阚兵 作品数:62 被引量:125 H指数:5 供职机构: 四川大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 卫生部科学研究基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 天文地球 一般工业技术 更多>>
杜氏利什曼原虫表膜的制备及保护性McAb识别膜抗原的研究 1991年 本文用匀浆及超声波破碎杜氏利什曼原虫四川犬分离株前鞭毛体,蔗糖密度梯度离心分离其表膜,电镜观察见所得样品是单位膜和膜下微管组成的表膜,测得微管直径平均为23.3nm,微管间距巨平均为15.7nm,经SDS-PAGE分离显示1条主带,次带约15条,再转移到硝化纤维膜上,用单克隆抗体2H6-E3识别,仅见有一条区带,分子量为63kDa,该单克隆抗体是己经被证实定位于前鞭毛体表膜,并具有免疫保护性的。 刘佩娜 胡孝素 阚兵 吕洪刚 王远萍 杨志梅关键词:抗体 鸡tie-2受体胞外片段重组蛋白的制备及其抗血管生成作用的研究 被引量:10 2004年 目的 设法调控血管的生长发育 ,从而达到治疗疾病的目的。方法 用 PCR方法从既往构建含鸡 tie- 2受体胞外段基因的表达质粒中扩增目的片段 ,构建 p QE质粒原核表达载体并诱导目的蛋白的表达 ;将目的蛋白进一步纯化、复性并免疫小鼠 ,获得抗血清 ,用 EL ISA和 Western印迹检测抗血清中抗体的存在 ;分离纯化抗体 ,用流式细胞仪体外观察其对血管内皮细胞生长情况的影响用体内藻酸盐包裹肿瘤细胞实验和肿瘤内微血管 CD31免疫组化观察其对血管生成情况的影响。结果 经酶切分析及测序鉴定表明获得了鸡 tie- 2受体胞外目的片段的p QE原核表达载体 ,且高效表达目的蛋白 ,其免疫小鼠可产生抗重组蛋白的抗体 ;体外细胞培养结果显示免疫后产生的抗体明显的诱导血管内皮细胞凋亡 ;藻酸盐包裹实验表明此抗体能显著降低肿瘤新生血管的形成 ;CD31微血管计数显示此抗体能明显减少肿瘤内微血管数。结论 用原核表达的方法成功制备了鸡 tie- 2受体胞外片段 (配体结构域 )的蛋白疫苗 ,且此疫苗能明显产生抗血管生成作用。 罗彦 文艳君 田聆 吴扬 刘继彦 李秋 李炯 毛咏秋 邓洪新 阚兵 何秋明 杨金亮 魏于全关键词:TIE-2受体 重组蛋白 抗血管生成 原核表达 抗杜氏利什曼原虫犬分离株单克隆抗体的研制及用于病犬血清循环抗原的检测 被引量:2 1991年 本文报道用杜氏利什曼原虫大分离株前鞭毛体膜抗原免疫BALB/c小鼠的脾细胞与Sp2/0瘤细胞融合,得到多株分泌抗体较高且稳定的细胞株。进一步筛选出McAb C11-G10-A4可用于检测病犬血清循环抗原。用McAb-AST检测采自甘肃省黑热病流行区的30份犬血清,阳性率30%。与骨髓涂片查病原体的总符合率为86.7%,阳性符合率达100%。69份非流行区对照大血清检测结果,仅1份出现阳性反应,可见本试验的敏感性较高,特异性较强(98.55%)。 王雅静 胡孝素 林芳清 阚兵 吕洪刚关键词:循环抗原 单克隆抗体 应用免疫沉淀联合质谱策略筛选与鉴定鼻咽癌肿瘤抗原 背景与目的:鼻咽癌是主要来源于鼻咽部上皮组织的恶性肿瘤,在所有的肿瘤中,鼻咽癌的免疫反应最强。