肖广惠
- 作品数:7 被引量:10H指数:2
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- 相关领域:医药卫生更多>>
- 化合物mangostenone F及其制备方法和在制备抗肿瘤药物中的应用
- 本发明公开了一种化合物mangostenone F及其制备方法和在制备抗肿瘤药物中的应用。本发明从山竹中分离纯化得到一个新的化合物mangostenone F,该化合物mangostenone F对鼻咽癌CNE-1细胞株...
- 孙丽荣肖广惠高天明姚开泰朱心红杨静曹雄
- 慢病毒载体介导的RNAi技术构建稳定抑制β-catenin的人鼻咽癌细胞株被引量:3
- 2011年
- 目的建立稳定抑制β-catenin基因表达的人鼻咽癌6-10B细胞株,为探讨Wnt/β-catenin信号在鼻咽癌发生中的作用提供细胞模型。方法于β-catenin CTNNB1基因编码区选择3个siRNA靶点合成3对shRNA干扰序列,分别与pLKO.1载体连接,构建pLKO.1-sh-β-catenin质粒(干扰组1)、pLVTHM-sh-β-catenin(干扰组2)和pLKO.1-sh-β-catenin-Neg质粒(阴性对照组);将重组质粒与慢病毒包装质粒共转染293T细胞,收集含慢病毒颗粒的上清液感染人鼻咽癌6-10B细胞,感染pLKO.1-sh-β-catenin和pLKO.1-sh-β-catenin-Neg质粒的细胞经嘌呤霉素筛选并扩大培养后得到稳定克隆株。Western blot检测干扰组β-catenin抑制效率及下游基因c-myc蛋白的表达;四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测比较细胞增殖状况,Transwell细胞迁移实验检测细胞迁移率。结果 Western blot检测结果显示pLKO.1-sh-β-catenin(干扰组1)干扰效率最佳,β-catenin及c-myc蛋白表达减少;MTT检测显示干扰β-catenin后细胞吸光度下降,细胞增殖受到抑制;穿过Transwell小室底膜的细胞数:干扰组1为(23.5±4.6)个,明显低于阴性对照组(50.3±5.3,P<0.01)及空白对照组(54.3±5.6,P<0.01)。结论成功构建了β-catenin shRNA慢病毒表达载体,建立了稳定抑制β-catenin基因表达的人鼻咽癌6-10B细胞株,为进一步研究以β-catenin为靶点的鼻咽癌基因治疗奠定基础。
- 姜睿张弓马磊李锡清肖广惠姚开泰
- 关键词:WNT/Β-CATENIN慢病毒载体RNAI鼻咽癌
- 一种桑枝叶活性部位的制备方法及其应用
- 本发明公开了一种桑枝叶活性部位的制备方法及其应用。所述制备方法包括包括溶剂提取桑枝叶总浸膏、醇沉去除多糖、鞣质等成分,大孔树脂吸附、分离纯化、ODS柱精制等步骤。经实验验证,本发明制备的桑枝叶提取物SangA对肿瘤干细胞...
- 罗奇志戴开金肖广惠
- 人肺腺癌吉非替尼耐药细胞系A549/GR的建立及小白菊内酯逆转耐药机制研究被引量:7
- 2012年
- 目的建立人肺腺癌吉非替尼耐药细胞系A549/GR,研究其耐药机制,探讨小白菊内酯(PAR)逆转A549/GR耐药的机制。方法以吉非替尼为诱导剂,人肺腺癌细胞系A549为诱导对象,采用大剂量冲击和逐步增加剂量相结合的方法,诱导建立人肺腺癌吉非替尼耐药细胞系A549/GR。采用细胞毒实验(MTT)法测定细胞耐药指数,免疫印迹法(Western blotting)检测细胞耐药相关蛋白表达水平,进一步通过MTT法检测PAR对A549/GR的逆转倍数,Annexin V-FITC双标法检测PAR的促凋亡作用,Western blotting检测细胞凋亡相关蛋白表达水平。结果所建立的人肺腺癌吉非替尼耐药细胞系A549/GR耐药指数为18.7。A549/GR细胞中MDR和ABCG2耐药相关蛋白表达水平较A549升高。MTT结果显示PAR对耐药细胞A549/GR的逆转倍数为8.66。Annexin V-FITC凋亡检测结果显示PAR能有效促进A549/GR细胞凋亡,Western blotting检测显示PAR能有效降低survivin、Bcl-2两种抑制凋亡相关蛋白的表达。结论成功建立了人肺腺癌吉非替尼耐药细胞系A549/GR;PAR通过促进A549/GR细胞凋亡有效逆转其耐药。
- 刘英姚开泰肖广惠
- 关键词:逆转剂
- 一种桑枝叶活性部位的制备方法及其应用
- 本发明公开了一种桑枝叶活性部位的制备方法及其应用。所述制备方法包括溶剂提取桑枝叶总浸膏、醇沉去除多糖、鞣质等成分,大孔树脂吸附、分离纯化、ODS柱精制等步骤。经实验证,本发明制备的桑枝叶提取物SangA对肿瘤干细胞表现出...
- 罗奇志戴开金肖广惠
- 文献传递
- 化合物mangostenone F及其制备方法和在制备抗肿瘤药物中的应用
- 本发明公开了一种化合物mangostenone F及其制备方法和在制备抗肿瘤药物中的应用。本发明从山竹中分离纯化得到一个新的化合物mangostenone F,该化合物mangostenone F对鼻咽癌CNE-1细胞株...
- 孙丽荣肖广惠高天明姚开泰朱心红杨静曹雄
- 文献传递
- 丙戊酸盐对胃癌细胞株SGC-7901/VCR耐药性的逆转作用
- 2012年
- 目的探讨丙戊酸盐对人胃癌耐药细胞株SGC-7901/VCR耐药的逆转作用。方法 MTT法检测SGC-7901/VCR对VCR的耐药指数;MTT法检测丙戊酸盐对SGC-7901和SGC-7901/VCR细胞增殖的抑制作用和对VCR耐药逆转的效果;用流式细胞术检测丙戊酸盐诱导细胞凋亡的作用,将SGC-7901/VCR细胞用VCR联合丙戊酸盐处理48h后,检测各组凋亡率的差别;用Western blot检测丙戊酸盐处理后蛋白质的表达水平,分别用不同浓度(0、0.5、1.0、2.0mmol/L)的丙戊酸盐作用于48h或同一浓度(1mmol/L)作用12、24、48h后,检测SGC-7901/VCR细胞中乙酰化组蛋白3(AcH3)表达水平对丙戊酸盐所呈现的剂量或时间依赖性变化。结果与亲代细胞SGC-7901相比,耐药细胞SGC-7901/VCR对VCR高度耐药,耐药指数为36.0(P<0.05);亲代细胞SGC-7901和耐药细胞SGC-7901/VCR对丙戊酸盐的敏感性相似,二者的IC50差异无统计学意义(P>0.05),丙戊酸盐与VCR联用能逆转SGC-7901/VCR细胞对VCR的耐药性,并增加细胞的凋亡(P<0.05);丙戊酸盐能增加SGC-7901/VCR细胞AcH3的表达,且具有浓度和时间依赖性。结论丙戊酸盐可通过诱导细胞凋亡和增加组蛋白的表达逆转SGC-7901/VCR细胞的耐药性。
- 缪肖波刘求真姚开泰肖广惠
- 关键词:丙戊酸盐SGC-7901VCR药物耐受性逆转