王辰飞
- 作品数：20 被引量：34H指数：3
- 供职机构：中国食品药品检定研究院更多>>
- 发文基金：中国食品药品检定研究院中青年发展研究基金国家科技支撑计划艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 四氯化碳诱导近交系C57BL/6小鼠建立肝纤维化模型被引量：7
- 2019年
- 目的比较不同剂量四氯化碳诱导近交系C57BL/6小鼠肝纤维化模型的效果,以建立稳定的肝纤维化模型。方法选择5周龄的C57BL/6近交系小鼠,分别腹腔注射给予高、中、低剂量的四氯化碳诱导肝纤维化,实验结束后取血及肝脏组织,检测血浆丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)的水平及肝脏病理变化。结果近交系C57BL/6小鼠药物诱导后,各剂量组动物均能存活到8周,高剂量组存活率仅为20%远低于中、低组;血清转氨酶含量升高程度、肝组织病理改变存在剂量时间效应关系。病理分析表明,各剂量组均可见肝细胞变性/坏死、中央静脉周围/汇管区混合细胞浸润及肝脏纤维化。结论10%四氯化碳给药8周后能诱导近交系C57BL/6小鼠形成较稳定的肝纤维小鼠模型,为后续肝纤维化机制研究及药物筛选工作奠定了基础。
- 刘甦苏霍桂桃王辰飞范昌发
- 关键词：四氯化碳肝纤维化
- C57-ras及rasH2转基因小鼠模型杂交1代小鼠的生物学特性及基因表达比较
- 目的 1997年以来,ICHS1B提出利用转基因动物模型评价药物潜在致癌性新框架以来,该方法获得美国FDA、欧盟、日本厚生省认可与接受。本文检测了自主建立的C57-ras转基因小鼠与BALB/c小鼠的杂交1代小鼠（简称C...
- 刘甦苏王辰飞岳秉飞柳全明范昌发
- 关键词：血液生理指标
- 遗传修饰小鼠模型基因型鉴定技术要点介绍被引量：2
- 2021年
- 近年来,随着生物医学研究及基因编辑技术的发展,出现了越来越多的动物模型。由于制作方法的不同,其基因型鉴定技术方法也不一样,导致基因型鉴定的工作存在混乱无序的现象。本文根据遗传修饰小鼠模型制作方法进行分类,介绍了随机转基因小鼠、条件性基因敲入小鼠、基因敲除小鼠三类常见模型的基因型鉴定技术要点,规范遗传修饰小鼠模型基因型鉴定方法,保证动物实验材料的准确性,从而推动动物模型在基础和应用科技领域的应用与发展。
- 刘甦苏王辰飞岳秉飞李冠名范昌发
- 关键词：遗传修饰小鼠模型基因型鉴定
- 3种小鼠品系的四氧嘧啶糖尿病模型建立及初步评价被引量：3
- 2015年
- 目的:比较不同品系小鼠糖尿病建模及模型评价效果,为合理选择药物活性分析实验动物提供方法依据。方法:选择封闭群KM、近交系BALB/c、C57BL/6J 3种小鼠,腹腔注射四氧嘧啶建模,并计算成模率和死亡率。参照建模实验结果,仅选择死亡率及成模率较接近的雄性KM和BALB/c小鼠进行糖尿病模型效果评估实验。通过灌胃已知阳性药物盐酸二甲双胍,测定实验各组生存率、体重、空腹血糖值、葡萄糖耐量、血清中胰岛素及C肽含量等指标评价模型效果。结果:KM品系建模成功率最高,雌雄分别为60%和65%,C57BL/6J最低,雌雄分别为15%和20%,BALB/c雄性为60%,但雌性小鼠全部死亡。同一品系的雌性小鼠比雄性小鼠死亡率高,雌雄KM小鼠死亡率分别为40%和20%,BALB/c小鼠分别为100%和25%,C57BL/6J小鼠分别为80%和65%。高血糖模型组及二甲双胍组小鼠均逐渐表现出多食多饮消瘦的症状,体重与正常对照组相比增长慢且差异显著。