现LSV在百合上发病很普遍。
- 吴建祥刘成科洪健刘文洪叶美琴
- 百合斑驳病毒浙江分离物的基因组3′端序列分析被引量：10
- 2004年
- 经RT PCR扩增从浙江丽水的亚洲百合 [Liliumcvs.(AsiaticHybrids) ]获得 2个Potyvirus病毒分离物G和X的 3′ 端cDNA片段 ,序列分析表明均为百合斑驳病毒 (Lilymottlevirus,LMoV) ;将 1 2个来源于不同地区百合与郁金香上的Potyvirus分离物进行序列同源性比较和系统进化树分析 ,结果表明G、X、ML6 1、1 2 2 9、2b、MD、HZ、J这 8个分离物的CP核苷酸序列同源性达 85 9%～ 1 0 0 % ,在进化树中聚集成簇 ,归为LMoV ;2b2、TM和TBV1 3个分离物同源性达 91 2 %～ 99 3% ,在进化树中也单独成簇 ,归为郁金香碎色病毒 (Tulipbreakingvirus,TBV) ;2b3与其它 1 1个分离物同源性在 74 4 %～ 79 8%之间 ,为伦布兰特郁金香碎色病毒 (Rembrandttulipbreakingvirus,ReTBV)。NIb基因序列和 3′ UTR序列分析也表明G、X、ML6 1、1 2 2 9、J、HZ这 6个分离物之间亲缘关系较近 ,属于LMoV ,而TM与它们的亲缘关系很远 ,属于TBV。LMoV分离物存在着两个群体 ,G和X分别处在第 1群体和第 2群体中 ,不表现地域相关性及寄主相关性。根据研究结果 ,将迄今世界各地侵染百合与郁金香的Potyvirus分离物归为LMoV、TBV和ReTBV3个种。
- 刘文洪洪健陈集双王冲叶美琴
- 关键词：百合斑驳病毒亚洲百合
