邱亚峰
- 作品数：141 被引量：175H指数：7
- 供职机构：中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生理学更多>>
- α-疱疹病毒与宿主细胞骨架相互作用的研究进展
- α-疱疹病毒复制包括吸附宿主细胞膜、膜融合、穿入与脱衣壳、DNA复制与核衣壳装配、囊膜形成与病毒粒子的成熟释放等过程。为了创造一个有利于自身复制和扩散的细胞环境,α-疱疹病毒进化了多种与宿主细胞相互作用的机制。宿主细胞骨...
- 刘超邱亚峰马志永
- 关键词：细胞骨架病毒复制
- 文献传递
- 甲型H1N1流感病毒HA蛋白的截短表达、纯化及鉴定
- 2011年
- 构建pET表达载体,通过原核表达系统制备甲型H1N1流感病毒HA的截短表达蛋白,获得纯化蛋白,并分析HA蛋白的反应原性。人工合成A/California/04/2009 H1N1流感病毒HA基因,以其为模板,PCR扩增HA的一部分基因,去除HA蛋白信号肽、跨膜区、胞内区的基因序列,仅扩增HA1和HA2的基因。将扩增的基因构建到pET 28(a)质粒上,重组质粒转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达HA蛋白,并经过Ni-NTA His Bind柱对其进行纯化,SDS-PAGE电泳鉴定HA蛋白的表达,Western blot鉴定HA蛋白的反应原性。通过原核表达获得了HA的截短表达蛋白,并制备了较高纯度的蛋白,Western blot显示HA蛋白具有很好的反应原性,为建立甲型H1N1流感病毒检测技术奠定了基础。
- 贾园沈阳邱亚峰史子学邵东华王晓杜邓绪芳王皓婷赵福广
- 关键词：甲型H1N1流感病毒HA蛋白原核表达
- 热休克蛋白HSP90AB1对猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的影响被引量：1
- 2022年
- 旨在研究宿主热休克蛋白HSP90AB1对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)复制的影响。选用对PRRSV易感的MARC-145细胞系,探究过表达和干扰HSP90AB1对病毒复制的影响,利用激光共聚焦免疫荧光和免疫共沉淀验证HSP90AB1与PRRSV的非结构蛋白NSP2作用关系,利用双荧光素酶试验探究HSP90AB1和NSP2对NF-kB活性的影响。结果表明,过表达HSP90AB1后显著抑制病毒的复制,干扰HSP90AB1的表达后促进病毒的复制;免疫共沉淀结果和激光共聚焦免疫荧光说明,HSP90AB1和NSP2存在相互作用;双荧光素酶报告试验表明HSP90AB1能逆转NSP2对NF-κB活性的抑制作用。综上,HSP90AB1可能通过与PRRSV NSP2相互作用,拮抗NSP2对NF-kB活性的抑制来抑制病毒的复制和感染。
- 谢丰玉康磊陈梦莉郑家杨李宗杰李蓓蓓邵东华邱亚峰魏建超马志永刘珂黎满香
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒病毒复制
- 表达LaCZ基因的重组CVI988病毒的构建及特性研究
- 马立克氏病(MD)是一种鸡的淋巴增生性肿瘤疾病,是由马立克氏病病毒血清1型(Marek'sdiseasevirusserotype1,MDV1)引起的,但是,可以由致弱的或天然不致病的疫苗株进行防制.疫苗株分为三种类型:...
- 邱亚峰葛菲菲张雪莲徐学清陈溥言
- 关键词：重组病毒马立克氏病毒LACZ基因启动子
- 文献传递
- 致病性大肠杆菌O157∶H7基因分型研究进展
- 大肠杆菌O157∶H7是主要的食源性致病菌，产生的肠毒素能引起腹泻，出血性肠炎和溶血性尿毒综合症(HUS)等。目前已为美国疾控中心列为食源性细菌感染风险首位。更好地开展病原菌检测鉴定，分子流行病学调查及病原溯源追踪，本文...
