徐文忠 作品数:18 被引量:89 H指数:5 供职机构: 南京农业大学动物医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 更多>>
生长抑素基因初级克隆质粒(pUC12-SS)的改造与鉴定 被引量:6 1991年 生长抑素(somatostatin,ss)基因初级克隆质粒(pUC12-SS)含有限制性内切酶BamHI和HindⅢ的重复位点,用HindⅢ酶切处理和T_4DNA连接酶连接后。获得了它们的单一位点。并对经过修饰后的质粒进行了多个酶位点、SS基因片段回切和DNA序列等全面分析和证实。 徐文忠 杜念兴 李光地 汪垣关键词:生长抑素 基因 质粒 改变乙型肝炎病毒核心抗原基因3′端序列对其在原核细胞中表达的影响 1992年 乙型肝炎病毒(HBV)的核心抗原基因(C基因)编码185个氨基酸残基,在原核细胞或痘苗病毒系统中能表达并装配成27nm大小的核心抗原(HBcAg)多聚体颗粒。已证实HBV C基因3′端编码近40个氨基酸的碱基序列,不是表达形成HBcAg颗粒所必需的。用外源基因替换这部分序列,已表达出表面带有外源基因产物的杂合颗粒,它具有很好的免疫原性,成为新型的基因工程多决定簇颗粒载体疫苗。但我们的实验中发现,用另外的外源基因替换3′端序列能显著影响HBV C基因在大肠杆菌中的表达,不同组成的外源基因其影响程度有所不同。 徐文忠 李光地 杜念兴 汪垣关键词:乙型肝炎病毒 核心抗原 原核细胞 生长抑素与乙肝表面抗原融合基因重组痘苗病毒的构建及其表达 被引量:32 1992年 将生长抑素(ss)与乙肝表面抗原(HBsAg)融合基因(ss/HBs)克隆到痘苗病毒表达质粒pGJP-5中,通过与痘苗病毒天坛株体内重组和蚀斑挑选技术获得融合基因的重组病毒,它保持痘苗病毒原有的感染性,并能表达出 ss 和 HBsAg 产物.表达产物呈表面带 ss 决定簇的 HBsAg 杂合颗粒,并分泌到感染细胞之培养液中.杂合颗粒的大小和密度与报道的 HBsAg 颗粒相似。本文还对该重组痘苗病毒可能作为 ss 活载体苗的前景进行了讨论。 徐文忠 杜念兴 李光地 汪垣关键词:生长抑制素 乙型肝炎 表面抗原 痘苗病毒 单抗-间接ELISA检测犊牛腹泻粪样的牛冠状病毒 被引量:1 1993年 应用自制的牛冠状病毒(BCV)单抗兔抗BCV高免血清及进口辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG建立了间接ELISA,用以检测BCV抗原。在所检的44份犊牛腹泻粪样中,30份为阳性.同时用供常规诊断使用的国外同类单抗作比较检测,两者符合率达89.6%,尤其是抗原效价高的样本,更加吻合。阳性和阴性对照的OD值稳定,可重复性好,已知轮状病毒粪样为阴性.证明自制的BCV单抗确实可靠,以其建立的间接ELISA达到了临床检测实用的国际水平. 陆承平 徐文忠关键词:犊牛 日冕形病毒 基因工程多决定簇颗粒性疫苗载体 1991年 本世纪70年代建立的基因工程技术为亚单位疫苗的研制开辟了一条新途径。然而,由于亚单位疫苗具有抗原单决定簇和分子可溶性特点,使其免疫原性较差,达不到保护性免疫效果。近几年来,国外发现一些新的载体,它们能形成多聚体颗粒。 徐文忠 陈萍 杜念兴关键词:基因工程 疫苗 生长抑素(Somatostatin)新型基因工程疫苗的研究 徐文忠一种基因工程多价疫苗的抗原载体——人乙型肝炎病毒多聚体颗粒性抗原 被引量:9 1991年 本世纪70年代基因工程的出现,给疫苗研制尤其是一些难以在细胞上培养的病毒或培养中很危险的病毒疫苗的研制,提供了一条新的途径。然而,将病原的特定保护性抗原基因单独表达或者与一些单体蛋白载体基因融合表达的所谓基因工程亚单位苗,存在一个明显的缺点,由于其抗原单价和分子可溶性,使其免疫原性较弱,达不到保护性免疫的效果。这是至今难以得到理想的基因工程苗的主要原因。近几年来,国外科学家正在探索新的蛋白载体以克服这个缺点。 徐文忠 杜念兴 李光地关键词:乙肝病毒 表面抗原 基因重组痘苗病毒在鸡胚中的增殖与表达 被引量:3 1994年 基因重组痘苗病毒在鸡胚中的增殖与表达徐文忠,陈萍,杜念兴(南京农业大学动物医学系,南京210095)AMPLIFICATIONANDEXPRESSIONOFRECOMBINANTVACCINIAVIRUSINCHICKENEMBRYO¥XuWenzh... 徐文忠 陈萍 杜念兴关键词:鸡胚 基因 痘苗 病毒 增殖 鸡血型系统对马立克氏病抗性标记的研究 被引量:4 1997年 鸡血型系统对马立克氏病抗性标记的研究1)马吉飞陈万芳陈萍徐文忠(南京农业大学动物医学院210095)董淑珍(河北农业技术师范学院)鸡马立克氏病(MD)是由马立克氏病病毒(MDV)引起的鸡肿瘤性疾病,尽管已有预防本病的疫苗并广泛应用,但世界各国MD的发... 马吉飞 陈万芳 陈萍 徐文忠 董淑珍关键词:鸡病 血型 马立克氏病 牛冠状病毒单克隆抗体的研究 1992年 以纯化的牛冠状病毒(BCv)免疫 BALB/c 小鼠,取其脾脏细胞与小鼠骨髓瘤细胞 SP2/0融合,用间接 ELISA 筛选,获得了4株分泌 BCV 特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞:C_(12)、C_(31)、C_(42)和C_(54).它们系针对 BCV 不同表面抗原决定簇的.用 C_(12)和 C_(31)两株细胞制备的腹水混合包被聚苯乙烯微孔板,建立了以生物素标记的兔抗 BCV IgG 和酶标亲和素介导的 BAS—ELISA,并对 BCV 标准毒株和临床犊牛腹泻粪样作了检测. 徐文忠 陆承平 杜念兴 徐为燕 陈溥言关键词:牛冠状病毒 单克隆抗体 ELISA