尹燕博 作品数:218 被引量:704 H指数:12 供职机构: 青岛农业大学动物科技学院 更多>> 发文基金: 现代农业产业技术体山东省现代农业产业技术体系创新团队建设专项资金系建设专项资金 国家自然科学基金 山东省自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 生物学 文化科学 更多>>
运用RT-PCR一步法和Nested-CR法快速检测FMDV的研究 被引量:5 1997年 将O、A型FMDVRNA分离纯化,用RT-PCR法扩增其聚合酶编码基因,可检测到A型10-6倍稀释、O型10-4倍稀释乳鼠肌肉毒。Nested-PCR扩增该基因内部片段,进一步说明该方法准确可靠。RT-PCR一步完成使整个检测时间不超过12小时。 蒋正军 尹燕博 龚振华 马洪超 孙淑芳 蔡丽娟 郭福生 李葳 吴时友 黄运生 林庆燕 丁有胜 骆德海 陈义民关键词:口蹄疫 病毒 FMDV 聚合酶链反应 鸵鸟采精方法研究 尹燕博 吉亚杰 董武子 梁成珠 陆明哲 孙淑芳 于新文 田茂春低温诱发肉鸡肺血管重塑过程中肺动脉平滑肌细胞c-Myc蛋白表达的变化 被引量:1 2011年 试验旨在研究环境低温诱发肉鸡肺血管重塑过程中肺小动脉血管平滑肌细胞c-Myc蛋白的表达变化,初步探讨肉鸡肺血管重塑的发生机制。120只雄性AA商品代肉鸡15日龄时随机分为对照组((22±1.5)℃)条件下饲养)和低温组((11±2)℃条件下饲养)。15~50日龄,每周每组随机取6只,取肺组织做石蜡切片,Weigert一间苯二酚复红染色,观察并测定血管重塑情况;采用免疫组织化学方法检测肺动脉血管平滑肌细胞c-Myc蛋白表达,并对其进行半定量化。结果显示:(1)低温组肉鸡肺小动脉结构从36日龄开始较对照组发生了明显的重塑(P<0.01或P<0.05);(2)低温组肉鸡肺小动脉血管平滑肌细胞c-Myc蛋白表达从29日龄开始较对照组明显增加(P<0.01)。结果表明:低温明显诱发了肉鸡肺小动脉平滑肌细胞c-Myc蛋白的表达,且参与了肉鸡肺血管重塑的发生发展。 王建琳 尹燕博关键词:肉鸡 肺血管重塑 C-MYC 山东部分鸡致病性大肠杆菌菌株抗药性测试 被引量:3 2000年 用24株致病性大肠杆菌(E.coli),对21种药敏试纸进行抗药性测试。结果表明24株E.coli抗药性相当严重,每种药物的敏感性也有差异。 21种药物只有 2种药最敏感, 8种药完全不敏感,其余 11种药也只对 3- 8个菌株产生高度敏感, 1-9个菌株产生中度敏感,对8-19个菌株产生完全不敏感。 徐瑞 尹燕博 蒋正军 郭福生 陆明哲 王娟关键词:致病性大肠杆菌 抗药性 比格犬IFN-α和IFN-β mRNA SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR检测方法的建立 被引量:3 2014年 为检测比格犬α和β-干扰素(CaIFN-α和CaIFN-β),本研究根据GenBank中登录的IFN-α和IFN-β基因序列,分别设计合成特异性引物,以犬3-磷酸甘油脱氢酶(GAPDH)mRNA为内参,建立SYBR Green I荧光定量RT-PCR检测方法。通过RT-PCR分别扩增IFN-α、IFN-β和GAPDH的基因片段,并克隆于pMD19-T载体中制备标准品,建立荧光定量RT-PCR标准曲线。结果表明:IFN-α和IFN-β和GAPDH基因的Ct值与标准品稀释度在1×102拷贝/μL^1×108拷贝/μL内均呈良好的线性关系,相关系数均大于0.994。组内组间变异系数均小于3%,特异性和重复性较好。同时采用常规RT-PCR方法与本研究建立的方法对30份临床样品检测,结果显示IFN-α和IFN-β的阳性符合率分别为96.43%和96.55%。本研究建立的检测方法为比格犬IFN mRNA的定量分析提供了有效手段。 