徐立博 作品数:12 被引量:14 H指数:2 供职机构: 新乡医学院 更多>> 发文基金: 河南省科技攻关计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 更多>>
同种异体骨异位再血管化的实验研究 目的 探讨兔同种异体与自体大段胫骨异位再血管化时间差异性.方法 健康成年中国白兔(月龄6 个月)70 只,体重2.5±0.5kg,随机分为实验组(同种异体骨组)30 只、对照组(自体骨组)30 只,10 只用作制备同种异... 周明武 罗彦平 李扬 张迅 徐立博 杨瑞甫关键词:同种异体骨 皮质骨 血管化 VEGF CD34 人可溶性补体受体1型双抗体夹心ELISA法的建立及初步应用 被引量:2 2013年 目的建立定量检测人血清可溶性补体受体1型(sCR1)双抗体ELISA夹心法。方法用鼠抗人CD35单克隆抗体(mAb)包被反应板,以兔抗人sCR1抗体(PcAb)为夹心抗体,辣根过氧化物酶(HRP)标记的山羊抗兔IgG为检测抗体,纯化后的人sCR1蛋白为标准品,建立定量检测人血清sCR1双抗体夹心ELISA法,并检测50例体检健康者和32例肝硬化患者血清样本中sCR1水平。结果建立的双抗体夹心ELISA法检测人血清sCR1的线性范围为15.6~250 ng/mL。低、高浓度批内变异系数(CV)分别为9.3%、7.1%;批间CV分别为11.2%和9.82%;回收率分别为89.5%和92.5%。50例健康人和32例肝硬化患者血清sCR1水平分别为(33.82±5.88)ng/mL和(152.99±9.51)ng/mL,两者比较有统计学差异(t=70.18,P<0.001)。结论成功建立了检测人血清sCR1的双抗体夹心ELISA法,重复性和准确性较好。初步发现肝硬化患者血清sCR1水平显著升高。 解放军第 周明武 刘亚利 徐立博 李琛琪 罗彦平 陈北方 王广兰关键词:酶联免疫吸附试验 双抗体夹心法 遗传性抗凝血酶缺陷症基因突变的研究进展 被引量:2 2014年 人体的抗凝系统主要有抗凝血酶(antithrombin,AT)系统(包括抗凝血酶和肝素,主要抑制具有丝氨酸蛋白酶活性的凝血因子,如:FXa,凝血酶等)和蛋白 C 系统(包括蛋白 C,蛋白 S,血栓调节蛋白,内皮细胞蛋白 C 受体等,主要灭活凝血因子Ⅴ和Ⅷ等),而抗凝血酶系统中的抗凝血酶是人体最重要的抗凝因子之一,约占抗凝活性的70%。抗凝血酶是一种丝氨酸蛋白酶(serpins)抑制剂,主要具有抑制丝氨酸蛋白酶活性的凝血酶、FXa 等因子,在人体抗凝系统中发挥着重要作用。 李正民 宫璀催 方盼盼 徐立博关键词:基因突变 丝氨酸蛋白酶 蛋白酶活性 SERPINS 抗凝系统 大段感染骨煮沸后异位再血管化的实验研究 被引量:2 2015年 [目的]探讨大段感染骨经煮沸后异位再血管化的可行性。[方法]将120只健康6个月龄中国白兔随机分为实验组、对照组各60只。实验组:首先制备兔胫骨感染模型,然后截取2.0 cm长感染胫骨,经煮沸灭菌后,异位于对侧大腿股直肌与股内侧肌间隙之隐动脉处,1.0克氏针固定于股骨上。对照组:在同一部位截取相同长度的无菌胫骨段经生理盐水浸泡处理后,余步骤同实验组。两组分别于术后0、4、6、8、10、12周各处死10只兔子,通过大体标本观察及免疫组织化学染色法检测异位血管化骨CD34阳性血管数和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)蛋白表达量的灰度值,分析判断两组血管化情况。[结果]术后4、6、8周,实验组CD34阳性血管数均低于对照组(P<0.05),其VEGF蛋白表达量也均低于对照组,但仅术后8周差异有统计学意义(P<0.05);术后10、12周,实验组CD34及VEGF检测结果均稍高于对照组,但差异均无统计学意义(P>0.05)。