王剑青 作品数:17 被引量:45 H指数:4 供职机构: 贵阳医学院附属医院 更多>> 发文基金: 贵州省科技计划项目 广东省自然科学基金 广州市科技计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
低氧对人白血病细胞株HL-60细胞增殖及HIF-1α表达的影响 被引量:2 2011年 探讨模拟低氧环境对人白血病细胞株HL-60细胞增殖及低氧诱导因子表达的影响。方法 常规方法复苏、传代培养细胞,待细胞进入对数生长期后用于实验。将细胞分为低氧处理组和常氧对照组,常氧对照组采取常规培养,低氧处理组分别用50、200、400、800 μmol/L二氯化钴(CoC1 2 )处理,并于24、48、72 h收集细胞进行以下指标检测:①倒置相差显微镜观察细胞形态变化;②MTT比色法检测细胞增殖抑制率;③实时荧光定量PCR检测HIF-1α在转录水平的表达。结果 1:低氧模拟环境下,细胞在形态上呈较明显变化,并随CoCl 2 浓度和处理时间的延长变化显著;2:MTT实验结果显示,与常氧对照组比较,CoCl 2 处理组均产生明显抑制作用,抑制率随着药物浓度增加而增大;3:实时荧光定量PCR结果表明,与对照组(24 h)相比,50 μmol/L CoCl 2 和200 μmol/L CoCl 2 低浓度处理组HIF-1α mRNA的表达均有上调,且上调呈剂量和时间依赖关系;结论 1:CoCl 2 模拟低氧后,细胞生长明显受抑;2:低浓度(50~200 μmol/L)CoCl 2 组HIF-1α mRNA表达上调并呈现时间、浓度依赖性;3:本研究涉及的低氧模拟环境对HL-60细胞未引起明显的诱导分化现象。 张亚莉 徐琳 邱健 李志樑 王剑青 李锐 刘会 朱红敏关键词:低氧诱导因子 HL-60细胞 白血病 氯化钴 S100A8基因在肺纤维化大鼠模型肺组织中的表达 被引量:1 2012年 目的探讨S100A8基因在肺纤维化大鼠模型肺组织中的表达。方法SD大鼠20只,随机分为正常对照组和肺纤维化模型组,模型组气管内注射博莱霉素5mg/kg诱导肺纤维化,对照组气管内注射等量生理盐水。28d后处死两组大鼠,HE染色观察肺纤维化情况,RT-PCR检查两组S100A8 mRNA的表达情况。结果与对照组相比,S100A8 mRNA在肺纤维化大鼠肺组织中表达增强。结论S100A8 mRNA在肺纤维化大鼠模型肺组织中表达增强,提示S100A8可能参与肺纤维化的病理过程。 王剑青 王锦支 张亚莉 李红梅关键词:肺纤维化 S100A8 去甲斑蝥素对环磷酰胺诱导的白细胞减少症模型大鼠骨髓造血功能的影响 被引量:11 2015年 目的:探讨去甲斑蝥素(NCTD)对环磷酰胺(CTX)诱导的白细胞减少症模型大鼠骨髓造血的影响及机制。方法:采用CTX腹腔注射法复制白细胞减少症模型,以NCTD干预模型大鼠,全自动血细胞分析仪检测外周血白细胞(WBC)数量,骨髓组织作切片HE染色观察病理改变,流式细胞术检测骨髓细胞增殖周期、凋亡率,免疫组织化学法检测骨髓组织中凋亡相关蛋白BCL-2、BAX的表达。结果:NCTD干预白细胞减少症模型后,外周血WBC显著升高;模型大鼠骨髓骨髓组织结构破坏,造血细胞明显减少,NCTD干预后促进骨髓组织细胞结构显著恢复;NCTD可促使白细胞减少症模型大鼠骨髓细胞增殖及周期的转化,显著抑制CTX所诱导的骨髓细胞凋亡与坏死,上调抑凋亡蛋白BCL-2表达,下调促凋亡蛋白BAX的表达。结论:NCTD可刺激CTX诱导的白细胞减少症模型大鼠骨髓造血,促进外周血白细胞水平的恢复,其机制可能与NCTD调控骨髓细胞周期、抑制细胞凋亡等有关。 郑丹 沙启明 王剑青 刘正美 万秀方 王国川 张亚莉 杨国珍关键词:去甲斑蝥素 环磷酰胺 白细胞减少症 造血 葡萄糖激酶基因微卫星DNA多态性与2型糖尿病的相关性研究 被引量:1 2006年 目的探讨葡萄糖激酶(Glucokinase,GCK)基因微卫星DNA多态性与2型糖尿病的相关性。