潘福星 王冬冬 曹志伟 冯培祥 刘宏 齐娟 孙忠晟 王祖荣 尹燕博关键词:SYBR 比格犬 Β-干扰素 鸡Ⅰ型IFN及TLR-3和TLR-7实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立 被引量:1 2016年 为检测鸡抗病毒相关基因在病毒感染过程中的动态变化规律,研究建立了鸡IFN-a、IFN-β、TLR-3和TLR-7的实时荧光定量RT-PCR的检测方法。根据GenBank提供的鸡IFN-α、IFN-β、FLR-3和TLR-7参考序列设计了相应的特异引物,用常规RT-PCR方法从鸡脾脏总RNA中扩增得到鸡相应基因。将其cDNA分别克隆到pMD19-T载体中进行测序鉴定,采用SYBR Green I染料法,建立标准曲线并分析其溶解曲线。结果表明,这4种基因的检测灵敏度可高达46 copies/μL,且具有良好的特异性和重复性。此检测方法的建立为动态定量检测及研究鸡IFN-α、IFN-β、TLR-3和TLR-7基因的表达变化提供了有效的手段。 曹志伟 孙忠晟 郭学金 王建琳 尹燕博关键词:IFN-Α IFN-Β 比格犬IFN-α和IFN-β mRNA SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR检测方法的建立 为检测比格犬α-和β-干扰素(CAIFN-α 和CAIFN-β),本研究根据GENBANK 中登录的IFN-α和IFN-β 基因序列,分别设计合成特异性引物,以犬3-磷酸甘油脱氢酶(GAPDH)MRNA为内参,建立S... 潘福星 王冬冬 曹志伟 冯培祥 刘宏 齐娟 孙忠晟 王祖荣 尹燕博关键词:实时荧光定量RT-PCR 比格犬 Β-干扰素 亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒核酸检测标准物质的制备研究 被引量:8 2012年 针对目前口蹄疫病毒核酸扩增检测缺乏标准物质的现状,以口蹄疫病毒亚洲Ⅰ型核酸为模板,分别设计引物扩增具有检测意义的5′端1nt~2208nt的片段(含完整的5′NCR)和3012nt~5155nt片段(含完整1D~2B区域),并克隆于pMD20-T。测序后采用体外转录方法制备2种RNA纯品,进行初步定量稀释后等量混合分装。采用荧光定量RT-PCR方法进行均匀性和稳定性检验后,委托外部实验室对RNA片段进行拷贝数定值。结果显示,制备的标准品均匀性和稳定性良好。 吴亚琼 高志强 吴延功 张鹤晓 乔彩霞 张利峰 单虎 尹燕博 朱淑芬 王慧珊关键词:口蹄疫病毒 核酸扩增 标准物质 鸵鸟新城疫临床病理变化观察 被引量:2 2008年 随着鸵鸟养殖业在我国的兴起与发展,鸵鸟疫病的诊断与防治已成为重中之重。鸵鸟新城疫(Newcastle Disease,ND)作为危害鸵鸟业的重大疫病之一,国内外对其研究报道大都侧重于对该病的预防,而对于该病的诊断则主要通过实验室分离取得病毒来鉴定,关于该病临床病理学变化却大都简略概述,并未见到详细的、系统的报道。 李吉达 尹燕博 王建琳 王新建 邹晓娟关键词:鸵鸟养殖业 新城疫 病理变化 病理学变化 实验室 H9亚型禽流感病毒、新城疫病毒和传染性支气管炎病毒多重RT-PCR检测方法的建立 被引量:5 2014年 根据GenBank发表的H9亚型禽流感病毒(AIV(H9))HA基因、新城疫病毒(NDV)F基因和传染性支气管炎病毒(IBV)N基因分别设计了3对特异性引物,通过优化扩增条件,建立了同时检测AIV(H9)、NDV和IBV的多重PCR方法,对其特异性和敏感性进行检验,并在临床中进行了初步应用。结果表明,该多重PCR方法具有良好的特异性和敏感性,可同时扩增出大小分别为380bp(AIV(H9))、529bp(NDV)和853bp(IBV)的特异片段,能分别检出1pg AIV(H9)、1pg NDV和10pg IBV的RNA模板,且对AIV(H9)、NDV和IBV混合感染的临床阳性病料的检测结果与单项PCR的检测结果一致。该多重PCR方法可为AIV(H9)、NDV和IBV的临床检测和流行病学调查提供技术支撑。 徐守振 尹燕博关键词:H9亚型禽流感病毒 新城疫病毒 鸡传染性支气管炎病毒 多重聚合酶链反应