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一种检测乳腺癌细胞耐药性的方法及检测试剂盒: 本发明属于生物技术工程及肿瘤医学领域，公开了一种检测乳腺癌细胞耐药性的方法及检测试剂盒。该方法采用荧光原位杂交技术结合锁核酸探针(LNA‑ELF‑FISH方法)对乳腺癌细胞中的miR‑222进行定量检测，根据miR‑22...; 赵建华唐金海钟山亮刘志安于丹丹; 文献传递

高灵敏核酸检测方法研究及其在临床诊断中的应用: 鞠熀先严枫雷建平赵建华张志洁叶永康刘志安; 以临床实验诊断中高效、灵敏、准确、快速、价廉、安全检测，并最终实现早期筛查、疗效监测和床旁检验为目标，利用化学、生物、材料、临床医学等领域的新成就，通过超分子组装，创新DNA检测原理与思路，创建了DNA序列和浓度检测的新...; 关键词：; 关键词：核酸检测

循环肿瘤细胞与多基因的实时荧光RT-PCR定量和癌症微转移特性研究: 癌症的复发与转移是引起癌患者死亡的最主要原因之一。例如食管癌，五年的生存率只有15％，即使经过肿瘤的手术切除，两年的生存率也只有20-30％。而结直肠癌患者手术后大约有30-50％发生转移性复发。研究表明，在肿瘤组织发生...; 刘志安; 关键词：癌症治疗癌症转移病理细胞学

收集少量细胞的微流控芯片: 本实用新型公开了一种收集少量细胞的微流控芯片，包括基片和盖片，基片上设有微流通道区，其一侧依次设有用于放置含细胞液体的细胞汇集区和驱动装置，另一侧设有废液汇集区，其中，所述微流通道区上间隔布置若干微流通道，该微流通道的横...; 赵建华刘志安钟山亮胡嘉华戴明飞张贵雪; 文献传递

食管癌患者外周血N-甲基-D-天冬氨酸受体2B基因异常甲基化水平及其临床意义: 2009年; 缺乏早期诊断和转移监测的特异性指标是食管癌术后复发和转移的高死亡率的关键原因，因此临床上迫切需要寻找取材方便、微创且可实时追踪监测的外周血肿瘤标志。2006年Kim等通过基因启动子区药物处理和芯片表达分析等研究发现，神经氨酸酶受体家族成员——N-甲基-D-天冬氨酸受体2B（NMDAR2B）在食管癌癌组织及其癌细胞系中具有很高的异常甲基化率；启动子甲基化是该基因失活的主要原因，且与肿瘤细胞凋亡抑制相关。为此，我们对食管癌癌组织，特别是外周血NMDAR2B的异常甲基化情况进行了检测分析，以探讨其作为食管癌复发和预后监测指标的临床应用价值。; 梁志超刘敏刘志安蒋明唐金海赵建华; 关键词：N-甲基-D-天冬氨酸受体外周血甲基化水平基因异常异常甲基化

相对定量RT-PCR法中内对照基因表达水平的稳定性及其应用评价被引量：3: 2009年; 目的评价相对定量RT-PCR方法中不同内对照基因表达水平的稳定性及其对靶基因预后判断的影响程度。方法以36例食管癌患者为例,收集其手术前(B-1)、手术刚结束时(B0)和术后第三天(B+3)的外周血样品。利用实时定量RT-PCR技术,分别检测内对照基因Beta-actin和GAPDH在不同时间的表达水平,并以CEA mRNA作为靶基因,比较基于这两种内对照得出的靶基因相对定量结果用于患者预后判断的差异;标准化的绝对定量结果被作为"预后判断的参照标准"。结果在三个取样时间点,两种内对照基因表达水平的标准偏差依次分别为Beta-actin mR-NA:1.44,1.56和1.92;GAPDH mRNA:3.16,3.28和4.04;两者的总体变异程度分别为9.9%和17.3%。术后一年的复发结果表明,绝对定量法和基于Beta-actin mRNA的相对定量法在预后判断中能够得到一致的结果,而GAPDH mRNA的相对定量结果与复发之间未显示统计学意义的相关性(P>0.05)。结论相对定量RT-PCR法中内对照基因表达水平的变异程度低于10%时,才能保证内对照的有效性以及靶基因测定结果的可比性。基因表达研究时应对所用的内对照基因表达稳定性进行前期评估。; 梁志超陈江华刘志安刘敏蒋明赵建华; 关键词：食管癌 BETA-ACTIN MRNA GAPDH MRNA 实时定量RT-PCR