实验组和对照组CD34阳性血管数及VEGF蛋白表达量分别在术后10、8周达到峰值,之后均成下降趋势。此时,两组异位血管化骨几乎完全被软组织包裹;两者贴附紧密,分离困难。[结论]自体正常骨在术后8周完成再血管化,要快于煮沸骨,而煮沸骨在术后10周也完成再血管化。证实兔大段感染胫骨经煮沸灭菌后异位于肌肉丰富的知名血管处,使其再血管化,转化为血管化骨是可行的。 李扬 罗彦平 周明武 朱杰 张迅 徐立博关键词:再血管化 VEGF CD34 肝硬化患者创伤后血清微量可溶性补体受体1型表达水平 被引量:1 2013年 补体系统是机体重要的防御系统,正常的补体激活在清除凋亡细胞,参与免疫应答和防御病原体入侵中有重要作用[1].补体系统属于天然免疫系统(innate immune system)的一个组成部分,它的激活可产生多种生物学效应,具有免疫调控、黏附、调理促吞噬、清除免疫复合物(immune complexes,IC)和炎症等作用,都是通过补体受体介导的,如补体系统的过度活化,可造成机体组织损伤等疾病,给身体带来严重危害. 周明武 仓宝成 刘亚利 李琛琪 刘蕊 徐立博 罗彦平 王广兰同种异体骨异位再血管化的实验研究 被引量:4 2014年 目的比较不同时间段兔同种异体大段胫骨与自体大段胫骨异位再血管化程度的差异性。方法健康成年(6月龄)中国白兔70只,体质量(2.5±0.5)kg,按随机数字表法分为实验组(同种异体骨组)30只、对照组(自体骨组)30只,余10只用作制备同种异体骨供体。实验组将制备好的1.5 cm长兔异体胫骨段置于兔大腿隐动脉处的股直肌与股内侧肌的间隙内,1.0克氏针固定于股骨上。对照组取与实验组相同部位等长自体胫骨同法置于兔大腿相应部位。分别于术后4、8、12周通过大体标本观察、免疫组化法检测移植骨组织血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和CD34蛋白在血管内皮细胞中的表达。结果 VEGF主要存在于新生血管周围、成骨细胞、软骨细胞以及未分化的间充质细胞,CD34主要分布在以哈弗管为中心的血管内皮细胞。术后4、12周,实验组VEGF的表达与对照组比较,差异无统计学意义[术后4周(4.50±2.01)vs(5.50±1.35),术后12周(4.10±1.52)vs(3.60±1.58),P>0.05)];术后8周,实验组VEGF的表达与对照组比较,差异有统计学意义[(6.60±1.07)vs(8.60±2.17),P<0.05],且两组VEGF的表达量4周少于8周(P<0.05),8周多于12周(P<0.05)。术后4周,实验组CD34阳性血管数与对照组比较,差异有统计学意义[(5.30±1.83)个∕视野vs(7.30±1.34)个∕视野,P<0.05];术后8、12周,实验组CD34阳性血管数与对照组比较,差异无统计学意义[术后8周(13.30±1.95)个∕视野vs(13.80±2.62)个∕视野,术后12周(10.90±2.28)个∕视野vs(11.80±1.22)个∕视野,P>0.05];两组CD34阳性血管数4周少于8周(P<0.05),8周多于12周(P<0.05)。结论兔同种异体大段胫骨段置于含有知名血管血供丰富的肌肉间隙内2个月能够完成再血管化,与自体骨无明显差异,证实了同种异体大段胫骨段异位再血管化的可行性。 周明武 罗彦平 杨瑞甫 宋力 李扬 张迅 徐立博 王义生关键词:同种异体骨 皮质骨 血管化 VEGF CD34 FN对酒精性大鼠成骨细胞凋亡的影响及其机制的实验研究 目的: 探讨纤维黏连蛋白(fibronectin,FN)对酒精引起的成骨细胞凋亡的影响,并探讨其相关机制。 方法: 分离并培养SD大鼠乳鼠颅骨的成骨细胞,细胞纯化后,碱性磷酸酶染色法对成骨细胞进行鉴定,取生长旺盛的... 