- 邵东华邱亚峰沈阳史子学马志永
- 关键词：大肠杆菌基因分型
- 文献传递
- PRRSV Nsp4基因突变株对β2M表达的影响
- 2024年
- [目的]本试验旨在探究猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)Nsp4基因是否在抑制细胞β2M表达方面发挥关键性作用,以进一步研究PRRSV对抗原递呈的免疫抑制机制。[方法]建立PRRSV的反向遗传平台并成功拯救出PRRSV野生毒株SH2020。根据之前对Nsp4基因不同结构域的研究以及氨基酸位点功能预测,在其DomainⅡ和DomainⅢ分别筛选出3个和5个不同的氨基酸位点,并在病毒感染性克隆质粒上对这些位点进行不同的氨基酸替换突变,再将构建好的感染性克隆质粒转染Marc-145细胞以拯救各个Nsp4突变PRRSV病毒,将拯救的PRRSV病毒以MOI=0.02感染PAM细胞,并通过RT-qPCR和Western blot验证PRRSV Nsp4基因是否能够在PAM细胞β2M表达方面发挥作用。[结果]成功拯救出PRRSV D2-5(Nsp4-A80L)突变毒株,并且在Marc-145细胞上的生长动力学特性与野生毒株SH2020相似;而Nsp4基因其余位点突变则会导致PRRSV生长受到显著抑制从而无法进行试验。Western blot和RT-qPCR试验结果证实PRRSV D2-5毒株能够显著促进β2M在Marc-145和PAM细胞的表达,而野生毒株SH2020则表现出了对β2M表达的抑制作用。[结论]Nsp4基因在PRRSV抑制细胞β2M表达方面发挥重要作用,并且Nsp4-A80L突变能够显著促进β2M的表达。
- 康磊刘珂王建忠尹才邱亚峰魏建超李蓓蓓邵东华李宗杰粟硕马志永
- 关键词：PRRSVNSP4Β2M
- PML-NBs参与干扰素介导的细胞先天性免疫抗病毒反应
- PML蛋白是早幼粒细胞白血病蛋白的简称，最初发现于急性粒细胞白血病(acute promyelocytic leukemia，APL)中，与染色体的移位密切相关。PML基因全长约35kb，含有9个外显子。该基因由于C段不...
- 李向东沈阳邱亚峰马志永
- 关键词：PML蛋白抗病毒活性
- 乙型脑炎病毒结构蛋白PrM单克隆抗体的制备和分析
- 2023年
- 为了制备乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)结构蛋白PrM单克隆抗体,首先根据NCBI参考序列(GQ918133.2)设计PrM引物扩增目的基因,将目的基因构建至pColdⅠ原核表达质粒上;然后鉴定阳性克隆质粒并转化至BL21(DE3)感受态细胞,经诱导表达蛋白纯化后。免疫6周龄BALB/c小鼠,进行杂交瘤细胞融合,并对融合细胞进行克隆筛选;最后将筛选阳性的杂交瘤细胞制备腹水获取单克隆抗体,采用间接ELISA检测抗体效价,Western blot和间接免疫荧光检测抗体特异性和病毒感染过程。结果显示:成功构建了pCold I-PrM原核表达载体,PrM蛋白在1 mmol/L IPTG 16℃过夜诱导培养时表达量较高,亚克隆后经腹水制备获得2株针对PrM区域的单克隆抗体,Western blot和间接免疫荧光检测2株单抗能够特异性识别JEV的PrM区蛋白,获得的单抗能够鉴定JEV在细胞内的感染过程。本研究为进一步研究JEV鉴别诊断技术和生物学功能提供基础。
- 陈梦莉谢丰玉张彤郑家杨魏建超李宗杰李蓓蓓邱亚峰马志永邵东华刘珂冯秀丽
- 关键词：日本乙型脑炎病毒单克隆抗体
- 中华按蚊源日本脑炎病毒的分离鉴定及其分子特征的分析被引量：4
- 2017年
- 为了解上海市蚊源日本脑炎病毒(JEV)的分子特征,2014年从上海市嘉定区猪场采集蚊媒样品1万余份,采用BHK21和C6/36细胞培养法进行病毒分离,通过RT-PCR和IFA技术对分离株进行鉴定。结果表明,分离到1株JEV,命名为JD-15,源自中华按蚊。用JD-15株分别感染BHK21和C6/36细胞,72 h后所有细胞均发生明显病变(CPE),其细胞半数感染量(TCID50)为1.96×106PFU。用分离株JD-15脑内接种3周龄乳鼠,结果测得半数致死量(LD50)为4.2×101PFU,表明该毒株具有较强的神经毒力。对JD-15株的E基因进行克隆测序及进化分析,结果显示,该株JEV属于基因Ⅲ型,与减毒活疫苗株SA-14-14-2的E基因核苷酸序列的同源性为98.1%,氨基酸序列的同源性为97.5%。本研究为乙型脑炎的流行病学调查提供了科学依据,对上海市蚊虫及蚊媒病的防治具有重要意义。
- 刘茜倩魏建超钟登科吴亚玲石坤张克龙陆美林肖长广李蓓蓓刘珂邵东华邱亚峰石元元马志永范红结
- 关键词：日本脑炎病毒进化分析
- 人源抗菌肽LL-37抗菌活性的研究
- 前言 抗菌肽具有抗菌谱广、无毒、稳定性高、不易产生耐药性等优点，近年来逐渐被广大研究者所关注。本实验以大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、李斯特菌等食源性微生物为实验菌，研究了人源抗菌肽LL-37对食源性微生物的抑菌活性...
- 李伦锋魏建超黎倩倩石坤吴亚玲邵东华邱亚峰马志永
