李慧勇
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 供职机构：江苏大学临床医学院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- hVEGFA基因重组腺病毒载体的构建及其转染效率的研究被引量：1
- 2010年
- 目的:应用AdEasy复制缺陷型腺病毒载体系统构建携带hVEGFA基因的重组腺病毒载体。方法:采用分子克隆技术,从PCR2.1-hVEGFA质粒中克隆出hVEGFA基因的编码序列,酶切、连接后,插入腺病毒系统中的穿梭载体pAdTrack-CMV,获得重组质粒pAdTrack-CMV-hVEGFA,将其转化含有腺病毒骨架载体pAdeasy-1的大肠埃希菌BJ5183,进行同源重组,获得重组子pAdeasy-1-hVEGFA。鉴定后,将pAdeasy-1-hVEGFA转染人胚肾细胞(HEK293A细胞),获得含hVEGFA基因的重组腺病毒(rAd-hVEGFA)。反复感染HEK293A细胞扩增腺病毒,50%组织培养感染量法(TCID50)检测病毒滴度,荧光显微镜观测绿色荧光蛋白(GFP)的表达。结果:成功构建出含有hVEGFA基因的腺病毒载体rAd-hVEGFA,转染HEK293A细胞后出现绿色荧光蛋白表达,证明腺病毒载体rAd-hVEGFA转染成功,通过反复感染HEK293A细胞获得大量病毒。结论:成功构建含有hVEGFA基因的腺病毒载体rAd-hVEGFA,可为缺血性脑血管疾病的基因治疗提供基因载体。
- 李慧勇袁志诚陈波陆培松李巧玉曹侃
- 关键词：腺病毒载体转染缺血性脑血管疾病
- VEGF编码基因转染干细胞与缺血性脑血管疾病相关研究
- 2009年
- 缺血性脑血管疾病的干细胞治疗已成热点。VEGF能诱导血管生成、增加血管通透性及维持血管功能,广泛应用缺血性疾病的治疗研究。然而VEGF难以在移植局部维持足够的浓度,寻找一种能够在移植局部持续高表达VEGF的方法是促进VEGF临床应用的关键。将VEGF编码基因转染干细胞进行基因修饰是获得血液循环重建最具发展潜力的治疗模式。本文从VEGF的生物特性及调节因素出发,比较干细胞载体的特点及不同的转染方法,展望其在缺血性脑血管疾病临床应用的前景。
- 李慧勇袁志诚陈波
- 关键词：血管内皮生长因子基因转染干细胞缺血性脑血管疾病
- 高压氧联合替莫唑胺对胶质瘤U251细胞的影响被引量：2
- 2012年
- 目的研究高压氧(Hyperbaric Oxygen,HBO)联合替莫唑胺(Temozolomide)对人神经胶质瘤U251细胞株的的影响及其机制。方法实验分为4组:A组高压氧联合替莫唑胺组、B组高压氧组、C组替莫唑胺组、D组对照组。通过体外模拟缺氧微环境,用四甲基偶氮唑蓝法(MTT法)、碘化丙啶(PI)染色法、流式细胞仪分别检测细胞生长抑制率、细胞死亡率、细胞凋亡率。Elisa法检测缺氧诱导因子1-α(HIF1-α)和多药耐药相关蛋白-1(MRP-1)的表达情况。结果 1高压氧联合替莫唑胺组在细胞生长抑制率、细胞死亡率和细胞凋亡率上明显高于其他组,数值均有统计学意义(P<0.05)。2高压氧联合替莫唑胺组与高压氧组在HIF1-α和MRP-1上无统计学意义(P>0.05),与其他组有统计学意义(P<0.05)。结论高压氧够增强替莫唑胺化疗效果,高压氧纠正了肿瘤的缺氧环境,下调了HIF1-α和MRP-1的表达,这可能是治疗作用的关键所在。
- 曹侃袁志诚陆新宇李慧勇
- 关键词：高压氧替莫唑胺胶质瘤U251
