张斌
- 作品数：115 被引量：435H指数：13
- 供职机构：西南民族大学更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 基于E2蛋白BVDV腺病毒载体疫苗的制备及对小鼠的免疫原性分析
- 2024年
- 选用牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)SWU-Z6株的E2基因序列为模板,针对HEK293细胞密码子偏嗜性优化合成全长E2基因,利用AdMax腺病毒包装系统制备Ad5-BVDV-E2。采用PCR、间接免疫荧光(IFA)和Western blot验证了E2蛋白在HEK293细胞中成功表达,并通过肌注、滴鼻和口服免疫途径来免疫小鼠,同时设立BVDV商业灭活苗组和PBS空白对照组。结果显示,经酶切鉴定和测序验证表明,优化后的E2基因已正确克隆至腺病毒穿梭载体pDC316中,并获得重组质粒pDC316-E2,将pDC316-E2和腺病毒骨架质粒共转染至HEK293细胞,获得重组腺病毒Ad5-BVDV-E2。PCR验证了E2基因成功插入到腺病毒载体基因组中,IFA和Western blot证实了重组腺病毒能够正确表达E2蛋白,并具有良好的生物学活性。通过肌注、滴鼻和口服均能产生较高的抗体水平,其中Ad5-BVDV-E2肌注组小鼠加强免疫1周后抗体滴度最高达到1∶102400。结果表明,成功制备了Ad5-BVDV-E2,能诱导机体产生较强的体液免疫反应,表明Ad5-BVDV-E2具有临床应用的潜力。
- 张家祺李格格朱庆杨洋喻琦胜陈涛云任玉鹏张斌张斌
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒E2蛋白免疫原性
- 赤麂源多杀性巴氏杆菌的分离鉴定被引量：3
- 2014年
- 从四川省某养殖场病死赤麂心血中分离到1株致病菌,通过细菌分离培养、菌落形态、细菌革兰染色镜检、生化鉴定及16SrDNA片段扩增鉴定为多杀性巴氏杆菌。药敏试验结果表明,该菌对先锋霉素、头孢他定、头孢氨噻肟及头孢吡肟等敏感,对大多数抗菌药物高度耐药,可以选取这些敏感药物对该养殖场赤麂进行治疗。
- 周跃塔曾泽费磊张斌岳华
- 关键词：赤麂多杀性巴氏杆菌
- 青藏高原牦牛感染BVDV和BEV的分子流行病学调查被引量：15
- 2016年
- 为了解青藏高原地区牦牛牛病毒性腹泻病毒（BVDV）和牛肠道病毒（BEV）的感染情况,应用RT-PCR对青藏高原地区（西藏、青海、四川和云南）共计222份出现腹泻症状的牦牛粪便样品开展了分子流行病学调查。从222份样品中,检出44份BVDV阳性,BVDV阳性检出率为20%（95%CI：15.5%~25.6%）;检出65份BEV阳性,BEV阳性检出率为29.4%（95%CI：24.1%~35.0%）;BVDV/BEV混合感染阳性率为4.8%（95%CI：2.5%~8.0%）。结果表明,所有被检地区牦牛均存在BVDV和BEV感染,且部分地区感染较为严重,有混合感染的情况。研究结果旨在为青藏地区牦牛腹泻的综合防控措施提供基本数据,丰富BVDV和BEV的分子流行病学调查资料。
- 陈新诺张朝辉徐林唐川余劲李劲廖昆汤承张斌
- 关键词：牦牛牛病毒性腹泻病毒分子流行病学调查
- 副猪嗜血杆菌和猪传染性胸膜肺炎放线杆菌双重PCR检测方法的建立及应用被引量：2
- 2013年
- 针对副猪嗜血杆菌(Hps)16SrRNA序列和猪传染性胸膜放线杆菌(App)ApxIVA基因序列各设计一对引物,分别能扩增大小为822bp和346bp的目的基因片段,建立快速鉴定Hps和App的双重PCR方法。特异性试验表明,该方法对波氏杆菌、巴氏杆菌、大肠埃希菌、沙门菌、金黄色葡萄球菌、猪圆环病毒2型、猪流感病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒的扩增结果均为阴性。敏感性试验表明,该方法与单项PCR的敏感性一致,最低可检测核酸浓度Hps 38pg/mL,App 3.8pg/mL;最低检测细菌含量Hps 8.9cfu,App 26.9cfu。利用该方法检测Hps和App参考菌株、临床分离株、36份临床肺组织样本和人工感染的猪肺组织样本。结果显示,该方法对参考菌株和临床分离株全部检出,36份临床样本中检出Hps 18份,App为阴性,与单项PCR检测结果一致,人工感染组织样本也均能检出。表明该方法适用于Hps和App的临床快速检测。
- 余远迪曾泽岳华张斌
- 关键词：副猪嗜血杆菌双重PCR方法
- 一种水溶性动物疫苗及其制备方法和用途
- 本申请涉及动物疫苗领域，具体公开了一种水溶性动物疫苗及其制备方法和用途。这种水溶性动物疫苗包括水溶性聚合物佐剂和抗原；水溶性聚合物佐剂与抗原的质量比为0.3‑5:1；水溶性聚合物佐剂包括普朗尼克、聚乳酸‑羟基乙酸共聚物和...