方法采用扩增片段长度多态性(The amplified of fragment-length polymorphism,Amp-FLP)分析法,选取贵阳本地62例2型糖尿病患者和69例正常对照组,以GCK基因3′端重复序列两端序列设计引物进行扩增,经丙烯酰胺凝胶电泳及扩增片段测序分析,鉴定片段型(基因型)。用卡方检验来检测两组间GCK等位基因及基因型频率差异显著性。结果在所有样本中,鉴定出3种等位基因片段:A型195bp、B型197bp、C型199bp。糖尿病组和对照组上述3种等位基因频率分别为:54%/42%、23%/36%、23%/22%;组成的6种基因型即:AA、BB、CC、AB、AC、BC型,其基因型频率分别为:34%/23%、10%/22%、24%/16%、16%/22%、5%/10%、11%/7%。2组间等位基因频率和基因型频率比较,B型等位基因频率有显著差异(P<0.05),其余等位基因频率、基因型频率差异均无显著意义(P>0.05)。结论葡萄糖激酶基因微卫星标记与2型糖尿病相关;等位基因B与2型糖尿病的低发生相关,在本地人群中可能是一种保护性标记。 张亚莉 王剑青 陶建蜀关键词:葡萄糖激酶基因 2型糖尿病 贵阳市烟厂职工健康体检血脂检测结果分析 被引量:1 2007年 王锦支 王剑青 简小俊关键词:血脂水平 健康体检 烟厂 脂代谢异常 肝胆疾病血清TBA、ALT、AST测定的对比分析 2003年 采用牙培 2 0 0 0全自动生化分析仪及其原装配套试剂盒 ,对肝胆疾病的重要生化指标总胆汁酸TBA及传统的肝功能指标谷丙转氨酶 (ALT)、谷草转氨酶 (AST)进行测定 ,对结果进行对比分析表明 ,在肝细胞病变和胆管疾病时 ,TBA显著升高 (P <0 0 1) ;TBA在肝胆疾病的实验诊断指标中 ,特异性和灵敏度明显优于其它两项指标 ,TBA阳性率在肝癌、肝硬化、急性肝炎、慢性迁延性肝炎、阻塞性黄疸五组中分别为 10 0 %、88%、10 0 %、86 %、71%均高于传统指标 ,在胆管疾病组中与ALT相同 ,为 10 0 % ,但也高于其它指标。因此 ,TBA的测定可作为常规肝功能检测项目 ,用于诊断各种肝病及胆管疾病。 王剑青关键词:阻塞性黄疸 急性肝炎 雷帕霉素对白血病SUP-B15细胞株HIF-1α、VEGF表达的影响 2012年 目的:观察雷帕霉素对人急性淋巴细胞白血病SUP-B15细胞的生长及HIF-1α、VEGF表达的影响。方法:实验分为雷帕霉素处理组和对照组,雷帕霉素处理组以含不同终浓度雷帕霉素(10 nmol/L、20 nmol/L、50 nmol/L、100 nmol/L)的IMDM培养处理,对照组以相同体积细胞IMDM培养液培养,并于处理后24 h、48 h、72 h观察各组细胞形态,实时荧光定量PCR检测HIF-1α及VEGF mRNA的表达。结果:雷帕霉素处理后SUP-B15活细胞数量减少,死细胞数量增加,可见细胞抱团生长、胞膜出泡、细胞破碎等现象,随药物浓度升高和作用时间增加变化程度明显。瑞氏染色观察可见,雷帕霉素处理组早期无明显变化,处理后期(72 h)细胞出现明显空泡样改变,并呈浓度依赖关系;雷帕霉素处理组细胞HIF-1αmRNA的表达在24 h变化不明显;48 h时,10 nmol/L、100 nmol/L雷帕霉素处理细胞HIF-1αmRNA的表达上调,20 nmol/L、50 nmol/L雷帕霉素处理细胞HIF-1α表达下调;72 h时,各浓度的雷帕霉素对HIF-1αmRNA的表达均呈上调趋势;在雷帕霉素处理后,除较低浓度(10 nmol/L、20 nmol/L)雷帕霉素处理72 h外,SUP-B15细胞的VEGF mRNA表达均呈显著下调。结论:雷帕霉素可抑制SUP-B15细胞生长,导致形态明显改变,并能下调SUP-B15细胞VEGF mRNA的表达。 张亚莉 陈涛 李美 王剑青 张建英关键词:雷帕霉素 低氧诱导因子-1Α 雷帕霉素对低氧下人HL-60细胞增殖和凋亡的影响 被引量:3 2012年 本研究拟通过小分子化合物氯化钴(CoCl_2)模拟的低氧环境,探讨雷帕霉素(RPM)对该低氧下人急性髓细胞白血病HL-60细胞的生物学行为的影响。