李兰
- 作品数：51 被引量：78H指数：6
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- 相关领域：农业科学生物学医药卫生理学更多>>
- 重组猪肺表面活性蛋白A在昆虫杆状病毒表达系统的表达及体外抗PRRSV活性初步鉴定
- 2017年
- 为研究重组猪肺表面活性蛋白A(RpSP-A)的抗病毒活性,采用Bac-to-Bac系统对RpSP-A蛋白进行表达。首先PCR扩增目的基因并将其克隆至pFastBac1转移载体获得pFast-SP-A,通过转化DH10Bac感受态细胞获得重组Bacmid,然后转染sf9细胞获得重组杆状病毒rBV-SP-A,在sf9细胞上进行目的蛋白的表达,经镍柱纯化、脱盐柱处理后,采用蚀斑减少方法评价RpSP-A对PRRSV感染Marc-145细胞的抑制作用。结果显示RpSP-A在sf9细胞中得到正确表达,并且能够降低PRRSV在Marc-145细胞上的感染,补加Ca^(2+)时30μg/mL RpSP-A抑制率高达77%,15μg/mL RpSP-A抑制率为43%,未补加Ca^(2+)时RpSP-A没有表现出抑制作用。上述结果表明利用Bac-to-Bac系统可以稳定获得大量具有抗PRRSV作用的可溶性RpSP-A。
- 李兰郑其升张元鹏李鹏成肖希龙付言峰侯继波
- 关键词：表面活性蛋白A杆状病毒表达猪繁殖与呼吸综合征病毒抗病毒活性
- 一种猪FTO基因编码区A227G单碱基突变的检测方法及应用
- 本发明涉及一种猪FTO基因A227G碱基突变的检测方法及应用，属基因工程技术领域。根据GenBank数据库猪FTO基因序列设计特异性引物，对待检测猪基因组进行PCR扩增；分离、纯化扩增产物，获得特异核酸；使用限制性内切酶...
- 付言峰李兰任守文方晓敏李碧侠王学敏周艳红
- 文献传递
- EphB6,LEPR-LEP基因转录组水平参与了猪的胚胎着床调控
- 引言猪胚胎着床期(第13-24d)的胚胎不良发育乃至死亡是导致其初生体重低和产仔数降低的一个重要因素,有研究表明EphB6,Leptin receptor和Leptin (LEP)等细胞因子在某些哺乳动物的胚胎着床过程中...
- 付言峰Robert V.Knox李兰任守文
- 文献传递
- 梅山猪胚胎附植期EphA1基因表达及甲基化检测被引量：2
- 2014年
- 旨在研究促红细胞生成素产生肝细胞受体A1(EphA1)在某些哺乳动物胚胎发育期的细胞间侵入和黏附活动中发挥一定作用以及EphA1基因甲基化对胚胎附植期其表达的影响。本研究以梅山猪为研究对象,采用实时荧光定量PCR、Western blot和亚硫酸氢盐测序法,分析了EphA1基因的mRNA表达、蛋白表达和CpG岛甲基化。结果表明,在梅山猪胚胎附植前期(13d)、中期(18d)、后期(24d)的子宫内膜附植点,EphA1的mRNA表达趋势为先升高后降低(P<0.05),蛋白表达趋势为逐渐降低,且妊娠猪的表达量均显著高于空怀猪(P<0.05)。附植前期的EphA1甲基化程度最高,中期的次之,后期的最小,即EphA1甲基化趋势与蛋白表达趋势一致。综上表明,EphA1的CpG岛甲基化很可能影响了基因的表达,进一步影响了猪胚胎附植的调控。
- 付言峰李兰周艳红李碧侠赵为民赵芳任守文
- 关键词：甲基化表观遗传学胚胎附植
- 猪胚胎附植期Eph B6和FTO基因的表达规律研究
- (目的)猪产仔数是一个重要的育种性状和经济性状,提高产仔数的关键是提高胚胎成活率。因为影响胚胎成活率的重要时期有3个,而3个重要时期中有2个发生于猪的胚胎附植期(妊娠13-24 d),所以如何减少猪胚胎附植期的胚胎死亡便...
- 付言峰李兰赵为民周李生李碧侠方晓敏王学敏任守文
- 关键词：胚胎附植FTO
- 文献传递
- 一种纯化猪流行性腹泻病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒或禽流感病毒的方法
- 本发明提供一种纯化猪流行性腹泻病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒或禽流感病毒的方法，涉及生物领域。该纯化方法，包括采用融合蛋白PGFSN与GEM颗粒形成的复合物结合猪流行性腹泻病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒或禽流感病毒的步骤，所...