目前,鼻咽癌的治疗以放疗为主,配合全身化疗等治疗,但仍有一部分患者死于远处转移和局部复发。鼻咽癌的诊断还主要依赖于常规的物理和... 宋鑫 杨金亮 柳斌 阚兵 邓洪新 田聆 魏于全关键词:肿瘤抗原 血清蛋白组学 文献传递 流式细胞术PI、Annexin V/PI和APO2.7法检测细胞凋亡的比较 被引量:18 2005年 目的:探讨流式细胞术PI法、APO2.7法以及AnnexinV/PI法三种凋亡检测方法的应用价值。方法:使用PI法、APO2.7法以及AnnexinV/PI法三种方法同时对槲皮素处理后的慢性粒细胞白血病K562细胞进行凋亡检测对比研究。结果:三种方法不同时间组间的相关系数分别为0.823(P>0.05),0.949(P<0.05),0.994(P<0.01)。药物作用24小时组APO2.7法与AnnexinV/PI法检测细胞凋亡相关系数为0.925(P<0.05),48小时组相关系数为0.993(P<0.01)。结论:流式细胞术检测凋亡时可以选用AnnexinV/PI法和APO2.7法,不推荐选用PI法。 毛咏秋 姜愚 雷松 阚兵关键词:流式细胞术 凋亡 碘化丙啶 APO2.7 细胞DNA含量与大肠癌临床分期及生物学特性的关系 2000年 为进一步探讨大肠癌DNA倍体与临床分期及生物学特性的关系,采用流式细胞仪对86例大肠癌患者手术切除的新鲜大肠癌标本细胞DNA含量进行了检测。结果显示:本组病例中41例(47.7%)为二倍体;45例(53.3%)为非二倍体。DNA倍体与性别、年龄、分化程度、肿瘤部位无关,但与Dukes’分期相关,Dukes’A用肿瘤病例DNA二倍体比Dukes’B、C、D期肝癌病例更常见;Dukes’B~D期肿瘤病例之间DNA信体分布无明显差异;局部有淋巴结转移肿瘤病例DNA非二倍体更常见。提示DNA倍体与临床分期、淋巴结转移有关. 邹立群 毛咏秋 雷松 魏于全 赵霞 阚兵 姜愚 彭枫 罗锋 王庆茹 田聆 杨莉 刘继彦关键词:大肠癌 DNA倍体 生物学特性 异种黑色素细胞疫苗诱导小鼠抗恶性黑色素瘤免疫反应 被引量:5 2001年 目的 研究异种黑色素细胞疫苗对小鼠恶性黑色素瘤生长的抑制作用。方法 制备异种黑色素细胞疫苗 ,皮下预防免疫小鼠后再接种恶性黑色素瘤 ,并以该疫苗皮下注射治疗恶性黑色素瘤鼠 ,随后测量肿瘤大小。采用51Cr释放法 ,体外分析小鼠脾细胞的细胞毒性T细胞 (CTL)活性 ,以间接ELISA法检测小鼠血清抗肿瘤抗体。结果 预防免疫使 90 %小鼠恶性黑色素瘤生长受到抑制 ,疫苗治疗使 5 0 %小鼠肿瘤生长受到抑制 ,免疫组鼠较对照组CTL杀伤活性在 2 0∶1、10∶1、5∶1不同效靶比时 ,分别增高 34 0 %、2 4 1%及 13 9% (P <0 0 5 ) ,体内出现抗恶性黑色素瘤抗体。结论 异种黑色素细胞疫苗可诱导小鼠抗恶性黑色素瘤特异性免疫反应 ,抑制肿瘤生长。 