罗威
- 作品数:6 被引量:20H指数:3
- 供职机构:华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金:湖北省卫生厅科研基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 新构建的含DF3启动子和白喉毒素A片段的重组表达载体对人乳腺癌细胞的特异性杀伤作用
- 2006年
- 目的研究新构建的含人乳腺癌DF3启动子和白喉毒素A片段的重组表达载体PGL3-DF3-DTA对人乳腺癌细胞的影响。方法构建重组表达载体PGL3-DF3-DTA,并用其转染DF3阳性和阴性的乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231。通过MTT法测定PGL3-DF3-DTA在体外对乳腺癌细胞生长的影响,建立裸鼠动物模型观察PGL3-DF3-DTA在体内对乳腺癌细胞的杀伤效应。结果成功构建出重组表达载体PGL3-DF3-DTA并建立了人乳腺癌裸鼠动物模型,经重组表达载体PGL3-DF3-DTA作用后的DF3阳性人乳腺癌细胞出现明显的凋亡现象,Ki-67、bcl-2基因表达水平降低,bax基因表达水平升高。结论重组表达载体PGL3-DF3-DTA能对DF3阳性的乳腺癌细胞产生特异性杀伤作用。
- 蔡明黄文广罗威潘晟殷涛
- 关键词:基因表达基因治疗人乳腺癌
- AKT2、HIF-1α在胰腺癌中的表达及其临床意义被引量:7
- 2006年
- 目的探讨胰腺癌组织中丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶2(AKT2)、HIF-1α蛋白的表达及其临床意义。方法应用免疫组化SABC法检测63例胰腺癌组织和23例胰腺良性病变组织中AKT2、HIF-1α蛋白的表达,分析其与胰腺癌临床病理因素的关系。结果AKT2、HIF-1α蛋白在胰腺癌组织中的阳性表达率分别为39.7%(25/63)、63.5%(40/63),明显高于胰腺良性病变组的13%(3/23)、17.4%(4/23)(P<0.05)。AKT2表达与HIF-1α表达呈正相关(P<0.05)。AKT2表达与组织学分级、淋巴结转移、TNM分期有关(P<0.05),而与患者的性别、年龄、胰腺癌大小无关(P>0.05)。结论AKT2和HIF-1α在胰腺癌组织中表达增高,AKT2可能通过调节HIF-1α表达来影响胰腺癌的发生、发展、转移。
- 杨鹏王春友牛彦锋万赤丹魏海燕徐建波罗威杨明
- 关键词:胰腺癌缺氧诱导因子1Α免疫组织化学
- DF3调控下的白喉毒素A片段对人乳腺癌细胞的特异性杀伤作用被引量:1
- 2006年
- 目的:研究新构建的含人乳腺癌DF3启动子和白喉毒素A片段的重组表达载体PGL3-DF3-DTA对人乳腺癌细胞的影响。方法:构建重组表达载体PGL3-DF3-DTA,并用其转染DF3阴性和阳性的乳腺癌细胞。采用RT-PCR法检测DTA在乳腺癌细胞中的表达,通过MTT法测定PGL3-DF3-DTA在体外对乳腺癌细胞生长的影响。建立裸鼠动物模型观察PGL3-DF3-DTA在体内对乳腺癌细胞的杀伤效应。结果:重组表达载体PGL3-DF3-DTA在DF3阳性的乳腺癌细胞中高表达,并在体内外均能发挥特异性杀伤作用。结论:重组表达载体PGL3-DF3-DTA能对DF3阳性的乳腺癌细胞产生特异性杀伤作用。
- 蔡明黄文广罗威潘晟殷涛
- 关键词:基因表达基因治疗乳腺癌
- 靶向DF3的白喉毒素A链基因对乳腺癌细胞的杀伤作用被引量:4
- 2007年
- 目的探讨白喉毒素A链(DTA)基因在DF3/MUC1启动子调控下的杀伤作用。方法构建含人乳腺癌DF3启动子和白喉毒素A链基因的表达载体pGL3-DF3-DTA,转染DF3阳性的乳癌细胞MCF-7,逆转录-聚合酶链反应(RT—PCR)检测DTA基因的表达;噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞生长活性;免疫组织化学法和流式细胞术检测细胞凋亡。结果酶切和测序表明获得了与预期结果相一致的pGL3-DF3-DTA真核表达载体。转染MCF-7细胞后,RT—PCR检测到了249bp的DTA mRNA片段。与对照组比较,转染pGL3-DF3-DTA的MCF-7细胞生长受到了抑制,流式细胞术检测到的凋亡率达39.43%,而对照组仅有0.28%。结论pGL3-DF3-DTA可对DF3阳性的乳癌细胞产生特异性的杀伤,对乳腺癌的基因治疗有潜在的应用价值。
- 黄文广罗威黄汉菊
- 关键词:乳腺肿瘤基因治疗白喉毒素
- AKT2在胰腺癌组织中的表达及意义被引量:2
- 2006年
- 目的探讨胰腺癌组织中蛋白激酶B(AKT)2的表达及其在胰腺癌发生、发展中的作用。方法采用免疫组化SABC法检测63例胰腺癌组织和23例胰腺良性病变组织中AKT 2的表达,分析其与胰腺癌临床病理因素的关系。结果AKT 2在胰腺癌组织中的阳性表达率为39.7%(25/63),明显高于胰腺良性病变组织的13%(3/23),P<0.05。AKT 2表达与胰腺癌组织学分级、淋巴结转移、TNM分期有关(P<0.05)。结论AKT 2在胰腺癌组织中表达增高,可能在胰腺癌发生、发展、转移中起重要作用。
- 杨鹏王春友牛彦锋徐建波罗威
- 关键词:胰腺肿瘤蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶
- 含人乳癌DF3/MUC1启动子转录调控序列和白喉毒素A链基因表达载体的构建被引量:7
- 2005年
- 目的:构建含人乳癌DF3/MUC1启动子转录调控序列和白喉毒素A链(DTA)基因的重组表达载体。方法:利用PCR技术从人乳癌细胞MCF7中扩增出DF3/MUC1启动子的转录调控序列并克隆入pMD18T载体中,再从pMD18T-DF3重组质粒中切下DF3/MUC1启动子的转录调控序列并亚克隆入pGL3Basic载体,构建重组质粒pGL3-DF3。从质粒pIBI30DTA中切下DTA片断,以DTA基因替换重组质粒pGL3-DF3中的虫荧光素酶基因,构建重组质粒pGL3DF3DTA。结果:构建了含人乳癌DF3/MUC1启动子转录调控序列和DTA的表达载体,酶切和测序结果与预期完全相符。结论:重组质粒pGL3-DF3-DTA构建成功。
- 罗威黄文广殷涛
- 关键词:克隆重组质粒乳癌