- 李兰郑其升乔绪稳陈瑾杨丽张元鹏侯立婷侯继波
- 文献传递
- 转录组测序分析猪胚胎附植的中期和后期卵巢差异表达基因被引量：7
- 2018年
- 胚胎附植是影响母猪产仔数的一个重要因素,本研究旨在找到猪胚胎附植的关键调控基因。选用5~7胎次梅山猪母猪4头,在其妊娠第18和24天分别屠宰2头,采集其卵巢组织进行转录组测序(RNA-seq)分析,GO功能富集分析及Pathway分析。结果表明:1)猪胚胎附植中期卵巢(卵_18d)和后期卵巢(卵_24d)两个组织样检测到的表达基因中最多的序列(reads)均为外显子序列;卵_18d测得reads最多的染色体依次为6、14、1和7号,卵_24d依次为1、7、14和M号;卵_24d相较于卵_18d有更多的基因表达,且表达量更高;两个时期卵巢组织中表达量前50位的基因中,线粒体基因占60%以上。2)卵_24d相较于卵_18d,有581个基因上调和103个基因下调,其中二者之间表达差异最大的基因为EN19684,位于线粒体中;表达差异最大的染色体基因为EN11278,位于14号染色体中。3)差异表达基因显著富集于内皮细胞活化等38个生物学过程,宿主细胞质等19个细胞学分区和FAD-AMP裂解酶活性等16个分子功能;差异表达基因在185条生物通路上存在差异,其中前3位极显著差异的生物通路依次为PI3K-Akt信号通路、Hippo信号通路和昼夜周期。综上表明,在卵巢组织表达的基因,重点参与了胚胎附植后期的调控,且高表达量基因多集中在细胞线粒体中,差异表达基因功能以内皮细胞活化为主,生物通路以PI3K-Akt信号通路为主。
- 付言峰李兰赵为民方晓敏李碧侠王学敏周李生任守文
- 关键词：胚胎附植转录组测序基因
- 阿莫西林与硫酸粘菌素联合抗菌活性的研究被引量：6
- 2010年
- 李兰何家康汤树生谢仕锦张朝明郭召绪肖希龙
- 关键词：抗菌活性阿莫西林抗感染药物粘菌继发感染畜禽疾病
- 苏钟猪FTO基因的mRNA表达、克隆测序及其生物信息学分析被引量：13
- 2013年
- 脂肪肥胖相关基因(FTO)在控制食欲和能量消耗方面具有重要作用。为进一步了解猪FTO基因的结构和功能,以苏钟猪为试验对象,利用RT-PCR方法,分析该基因在苏钟猪5种不同组织(肺脏、肝脏、心脏、背膘和背最长肌)RNA水平的表达谱信息;对苏钟猪FTO基因的编码序列(CDS)进行了克隆测序,并用生物信息学方法分析了苏钟猪FTO蛋白的结构和不同物种间的同源性。结果表明,FTO基因在苏钟猪各组织中的mRNA表达丰度表现为:背膘>心脏>肺脏>肝脏>背最长肌,其中背膘中的表达量显著高于其他组织(P<0.05)。苏钟猪FTO的CDS区发现了8个SNPs,分别为G52A、C523T、G628A、A655G、A810G、A886G、G1002A和A1344G。苏钟猪FTO基因编码一个含505个氨基酸的蛋白,理论等电点为5.23,具有亲水性,不存在信号肽,是非分泌型蛋白,与牛、绵羊、狗等物种的亲缘关系最近。FTO的mRNA表达对苏钟猪的皮下脂肪、心脏、肌肉等组织的脂肪沉积有一定影响,其编码序列中丰富的SNPs可成为苏钟猪肉质改良育种中的重要分子标记。
- 付言峰李兰王学敏李碧侠方晓敏赵芳任守文
- 关键词：苏钟猪克隆测序生物信息学
- 梅山猪胚胎附植期EphB2的组织表达及RNA-seq分析被引量：4
- 2014年
- 猪产仔数是一个重要的经济和繁殖性状,而胚胎附植是影响猪产仔数的重要因素。为了研究促红细胞生成素产生肝细胞受体B2(Eph B2)对猪胚胎附植过程中子宫内膜迁移和粘附活动的影响,文章以太湖流域梅山猪为研究对象,利用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)方法,检测Eph B2基因在梅山猪胚胎附植前、中、后期子宫内膜附植点/非附植点和卵巢组织的m RNA和蛋白表达谱,并用转录组测序(RNA-seq)方法分析了不同附植时期子宫内膜附植点和卵巢组织的差异表达基因。q RT-PCR和Western blot结果表明,Eph B2在胚胎附植前、中、后期子宫内膜附植点和非附植点的m RNA和蛋白均呈现先升高后降低的表达趋势,且附植中期的表达量显著高于前期和后期(P<0.01);Eph B2在附植前、中、后期卵巢中的m RNA和蛋白表达趋势则相反,为先降低后升高,且不同时期间表达差异显著(P<0.05)。RNA-seq结果表明,Eph B2在子宫内膜附植点的m RNA表达,附植中期极显著高于附植前期(P<0.01);Eph B2在卵巢的m RNA表达,附植中期显著高于附植后期(P<0.05)。综上所述,Eph B2很可能在猪胚胎附植过程中发挥着重要的调控作用,为潜在的猪产仔数性状候选基因。
- 付言峰周艳红王爱国李兰刘红林李碧侠任守文
- 关键词：EPHB2胚胎附植转录组测序梅山猪
