李霆
- 作品数:4 被引量:31H指数:2
- 供职机构:军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金北京市自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 应用体内诱导抗原技术筛选结核分枝杆菌体内表达基因被引量:17
- 2005年
- 为寻找新型抗结核药物靶标 ,采用体内诱导抗原技术筛选结核分枝杆菌的体内诱导基因。首先构建了结核分枝杆菌基因组质粒表达文库 ,库容量为 1 0 2× 1 0 5CFU。再用经过结核分枝杆菌和大肠杆菌的裂解产物吸附过的结核病人血清 ,通过原位免疫印迹来筛选基因组表达文库 ,共获得 1 6个阳性克隆。对阳性克隆进行测序和生物信息学分析 ,发现该 1 6个阳性克隆可能包含 2 2个开放阅读框 (ORF)。按照功能将其分为 7类基因 :脂类代谢 2个、信号途径 5个、PE/PPE蛋白家族 2个、中间产物与能量代谢 6个、细胞壁与细胞处理 1个、假想蛋白 4个和与牛型分枝杆菌定向进化同源的 2个 ,其中部分基因可能与毒力相关 。
- 李霆高志勇王恒冯尔玲陈宗德李新月黄留玉黄翠芬
- 关键词:结核分枝杆菌药物靶标毒力
- 一种同时提取细胞总RNA和总蛋白的方法被引量:11
- 2005年
- 应用TRIzol法分步提取总RNA和总蛋白,提取的总RNA亮度强、完整,提取的总蛋白与经常规RIPA裂解液提取的全蛋白的质量相当。验证了从同一批次处理的细胞中同时提取总RNA和总蛋白进行检测分析是可行的,而且确保了实验条件的一致性,缩短了实验周期。
- 董华王军军应天翼李霆王恒樑许彩民
- 关键词:TRIZOL法总RNA总蛋白
- 炭疽芽孢在巨噬细胞RAW264.7内的萌发过程被引量:1
- 2005年
- 目的:确定炭疽杆菌A16R芽孢在巨噬细胞系RAW264.7 内萌发的过程. 方法:用炭疽杆菌A16R芽孢以MOI 20:1感染RAW264.7,分别于吞噬后1、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、5.5、6、6.5、7、7.5、8 h取细胞爬片进行复红美蓝染色,显微镜观察. 结果:吞噬后2-2.5 h,细胞内的芽孢开始萌发并形成繁殖体;吞噬后3.5-4 h,繁殖体开始二分裂;吞噬后5-5.5 h, 繁殖体进入指数增长阶段;吞噬后7-8 h,大量的繁殖体充斥于细胞内、外,细胞开始崩解. 结论:首次采用复红美蓝染色确定了A16R炭疽芽孢在巨噬细胞RAW264.7内的萌发过程.
- 李霆王恒樑史兆兴冯尔玲刘润艳黄留玉
- 关键词:炭疽芽孢萌发美蓝染色巨噬细胞系繁殖体微镜观察
- DNA微阵列技术在细菌感染后宿主反应研究中的应用被引量:2
- 2005年
- 感染性疾病是病原微生物和宿主紧密相互作用的结果。深入理解宿主对病原微生物感染发生反应的分子基础是预防感染性疾病发生和组织损伤的必要条件。本文通过介绍体内、体外2种感染模型中宿主对细胞内和细胞外致病菌感染后的基因表达谱变化,简述了DNA微阵列技术在病原菌-宿主相互作用中宿主反应研究中的应用。
- 李霆王恒樑黄留玉黄翠芬
- 关键词:DNA微阵列病原菌宿主反应