因BALB/c小鼠高血糖模型组实验期内全部死亡,所以实验末期仅测定了KM小鼠糖耐量、血清中胰岛素和C肽含量,测定的血清学数据也均符合糖尿病小鼠模型指标。KM、BALB/c小鼠0 h的血糖值离散系数的数值分别为0.17和0.20;72 h的血糖值离散系数数值分别为0.32和0.12。结论:综合比较建模成功率及建成模型的特征,雄性KM小鼠优于其他2个品系,更适合作为建模动物;但建模前后空腹血糖值的离散数值表明封闭群KM小鼠个体差异明显,数据一致性不及近交系小鼠,提示采用近交系小鼠建模具有其优势,但建模方法还需进一步优化。
- 刘甦苏吴曦周舒雅吕建军王辰飞杨艳伟彭泽旭刘佐明李保文贺争鸣范昌发
- 关键词：封闭群四氧嘧啶糖尿病模型
- 利用HRM技术区分ob糖尿病小鼠不同基因型被引量：3
- 2014年
- ob/ob小鼠是糖尿病相关研究中使用最广泛的动物模型之一,近年来,市场需求呈上升趋势。与野生型小鼠相比,其瘦素蛋白基因105号密码子发生C>T点突变,导致不能产生正常的瘦素蛋白。该模型4周前外观表型与野生型无异,而ob/ob纯合子不育,因而在繁殖建系过程中,需要通过基因型鉴定纯合、杂合和野生三种基因型。该文建立了基于高分辨率溶解曲线分析(high resolution melting analysis,HRM)的基因型鉴定方法,基因型分型结果与常规PCR加酶切方法一致,也与DNA测序结果吻合;通过该方法分型后获得纯合子小鼠外观表型、血糖浓度参数符合预期。该方法较常规方法省时、高效、节省实验成本,可用于大规模ob小鼠繁殖中的基因型鉴定。
- 刘苏周舒雅左琴王辰飞贺争鸣李保文刘佐民范昌发
- 关键词：基因型鉴定HRM
- 自建Tg.C57-ras V1.0小鼠模型与日本Tg.ras H2小鼠遗传学及其杂交1代生物学特性比较被引量：1
- 2021年
- 目的比较自主建立的Tg.C57-ras小鼠与日本Tg.ras H2小鼠模型的遗传学及Tg.C57-ras转基因小鼠与BALB/c小鼠的杂交1代小鼠(简称CB6F1-NIFDC)与日本Tg.ras H2转基因小鼠模型杂交1代小鼠(简称CB6F1-CIEA)的生物学特性,为国内药物安全评价机构提供致癌性模型的多元化选择。方法对两种模型的遗传学及生物学特性进行比较,包括模型构建方法、转录水平、蛋白水平、生长曲线、血液生理数据等。结果遗传学特性:两种模型均采用转基因方法构建,转入c-Ha-ras基因序列无实质差异,拷贝数仅相差一个;两种模型的不同脏器在mRNA水平基因表达具有相似性;日本模型肺组织的蛋白水平稍高于自主建立模型,但无统计学差异。生物学特性:根据文献分析两种模型杂交1代的生长曲线有差异,但在致癌实验周期内两模型体质量差别不大;血液生理指标有部分差异。结论通过遗传学及生物学特性比较,自建模型可作为临床前药物致癌性评价的候选模型。
- 刘甦苏曹愿杨艳伟王辰飞王三龙范昌发
- 关键词：药物安全评价
- R26-hSCARB2小鼠生理生化指标的测定与分析
- 2021年
- 目的测定R26-hSCARB2小鼠的血液生理生化指标,分析性别和周龄对上述指标的影响。方法分别取20只4周龄和8周龄的R26-hSCARB2小鼠,雌雄各半。取静脉血后,测定22项血液生理指标和12项血液生化指标,使用统计学方法分析各指标在性别和周龄间的差异。结果检测的22项生理指标和12项生化指标中,4周龄的R26-hSCARB2小鼠雌雄之间在淋巴细胞绝对值(LYM)、中性粒细胞百分率(NEUT%)及尿素(BUN)指标上具有显著差异(P<0.05),白细胞计数(WBC)、总胆固醇(CHO)及甘油三酯(TG)指标上具有极显著差异(P<0.01)。