徐鑫
- 作品数：4 被引量：5H指数：2
- 供职机构：南京医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金南京市医学科技发展项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人源抗TROP2全分子抗体IgG的真核表达及对胰腺癌细胞增殖的抑制作用被引量：2
- 2014年
- 目的:以人源抗TROP2抗体Fab基因为模板,构建人源抗TROP2全分子抗体IgG真核表达系统,观察人源抗TROP2全分子抗体IgG对胰腺癌细胞增殖的抑制作用。方法:分别扩增抗TROP2抗体的重链和轻链基因,构建人源抗TROP2全分子抗体IgG的重组表达载体pWS-anti-TROP2,转染CHO dhfr-细胞,加MTX筛选抗体表达量高的单克隆株,Protein G亲和柱纯化,获得人源抗TROP2全分子抗体IgG。SDS-PAGE、Western blot、ELISA、免疫荧光和流式细胞术等方法鉴定人源抗TROP2全分子抗体IgG并分析其免疫学活性。MTT法分析人源抗TROP2全分子抗体IgG对胰腺癌细胞BxPC-3的增殖抑制作用。结果:成功构建了人源抗TROP2全分子抗体IgG的真核表达系统,表达并纯化人源抗TROP2全分子抗体IgG。经鉴定,抗体的轻链与重链大小与预期一致,可与TROP2蛋白特异性结合,效价可达1∶6 400。MTT检测结果表明,人源抗TROP2全分子抗体IgG对胰腺癌BxPC3细胞的增殖有明显的抑制作用,且呈时效、量效依赖关系。结论:本研究成功构建了人源抗TROP2全分子抗体IgG的真核表达系统,并证明此抗体可特异性识别胰腺癌细胞表面的TROP2蛋白,且对胰腺癌细胞的增殖有明显的抑制作用。
- 王欢刘琼琼唐小军徐鑫褚楚熊四平郑峰童华朱进冯振卿林红
- 关键词：真核表达系统CHO胰腺癌
- 抗EB病毒LMP2A单克隆抗体的制备及免疫学特性分析
- 2014年
- 目的:利用杂交瘤技术制备抗EB病毒潜伏膜蛋白2A(LMP2A)单克隆抗体并分析其免疫学特性。方法:以LMP第2和第5胞外区表位串联制备的融合蛋白免疫BALB/c小鼠,取免疫后小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合,制备抗LMP2A的单克隆抗体。通过ELISA、Western blot、免疫荧光、免疫组化、流式细胞术等方法鉴定单抗的免疫学特性。结果:获得1株稳定并持续分泌抗LMP2A单克隆抗体的稳定杂交瘤细胞株,所分泌的单克隆抗体5C12-C4-A6能够特异性识别鼻咽癌细胞膜表面的LMP2A蛋白。结论:本文制备了能够特异性识别鼻咽癌细胞膜表面LMP2A蛋白的单克隆抗体,为进一步进行鼻咽癌临床早期诊断和分子靶向治疗奠定了基础。
- 徐鑫唐小军熊林王欢李文杰高畅熊四平仇镇宁Tan Min HanVo Jess Honganh冯振卿陈仁杰
- 关键词：EB病毒LMP2A单克隆抗体免疫学特性
- 抗炭疽毒素保护性抗原单克隆抗体的制备及功能分析被引量：3
- 2013年
- 目的:原核表达炭疽杆菌保护性抗原PA10蛋白,制备单克隆抗体,并进行功能分析。方法:人工合成炭疽杆菌保护性抗原PA10编码基因并克隆入pUC57载体,酶切鉴定后,将PA10编码基因插入原核表达载体pColdⅡ中,测序验证正确后转化至大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG和低温条件下诱导蛋白表达,SDS-PAGE验证产物;用HiTrap IMAC HP柱纯化重组蛋白,Western blot进一步验证。以纯化获得PA10重组蛋白为抗原,常规程序免疫BALB/c小鼠,制备单克隆抗体,并检测所制备抗体的中和活性。结果:获得的PA10重组蛋白免疫小鼠制备单克隆抗体,最终获得了4株特异性的单克隆抗体(分别命名为2G8、5A8、7B3、9C9)。经体外炭疽毒素保护试验证实,其中1株单抗(7B3)具有较强的中和活性,其保护率可高达96%。结论:本文成功构建并表达炭疽杆菌保护性抗原PA10,制备了具有中和活性的抗PA单克隆抗体,为构建人源化的抗PA中和抗体奠定基础,从而有望用于炭疽病的治疗。
- 吕洪臻唐小军熊四平徐鑫郑峰冯振卿朱进
- 关键词：炭疽杆菌保护性抗原单克隆抗体中和抗体
- 特异性结合LMP2A胞外区第二位及第五位串联表位融合蛋白的单克隆抗体及应用
- 特异性结合LMP2A胞外区第二位及第五位串联表位融合蛋白的单克隆抗体及应用，由保藏编号为CCTCC？NO:C201504的杂交瘤细胞株产生，保藏日期为2015年1月29日，保藏单位名称为中国典型培养物保藏中心。利用单克隆...
- 徐鑫冯振卿朱进
- 文献传递