低氧模拟组、低氧雷帕霉素处理组、常氧雷帕霉素处理组HL-60细胞分别采用CoCl_2、CoCl_2/RPM、RPM进行处理,对照组为常氧下常规培养的HL_60细胞,处理及培养24 h、48 h、72 h后收集细胞,采用倒置相差显微镜观察细胞生长状况,常规瑞氏染色后光学显微镜下观察细胞形态;MTT比色法检测各组细胞的活性和增殖能力;Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术检测细胞凋亡。结果表明,与对照组细胞形态规则,胞核呈圆形或椭圆形相比,低氧模拟组和低氧雷帕霉素处理组细胞密度降低,生长明显受抑,细胞胞核呈不规则形或杆状,染色质粗糙,伴扭曲折叠等变化。各组间不同时间细胞增殖抑制率差异显著(P<0.05),低氧模拟组和低氧雷帕霉素处理组增殖抑制率随着处理时间延长而增大,且低氧雷帕霉素处理组的增殖抑制率大于低氧模拟组。与常氧下的对照组及雷帕霉素处理组比较,低氧的模拟组和雷帕霉素处理组诱导细胞发生较明显的凋亡,且后期72 h低氧雷帕霉素处理组凋亡率显著高于模拟低氧处理组。以上结果表明,模拟低氧环境下,HL_60细胞生长明显受抑制,且诱导细胞凋亡;雷帕霉素可增强对低氧对细胞的生长抑制和诱导凋亡作用。 张亚莉 朱红敏 王剑青 刘会 陶建蜀 陈涛 莫小阳关键词:雷帕霉素 HL-60细胞 低氧 凋亡 FGF21与原发性高血压的相关性初探 被引量:7 2013年 目的:探讨血清成纤维细胞生长因子21(FGF21)与原发性高血压的相关性。方法:实验分为3组,原发性高血压伴动脉粥样硬化组(n=10)、原发性高血压非动脉粥样硬化组(n=20)及健康对照组(n=30),采用酶法测定血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平,采用酶联免疫法测定血清FGF21及氧化-低密度脂蛋白(ox-LDL)水平,分析FGF21与脂代谢指标的相关性。结果:原发性高血压伴动脉粥样硬化组和原发性高血压非动脉粥样硬化组血清FGF21水平均明显高于对照组(P<0.05);线性相关分析显示血清FGF21水平与ox-LDL及TG水平均呈正相关。结论:原发性高血压患者FGF21水平升高,且FGF21水平的改变与ox-LDL及TG水平有关。 唐青蓝 李红梅 王剑青 管亚慧 雷霆雯 许庆忠关键词:成纤维细胞生长因子 脂蛋白类 LDL 高血压 动脉硬化 雷帕霉素对低氧下HL-60细胞的低氧调控信号分子表达的影响 被引量:1 2012年 目的:通过小分子化合物氯化钴(CoCl2)模拟的低氧环境,分析低氧下及其雷帕霉素(RPM)作用下人急性髓细胞白血病细胞HL-60的低氧调控信号分子表达的变化;方法:常规方法复苏、传代、培养HL-60细胞,培养细胞进入对数生长期后用于实验。低氧模拟组、低氧雷帕霉素处理组、常氧雷帕霉素处理组分别用含200μmol/L CoCl2、200μmol/L CoCl2/20nmol/L RPM、20nmol/LRPM的1640培养基处理生长状态良好的细胞,对照组细胞用1640培养基培养,各组置培养箱以37℃、5%CO2培养,并于处理后24h、48h、72h收集细胞用于检测;采用实时荧光定量PCR方法检测低氧诱导因子(HIF-1α)、内皮细胞生长因子(VEGF)、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)及GAPDH在转录水平的表达;结果:①.与各时段对照组相比,低氧模拟组HIF-1α表达随时间逐渐增加,72h明显上调;与常氧雷帕霉素处理组各时段比较,低氧雷帕霉素处理组HIF-1α表达早期(24h)相对下调,后期相对上调;②.与对照组比较,各处理组mTOR表达均下调,低氧雷帕霉素处理组在早期(24h)下调显著;与常氧雷帕霉素处理组比较,低氧雷帕霉素处理组mTOR各时段的表达均相对下调;③与对照组各时段相比,低氧模拟组VEGF的表达在早期显著上调,但后期呈下调;常氧雷帕霉素处理组各时段VEGF的表达下调,与其比较,低氧雷帕霉素处理组各时段均呈相对下调。结论:常氧和低氧下RPM作用HL-60细胞后VEGF、mTOR的mRNA均表达下调,RPM可在低氧环境下增强了这种下调表达作用。 张亚莉 朱红敏 王剑青 陈涛 陶建蜀关键词:雷帕霉素 HL-60细胞 低氧 MTOR