徐立博关键词:纤维黏连蛋白 成骨细胞 细胞保护 同种异体骨异位再血管化的实验研究 目的 探讨兔同种异体与自体大段胫骨异位再血管化时间差异性.方法 健康成年中国白兔(月龄6个月)70只,体重2.5 ±0.5kg,随机分为实验组(同种异体骨组)30只、对照组(自体骨组)30只,10只用作制备同种... 周明武 罗彦平 李扬 张迅 徐立博 杨瑞甫关键词:同种异体骨 皮质骨 血管化 VEGF CD34 兔同种异体胫骨异位骨活性的实验研究 被引量:1 2015年 目的 比较不同时间段兔同种异体胫骨与自体大段胫骨异位活化程度的差异性. 方法 2013年9月-2014年6月,健康成年中国白兔(月龄6个月)80只随机分为实验组(同种异体骨组)40只、对照组(自体骨组)40只,另取10只用作制备同种异体骨供体.实验组将制备好的1.5 cm长兔异体胫骨段置于兔大腿隐动脉处的股直肌与股内侧肌间隙内,1.0 mm克氏针固定于股骨上.对照组取与实验组相同部位等长自体胫骨同法置于兔大腿相应部位.分别于术后4、8、12、16周通过大体标本观察、免疫组化方法检测移植骨组织骨形态发生蛋白2(BMP-2)和Ⅰ型胶原的表达,用方差分析进行数据处理. 结果 BMP-2主要存在于软骨细胞、成骨细胞、未分化的间充质细胞的胞浆,Ⅰ型胶原纤维主要分布在骨陷窝周围的骨基质中.实验组和对照组术后4周BMP-2的表达分别为85.25±4.47、103.78±6.59,术后8周分别为109.44±14.69、124.95±14.94,术后4周Ⅰ型胶原的表达分别为78.74±7.99、88.87±11.26,术后8周为95.95±6.99、102.45±2.82,组间差异有统计学意义(P<0.05);实验组和对照组术后12周、16周BMP-2的表达分别为141.85±9.45、145.46±8.10和116.25±14.18、112.48±13.27,Ⅰ型胶原的表达分别为139.91±4.32、140.76±4.62和137.76±3.48、139.05±4.55,组间差异无统计学意义(P>0.05).两组BMP-2和Ⅰ型胶原的表达量4周、8周、12周逐渐增高,于12周达到顶峰,16周BMP-2又呈下降趋势,而Ⅰ型胶原基本维持在12周水平. 结论 兔同种异体胫骨段置于含有知名血管血供丰富的肌肉间隙内3个月能够活化,与自体骨无明显差异,同种异体胫骨段异位活化具有可行性. 罗彦平 周明武 杨瑞甫 李扬 徐立博 张迅关键词:同种异体骨 胫骨 皮质骨 骨形态发生蛋白2 人sCR1转化克隆菌的快速筛选和鉴定 被引量:3 2013年 目的用G418快速筛选及鉴定重组人可溶性补体受体1型(sCR1)高拷贝转化克隆菌。方法采用的sCR1重组质粒,经电转化将其克隆入酵母SMD1168细胞株中,利用G418的抗性,快速筛选转化克隆菌,并对克隆菌株提取基因组DNA进行聚合酶链反应(PCR)鉴定;该克隆菌经甲醇诱导培养后,对其表达产物进行十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及Western blot鉴定分析。结果从G418快速筛选的毕赤酵母克隆菌株中提取的基因组DNA进行PCR鉴定,获得了高拷贝整合的重组毕赤酵母克隆菌株,经诱导培养后,对其表达产物进行SDS-PAGE及Western blot鉴定分析,该表达蛋白在SDS-PAGE上表现为相对分子质量大于30 000的蛋白区带,在Western blot分析中可被sCR1的CD35单克隆抗体(mAb)识别,成功获得高拷贝整合的重组毕赤酵母细胞株,可表达出重组人sCR1融合蛋白。结论经高浓度G418药物快速筛选的高拷贝毕赤酵母SMD1168细胞株,用于表达人sCR1融合蛋白。 周明武 李琛琪 徐立博 罗彦平 张威 方盼盼 王广兰关键词:毕赤酵母菌 G418