- 汪露张斌陈朝喜
- HPS OmpP2表面环状结构诱导猪肺泡巨噬细胞炎性因子mRNA转录的研究被引量：1
- 2019年
- 副猪嗜血杆菌(HPS)对养猪业造成了严重的影响。外膜蛋白P2(OmpP2)是HPS外膜中最丰富的蛋白,能介导宿主的炎症反应。试验通过人工合成OmpP2的表面环状结构(Loop)氨基酸序列体外刺激猪肺泡巨噬细胞(PAMs),探究OmpP2中不同Loop在炎性反应中的作用。用HPS血清4型SC096菌株OmpP2作为参照,通过real-time PCR方法测量8个Loop刺激PAMs细胞6 h后IL-1ɑ、IL-1β、IL-6、IL-8、CCL-4、CCL-5细胞因子mRNA的转录水平。与对照细胞相比,8个Loop均能诱导PAMs中IL-1ɑ、IL-1β、IL-6、IL-8、CCL-4、CCL-5细胞因子mRNA转录出现不同程度的上调,其中Loop7和Loop8刺激细胞后细胞因子mRNA转录水平上调显著(P<0.05)。提示Loop7和Loop8是OmpP2发挥促炎功能的一个重要组成结构。
- 周叶贺超王丹岳华任玉鹏任玉鹏
- 不同来源的3株牛病毒性腹泻病毒对小鼠的致病性分析被引量：6
- 2018年
- 为分析牛病毒性腹泻病毒(BVDV)对小鼠的致病性,选取BALB/c小鼠为试验动物,攻毒组通过腹腔注射接种不同来源的3株牦牛源BVDV1-DJ2、BVDV1-Z6和OregonC24V毒株,对照组接种DMEM培养基。分别于接种后第5、7、10天收集小鼠血液和组织,并通过血常规、病理组织学、荧光定量PCR等方法对病毒感染小鼠的致病性进行研究。结果显示:攻毒后,Z6组小鼠表现的临床症状较DJ2组严重;攻毒组淋巴细胞、白细胞、血小板含量显著降低;荧光定量PCR结果显示,BVDV在肺和肝中的检出率Z6组明显高于DJ2组;HE染色可见攻毒组肝静脉内出现炎性细胞浸润、肠绒毛上皮细胞坏死和脱落,还可见脾内吞噬细胞增多和脾小结反应性增生、肺泡萎缩和出血等病理变化,与OregonC24V组相比,Z6组病变最严重,DJ2组较轻。以BALB/c小鼠为试验动物,通过腹腔注射的方式可以为BVDV感染小鼠的致病性及模型的构建提供数据支持和指导。
- 阮文强陈新诺任玉鹏覃思楠汤承张斌
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒BALB/C小鼠
- 牛冠状病毒RT-PCR检测方法的建立及应用被引量：33
- 2018年
- 本试验的目的是建立更加灵敏的检测牛冠状病毒(BCoV)的RT-PCR方法,并对川西北草原牦牛病料进行BCoV病原检测。选择BCoV聚合酶基因Nsp7-Nsp9片段设计引物,通过反应条件和体系优化,建立检测BCoV的RT-PCR方法并应用于临床样本检测。结果显示:所建方法特异性和重复性好,灵敏性达到1×10-2pg·μL-1;该方法对肉牛和牦牛BCoV都有良好的检测效果,优于比较的两种以BCoV N基因为靶点的RT-PCR方法;对2016年采集的川西北草原牦牛病料进行了BCoV的检测,结果显示:125份腹泻牦牛粪便样本中BCoV的检出率为71.20%,98份患呼吸道疾病的牦牛鼻腔棉拭子中BCoV的检出率为72.45%。此次建立的BCoV RT-PCR检测方法特异性和重复性好、灵敏度高;BCoV是当前川西北草原牦牛腹泻和呼吸道疾病综合征的重要病原。
- 何琪富郭紫晶李然周军岳华张斌张斌
- 关键词：牛冠状病毒RT-PCR方法牦牛腹泻呼吸道疾病综合征
- 一种猫杯状病毒ORF1重组非结构蛋白及其在制备间接ELISA抗体检测试剂盒中的应用
- 本发明涉及一种猫杯状病毒ORF1重组非结构蛋白及其在制备间接ELISA抗体检测试剂盒中的应用。本发明提供的间接ELISA抗体检测试剂盒包含以猫杯状病毒ORF1重组非结构蛋白制备的包被抗原、酶标一抗、酶标二抗、标准阳性血清...
- 张斌谢远鑫岳华汤承王远微
- 一种牛病毒性腹泻病毒SMU-Z6/1a/SC/2016分离株及其应用
- 本发明公开了一种牛病毒性腹泻病毒SMU‑Z6/1a/SC/2016分离株及其应用。其中牛病毒性腹泻病毒的保藏号为CCTCC NO:V201813，保藏于中国典型培养物保藏中心，该牛病毒性腹泻病毒具有较高的毒价，而且该病毒...
- 张斌阮文强汤承岳华王远微张丹丹
- 文献传递