磁场中分离细胞的微流控芯片: 本实用新型公开了一种磁场中分离细胞的微流控芯片，包括设于磁场中的基片和盖片，其中基片上设有液池，该液池一侧设进样口，该进样口与液池之间设用于待分离磁性标记细胞单排进入的微流通道，另一侧分别设磁性标记的细胞收集口和未被磁性...; 赵建华刘志安钟山亮胡嘉华戴明飞张贵雪; 文献传递

食管癌患者循环DNA的定量分析及其临床应用价值被引量：6: 2006年; 目的探讨食管癌患者循环DNA的来源、临床应用价值及可能的影响因素。方法收集53例食管癌患者术前和术后2h的静脉血，用SYBR green I荧光染色法和检测CEA—mRNA表达的实时荧光定量RT—PCR法，分别检测血浆中的DNA水平和循环中的肿瘤细胞数。结果食管癌组术前循环DNA水平为（67，46±59．78）μg／L，显著高于良性肿瘤组（23．52±22．94）μg／L和健康组（11．97±12．35）μg／L，均P〈0．001，ROC曲线下的面积为0，798。术后DNA水平迅速上升．达（122，36±71．41）μg／L，显著高于手术前（P〈0．001）。CEA mRNA^＋循环肿瘤细胞数在术后也显著高于手术前，其中位数水平分别为1513（95％CI，660～7974）／ml全血和188（95％CI，155～498）／ml全血，P〈0．01。血浆DNA水平与循环肿瘤细胞数之间．无论在术前还是术后均无显著性关联（r=0．200，P=0．156和r=0．206，P=0．138），与临床病理分期也无相关性（r〈0．030．P〉0．05）。结论食管癌患者循环DNA水平增高，可为疾病诊断提供一定的辅助信息，但没有足够的敏感性和特异性成为诊断或监测癌症的独立标志物。; 刘敏陆化蒋明刘志安严枫赵建华; 关键词：食管癌循环DNA 循环肿瘤细胞

血中survivin mRNA表达水平的定量检测及其对食管癌预后的评估: 2008年; 目的探讨食管癌患者外周血中细胞凋亡抑制蛋白survivin mRNA定量检测对预后评估的价值。方法取36例食管癌患者在手术前、手术刚结束时和手术后第3d的外周血；将实时荧光RT-PCR绝对定量和相对定量技术合理结合，创建新的标准曲线，用于检测外周血survivin mRNA的表达水平；22例胸部良性肿瘤患者的同期系列血样为对照组。结果survivin mRNA阳性表达的平均值（拷贝数／μg总RNA）在3个取样时间点依次分别为：12219（95％ CI，7826-16612），6595（95％CI，2461-10729）和15018（95％ CI，7407-22628）。术后一年的随访结果显示，当术后第3dsurvivin mRNA的表达水平大于9000拷贝／μg总RNA时，患者的复发风险显著性增高（P=0．033）。结论术后第3d外周血中survivin mRNA的表达水平可作为一个新的判断指标用于食管癌患者预后的评估。; 刘敏刘志安蒋明张建赵建华; 关键词：食管癌 SURVIVIN MRNA RT-PCR 预后

食管癌围手术期外周血微转移的定量检测及其临床意义被引量：2: 2007年; 目的探讨食管癌围手术期外周血微转移定量检测的理想途径,判断手术对微转移的影响程度。方法对40例可手术的食管癌分别于手术前1天(记为B-1)、手术刚结束时(记为B0)和手术后第3天(记为B+3)取外周中心静脉血,分离单核细胞并提取总RNA,用实时荧光PCR技术定量检测癌胚抗原基因(CEAmRNA)表达水平,以胸部良性肿瘤患者和正常人为对照。结果CEA mRNA拷贝值在B-1、B0和B+3取样时间点的中位值分别为1592、13 314、6221拷贝/ml。且在B0及B+3处的CEA mRNA表达水平都明显高于在B-1处的表达水平(P值分别为0.0001和0.0209)。CEA mRNA表达水平在B0处高于B+3处,但差异无统计学意义(P=0.4396)。结论手术操作使得患者外周血的CEA mRNA表达水平明显增加,术后第3天有部分下降,但仍有部分患者存在高水平的CEA mRNA,表明手术促进微转移的发生,有必要行围手术期综合治疗。; 蒋明刘志安赵建华许林; 关键词：食管肿瘤肿瘤转移癌胚抗原围手术期; 全文增补中

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刘志安

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