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单纯疱疹病毒Ⅰ型扩增子质粒载体的构建及LacZ基因的表达被引量：4: 1998年; 从单纯疱疹病毒Ⅰ型ＨＳＶ－１基因组中分离出其包装信号序列，与含ＨＳＶ－１复制起点及ＩＥ－６８基因启动子的ＤＮＡ序列、β半乳糖苷酶基因和大肠杆菌质粒骨架，构建了一种ＨＳＶ－１扩增子质粒载体ｐＨＳＬ，其中ＬａｃＺ基因置于ＩＥ－６８基因启动子控制下。将此质粒转染已感染了ＨＳＶ－１温度敏感株ｔｓＫ株的Ｖｅｒｏ细胞，ｐＨＳＬ可在ＨＳＶ－１ｔｓＫ的辅助下包装成假病毒颗粒，这样就可得到同时含有假病毒和ＨＳＶ－１ｔｓＫ的混合毒株ｄｖＨＳＬ。将此混合毒株感染传代细胞和神经细胞，可在其中表达ＬａｃＺ基因，而在生理温度（３７℃）下，混合毒株的复制受到抑制。提示这种缺陷型疱疹病毒载体有用于向神经系统基因转移的可能性。; 杨天忠王晓丹崔虹颜子颖侯云德; 关键词：扩增子 LACZ基因单纯疱疹病毒

痘苗病毒天坛株4b启动子的转录效率: 1998年; 痘苗病毒天坛株４ｂ启动子的转录效率崔虹容敏清王芝山侯云德（中国预防医学科学院病毒学研究所病毒基因工程国家重点实验室，北京１０００５２）关键词痘苗病毒，４ｂ启动子痘苗病毒载体在多价基因工程疫苗的研制中十分重要，外源基因在重组痘苗中的高效表达主要依靠启...; 崔虹容敏清王芝山王芝山; 关键词：痘苗病毒

中国疫苗株鸡痘病毒插入载体的构建与MDV糖蛋白B的表达被引量：31: 1996年; 在对中国鸡痘病毒疫苗株２８２Ｅ４基因组ＤＮＡ进行克隆与亚克隆的基础上，进一步插入Ｐｌｌ一ＬａｃＺ标记基因，根据蓝斑选择原理筛选出３个为病毒在细胞培养物上生长所不必需的片段。为了便于外源基因的插入，特将Ｐ７．５一Ｐｌｌ一ＬａｃＺ基因框转移至ＢＬＵＥＳＣＲＩＰＴＳＫＭ１３一的ＢｄｍＨＩ位点，在Ｐ７．５下导人多克隆位点（ＭＣＳ），建立了载体插入标记ｐＳＧＭ１１７５。以ＳｓｔＩＩ和ＡｐａＩ将ＭＣＳ一Ｐ７．５一Ｐｌｌ一ＬａｃＺ框切下，置入一个亚充隆的非必需片段中，构建成中国鸡痘病毒插入载体ｐＦＧ１１７５一１。以ＰｓｔＩ和ＳｍａＩ酶切ｐＶＬｇＢ分离ＭＤＶｇＢ基因的开放阅读框，并将其插入ｐＦＧ１１７５中Ｐ７．５的下游，得到携带ｇＢ基因的质粒ｐＦＧＢ１１７５一１。将此质粒以脂质体转染２８２Ｅ４株感染３一４小时的鸡胚成纤维细胞，同样采用蓝斑筛选技术得到重组的蓝斑病毒。以ＭＤＶｇＢ单克隆抗体进行间接免疫荧光，证实了感染细胞中ｇＢ抗原的存在，从而成功地建立了可表达ＭＤＶｇＢ糖蛋白的以中国疫苗株为基础的重组鸡痘病毒。; 王志亮彭大新张如宽焦新安崔虹侯云德刘秀梵; 关键词：重组鸡痘病毒马立克氏病病毒

以痘苗病毒天坛株为载体的表达单纯疱疹病毒Ⅰ型糖蛋白D的重组活疫苗的建立被引量：1: 1997年; 从我国分离到的一株单纯疱疹病毒Ⅰ型（ＨＳＶ－１－１６８株）病毒基因组中，分离出含有糖蛋白Ｄ（ｇＤ）基因的１．２ｋｂ片段，插入带有痘苗病毒天坛株ＴＫ区的质粒ｐＪＳＢ１１７５Ｐ７．５ｋ启动子下游，转染无白血病鸡胚原代细胞，获得带有ＨＳＶ－１－１６８ｇＤ基因的重组痘苗病毒。此株重组病毒在感染细胞膜上表达ＨＳＶ－１－１６８ｇＤ糖蛋白抗原，能与特异性单克隆抗体反应。在感染细胞中表达的膜抗原经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，表达分子量为５４ｋＤ糖蛋白。用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交分析了重组病毒ＤＮＡ中特异的ｇＤ基因，对作为活疫苗的重组痘苗病毒株进行了一些微生物学活性、免疫原性和毒力等方面的研究。; 崔虹尚大庄杨天忠杨雄虎侯云德阮力朱既明; 关键词：痘苗病毒载体疱疹病毒病毒疫苗糖蛋白D

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崔虹

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