李旭妮
- 作品数：75 被引量：140H指数：7
- 供职机构：中国兽医药品监察所更多>>
- 发文基金：公益性行业(农业)科研专项北京市科技新星计划北京市农业科技项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 大肠杆菌表达腐败梭菌α毒素及其产物的生物学特性鉴定
- 2018年
- 为了制备大肠杆菌源的重组腐败梭菌α毒素并对其生物学特性鉴定。利用PCR扩增α毒素基因,构建重组表达质粒pET32a-csa,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,对产物的反应原性、溶血活性、细胞毒性、小鼠致死毒性、毒力和毒性中和等生物学特性鉴定。结果显示,重组α毒素主要表达形式为包涵体,产物能够与腐败梭菌抗毒素血清反应,不能使绵羊红细胞发生溶血,具有细胞毒性和小鼠致死毒性,毒力超过300 MLD/mL,而且这种毒性可以被抗毒素中和。结果表明,通过大肠杆菌原核表达可以制备具有一定生物活性的重组腐败梭菌α毒素。
- 彭国瑞彭小兵李旭妮董令赢蒋玉文
- 关键词：大肠杆菌腐败梭菌Α毒素生物活性
- 一种无毒性破伤风毒素和产气荚膜梭菌β毒素重组融合蛋白
- 本发明涉及一种无毒性破伤风毒素和产气荚膜梭菌β毒素重组融合蛋白。本发明系采用经过密码子优化、破伤风梭菌毒素C片段与含有多个氨基酸突变的产气荚膜梭菌β毒素突变体的重组融合蛋白，即最大限度地保留两种毒素蛋白的免疫原性，又避免...
- 杜吉革刘莹王磊陈小云李旭妮李启红朱真薛麒张莹辉姚文生印春生
- 文献传递
- 布氏菌病活疫苗活菌计数项目能力验证结果分析被引量：5
- 2016年
- 为了解全国布氏菌病活疫苗生产企业活菌计数能力,2015年对该项目进行了能力验证分析,每名参比企业发放布氏菌活疫苗(S2株)样品3份,要求在规定时间内对其进行活菌计数并提交结果报告。结果显示,参比的17家企业中,15家结果"满意",2家企业结果"不满意",表明全国大部分布氏菌病活疫苗生产企业具备可信任的布氏菌病活疫苗活菌计数检测能力。
- 王楠李旭妮于晓辉徐磊张媛刘博李建毛开荣蒋玉文
- 关键词：活菌计数
- 一种猪繁殖与呼吸综合征病毒检测试剂盒及其应用
- 本发明公开了一种猪繁殖与呼吸综合征病毒检测试剂盒及其应用。本发明提供的试剂盒，包括三对引物，即与猪繁殖与呼吸综合征病毒Gen Bank Accession NumberU87392中MN基因结合的内侧引物对、外侧引物对和...
- 吴文学张跃伟李旭妮李佳禾
- 文献传递
- 安徽省白羽肉鸡中副鸡禽杆菌的分离鉴定及流行病学分析
- 2020年
- 通过病原分离对安徽省多家白羽肉鸡养殖场持续出现疑似鸡传染性鼻炎的鸡群进行确诊,从不同批次发生鸡传染性鼻炎疑似症状的鸡体内分离细菌,经细菌分离、纯化、回鸡试验,共分离到8株细菌,经形态及培养特性、生化试验、血清学特性、16S rRNA基因序列分析等方法对分离的细菌进行鉴定。结果表明,所分离的细菌有1株为A型副鸡禽杆菌,7株为B型副鸡禽杆菌,在安徽省持续引起幼龄肉鸡发生鸡传染性鼻炎的流行中B型副鸡禽杆菌是主要流行毒株。
- 王秀丽于永于雷辛凌翔张媛李俊平李旭妮
- 关键词：副鸡禽杆菌传染性鼻炎
- 表达O型口蹄疫病毒VP1基因的重组布鲁氏菌及其疫苗的生产方法
- 本发明涉及表达O型口蹄疫病毒(FMDV)VP1基因的重组布鲁氏菌及其疫苗的生产方法。该重组菌株通过在布鲁氏菌S2株菌基因组中稳定地整合进O型FMDV缅甸株(Mya)的VP1基因，并同时破坏了光滑型布鲁氏菌细胞壁LPS结构...