罗锋 魏于全 阚兵 杨莉 田玲 卢铀 彭枫 姜愚 刘继彦 赵霞 邹立群 雷松 毛咏秋关键词:黑色素瘤 免疫 用McAb-AST及骨髓涂片法对四川省汶川县犬感染利什曼原虫的调查研究 被引量:15 1991年 作者等用单克隆抗体-抗原斑点试验(McAb-AST)及骨髓穿刺涂片法对汶川县125只犬进行感染利什曼原虫调查,骨髓涂片法查出原虫的阳性犬46只,感染率为36.8%,较之历年来陇南、川北报道的犬感染率为高,不但查明了当地犬感染利什曼原虫的严重性,且为本年在白蛉繁殖季节前消除这些传染源提供了确切依据。为了研究对犬利什曼病的简易、准确的调查方法,我们同时用McAb-AST对该125只犬的血清,检测其循环抗原,结果与骨髓涂片阳性符合率为97.8%,总符合率95.2%,可望取代骨髓涂片法。 胡孝素 林芳清 阚兵 吴远祥 张安治 李国茹 陈明 张先钦 蒋能富 张显林关键词:利什曼原虫 单克隆抗体 异种黑色素细胞疫苗诱导小鼠抗恶性黑色素瘤免疫反应的机理研究 被引量:1 2004年 目的 研究异种黑色素细胞疫苗诱导小鼠抗恶性黑色素瘤免疫反应的机理。方法 制备异种黑色素细胞疫苗 ,免疫小鼠。采用间接 EL ISA法检测小鼠抗肿瘤抗体滴度及抗体亚型 ,纯化免疫球蛋白及进行体外抗肿瘤增殖 ,采用 Western blot法分析交叉抗原蛋白质。接种恶性黑色素瘤 ,观察肿瘤生长 ,采用免疫细胞去除法分析NK细胞及 T细胞亚群对疫苗抑瘤效应的影响。结果 异种疫苗免疫后 2周小鼠体内出现抗自身肿瘤抗体 ,产生的抗体以 Ig G为主 ,抗体认别的猪眼黑色素细胞及恶性黑色素瘤细胞交叉抗原为相对分子质量达 180× 10 3的蛋白质 ,纯化的免疫球蛋白在体外能抑制恶性黑色素瘤细胞增殖。异种疫苗诱导特异性保护性免疫反应使 90 %小鼠恶性黑色素瘤生长受到抑制 ,去除 NK细胞不影响疫苗抑瘤效应 ,去除 CD4 + T细胞使疫苗抑瘤效应消失 ,去除CD8+ T细胞 70 %小鼠恶性黑色素瘤生长仍受到抑制。结论 异种黑色素细胞疫苗诱导特异性体液免疫及细胞免疫反应 ,抑制恶性黑色素瘤的生长 ,CD4 + T细胞在这一过程中发挥了关键性作用。 罗锋 毛咏秋 阚兵 何秋明 姜愚 彭枫 杨莉 田聆关键词:黑色素瘤 免疫学 一种可生物降解温度敏感型聚乙二醇-聚己内酯-聚乙二醇水凝胶的合成和表征 被引量:6 2008年 合成了一系列分子量较低的聚乙二醇-聚己内酯-聚乙二醇(Poly(ethylene glycol)-Polycaprolactone-Poly(ethylene glycol),PEG-PCL-PEG)三嵌段共聚物。分别采用FTIR和1H-NMR对其结构进行了表征。所合成的PEG-PCL-PEG共聚物具有良好的水溶性,当水溶液浓度高于临界凝胶浓度(Critical gel concentration,CGC)时,随着温度的变化聚合物水溶液会呈现特有的凝胶-溶胶转变。研究了共聚物亲水疏水链段的比例和长度,以及热历史等对凝胶-溶胶转变行为的影响。通过调节上述条件,可以在一定程度上拓宽凝胶-溶胶转变温度范围,有助于PEG-PCL-PEG水凝胶在可注射药物控制释放系统等方面的应用。 巩长旸 顾迎春 谢震 谢希惠 刘彩兵 阚兵 涂铭旌 魏于全 钱志勇关键词:可生物降解 温度敏感 水凝胶