8周龄的R26-hSCARB2小鼠雌雄之间在WBC、LYM、单核细胞百分率(MON%)、嗜碱性粒细胞百分率(BAS%)、总蛋白(TP)、磷(P)及CHO指标上具有极显著差异(P<0.01);在血小板计数(PLT)、血小板分布宽度(PDW)、中性粒细胞绝对值(NEUT)、嗜酸性粒细胞百分率(EOS%)、白蛋白(ALB)、碱性磷酸酶(ALP)、葡萄糖(GLU)及TG指标上,具有显著差异(P<0.05)。不同周龄的R26-hSCARB2小鼠在WBC、红细胞分布宽度(RDW)、PLT、LYM、单核细胞绝对值(MON)、淋巴细胞百分率(LYM%)、MON%、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、TP、ALB、ALP、BUN、肌酐(CREA)、葡萄糖(GLU)、钙(Ca)、P、CHO及TG指标上具有极显著差异(P<0.01),在血小板压积(PCT)、平均血小板体积(MPV)、NEUT及NEUT%指标上具有显著差异(P<0.05)。结论性别和周龄都会影响R26-hSCARB2小鼠的血液生理生化指标,但周龄对该小鼠的血液生理生化指标的影响更显著。本实验为R26-hSCARB2小鼠的研究应用提供了基础的数据。
- 周佳琪魏杰王洪刘甦苏光姣娜熊芮王辰飞范昌发岳秉飞
- 关键词：性别周龄生理生化
- 模式小鼠总DNA三种提取方法比较被引量：5
- 2014年
- 目的建立简便、快捷、经济的模式小鼠总DNA提取方法,以快速鉴定大批量模式小鼠基因型。方法采用苯酚抽提法、异丙醇沉淀法、鼠耳煮沸法提取同种模式小鼠总DNA,对比DNA纯度、得率、耗费时间,并比较基因型鉴定结果。结果苯酚抽提法得率最高,异丙醇沉淀法最低;而纯度则按照苯酚抽提法、异丙醇沉淀法、鼠耳煮沸法顺序递减;在耗时上鼠耳煮沸法最短。三种方法提取的DNA均可做模版用于基因型鉴定。结论鼠耳煮沸法操作简单、成本最低,快速、基因型鉴定结果可靠,可用于规模化的基因型鉴定实验中。
- 刘甦苏左琴周舒雅王辰飞贺争鸣李保文范昌发
- 关键词：基因型鉴定PCR反应
- hTIM4-EGFP小鼠血液生理生化指标测定被引量：3
- 2020年
- 目的测定自主建立的转基因小鼠hTIM4-EGFP的血液生理生化指标。方法分别测定12周龄各8只雌性和10只雄性的同窝阴性小鼠与转基因hTIM4-EGFP小鼠的22项血液生理指标和12项血液生化指标,利用统计学方法分析组间差异。结果转基因组与野生组在10项生理指标(WBC、RBC、HGB、HCT、MCH、RDW、PLT、NEUT、LYM%、NEUT%)和4项生化指标(ALT、AST、TG、P)间存在差异;转基因组在MCV、MCH、MCHC、RDW、PLT、NEUT、NEUT%、ALP、CHO指标中存在雌雄差异。对照组在RBC、HCT、MCV、LYM、NEUT、LYM%、NEUT%、AST、ALT、P指标中存在雌雄差异。结论人源化Tim4基因敲入的C57BL/6小鼠的部分血液生理生化指标与野生型存在差异,该测定为hTIM4-EGFP小鼠的研究应用提供了基础数据。
- 魏杰王洪刘甦苏贾松华熊芮王辰飞范昌发岳秉飞
- 关键词：转基因小鼠血液生理生化
- 基于Cre-LoxP系统的条件性定点敲入人源hRas基因小鼠的建立
- 目的 构建基于Cre-LoxP系统的条件性定点敲入人源hRas基因(c-Ha-ras)的小鼠,以获得hRas基因在特定组织器官条件性表达的小鼠模型,用于药物的临床前致癌性安全评价及相关机制研究.方法 首先构建hRas打靶...
- 刘甦苏吴曦周舒雅王辰飞左琴李保文范昌发
- 关键词：癌症