- 丁家波支海兵彭小兵王楠李旭妮戴志红
- 文献传递
- 稳健统计方法及t检验法在活菌计数能力比对中的应用被引量：3
- 2013年
- 为比较检验员活菌计数能力及常量法和微量法在活菌计数应用中是否存在差异,8名检验员于同时、同环境中对同一细菌培养物采用常量法和微量法进行活菌计数,采用稳健统计方法对不同人员相同方法的计数结果进行统计,将检验结果分为"满意"、"可疑"和"不满意";采用t检验法对使用不同方法对同一样品的计数结果进行统计,将结果分为"差异显著"和"差异不显著"。稳健统计方法表明,用常量法进行检测,有6名检验员的检验结果全部满意,而微量法的结果中只有2名检验员获得了全部满意的结果;t检验法表明常量法和微量法之间存在显著差异。稳健统计方法及t检验法统计结果显示,不能用微量法代替常量法进行检验,个别检验员的活菌计数能力有待进一步提高。
- 张媛张磊李建丁家波李旭妮刘轶秋王楠徐磊
- 关键词：活菌计数
- 牛巴氏杆菌病多重PCR检测技术的建立与应用被引量：3
- 2022年
- 【背景】牛巴氏杆菌病是由血清型(A、B、E)多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)引起的一种严重危害养牛业的重要传染病,病原学聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)方法是诊断并防控该病的有效手段。【目的】建立检测血清型(A、B、E)多杀性巴氏杆菌的多重PCR方法,为临床诊断牛巴氏杆菌病和病原分型提供技术支撑。【方法】参考多杀性巴氏杆菌hyaD-hyaC基因、bcbD基因和ecbJ基因特异区域,设计3对特异性引物,以温度梯度PCR法确定适宜退火温度(Tm);采用棋盘试验优化引物浓度并初步建立多重PCR方法;采用重组质粒标准品及阳性菌株菌液确定其敏感性(最小检测量);以8种常见牛感染病原体[溶血性曼氏杆菌(Mannheimia hemolytica)C1655、大肠埃希氏菌(Escherichia coli)C237、产单核细胞李氏杆菌(Listeria monocytogenes)C1597、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)C3053、都柏林沙门氏菌(Salmonella dublin)C79351、副结核分枝杆菌(Mycobacterium paratuberculosis)C1625、牛传染性鼻气管炎病毒(bovine infectious rhinotracheitis virus)CAV1546和牛支原体分离株(Mycoplasma bovis)C65-1]核酸样本确定其特异性;制备3批诊断试剂,对敏感性和特异性样品进行批间和批内试验,确定其重复性;运用建立的方法使用3种不同型号的PCR仪检测敏感性和特异性样品,确定其适用性;通过检测临床样本及人工模拟感染样本评价临床应用效果。【结果】在Tm为55°C时,3对引物浓度分别为0.25、0.30和0.20μmol/L条件下建立多重PCR方法较优,可以同时检测多杀性巴氏杆菌血清A型(821 bp)、血清B型(203 bp)和血清E型(363 bp);该方法敏感性高,对重组质粒标准品pMD-A、pMD-B和pMD-E检测限分别为43.080、3.710和4.350 copies/μL,对阳性菌液最低检出限均为102 CFU细菌;其特异性强,仅对血清型(A、B、E)多杀性巴氏杆菌有特异性扩增条带,同时对其他病原体均无扩增条带;该方�
- 王豪杰辛凌翔任小侠刘燕姚文生侯雪霞李旭妮朱良全
- 关键词：牛巴氏杆菌病多杀性巴氏杆菌血清型多重PCR
- 鸭疫里默氏菌临床菌株的分离鉴定和环介导等温扩增检测方法的建立与效果评价
- 李旭妮
- 关键词：鸭疫里默氏杆菌鸭传染性浆膜炎
- 一种无毒性破伤风毒素和产气荚膜梭菌β毒素重组融合蛋白
- 本发明涉及一种无毒性破伤风毒素和产气荚膜梭菌β毒素重组融合蛋白。本发明系采用经过密码子优化、破伤风梭菌毒素C片段与含有多个氨基酸突变的产气荚膜梭菌β毒素突变体的重组融合蛋白，即最大限度地保留两种毒素蛋白的免疫原性，又避免...
- 杜吉革刘莹王磊陈小云李旭妮李启红朱真薛麒张莹辉姚文生印春生
- 文献传递
