刘枋 作品数:22 被引量:47 H指数:4 供职机构: 福建医科大学 更多>> 发文基金: 福建省医学创新课题 福建省自然科学基金 福建省卫生厅青年科研基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 自动化与计算机技术 更多>>
IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ、IL-17A在肝癌组织中表达及其与乙肝病毒感染的关系 被引量:22 2015年 目的:研究Th17(IL-17A)在肝细胞癌发生发展中的作用,尤其与乙肝病毒感染的关系。方法:收集39例原发性肝细胞癌患者的癌与非癌组织,应用流式细胞微球阵列术(CBA)检测IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ、IL-17A细胞因子水平,并与患者临床资料进行统计比较分析。结果:肝癌组织中IL-2、IL-4、IFN-γ表达水平好[分别为(4.61±0.28)、(3.37±0.58)、(3.08±1.08)pg/ml]显著低于非癌组织[分别为(5.57±0.59)、(3.77±0.70)、(3.69±1.20)pg/ml],而IL-6、IL-17A水平[分别为(280.09±254.68)、(2.66±1.66)pg/ml]显著高于非癌组织[分别为(6.58±1.92)、(1.49±0.98)pg/ml],同时无论癌组织还是非癌组织,高乙肝病毒载量(>1 000 U/ml)的组织IL-17A的表达[(3.45±1.86)pg/ml]显著高于低病毒载量(<1 000U/ml)的组织[(1.97±1.16)pg/ml]。结论:Th17细胞分泌的细胞因子IL-17A在肝癌组织中高表达,IL-2、IL-4和IFN-γ可能抑制其表达,而IL-6可能促进其表达;乙肝病毒感染有可能促进Th17的表达,从而降低患者的预后。 黄传钟 李洁羽 陈淑萍 刘枋 叶韵斌关键词:肝癌 TH17 乙肝病毒 AMIGO2通过激活PI3K/AKT/mTOR信号通路促进鼻咽癌细胞的增殖 2020年 目的:探讨Ig样结构域2黏附分子(adhesion molecule with Ig like domain 2,AMIGO2)在鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)细胞增殖中的作用及其机制。方法:选用2017年9月至11月福建省肿瘤医院收集的10例NPC组织和10例正常鼻咽黏膜上皮组织标本,以及NPC细胞系CNE-1、CNE-2、SUNE-1、6-10B、C666-1和人永生化鼻咽黏膜上皮细胞株NP69,用qPCR法检测NPC组织和细胞中AMIGO2 mRNA的表达。构建慢病毒载体干扰AMIGO2表达,用qPCR法验证其干扰效率;用CCK-8法、克隆形成及流式细胞术检测干扰AMIGO2表达对NPC细胞增殖、克隆形成和凋亡的影响,用Western blotting检测干扰AMIGO2表达对NPC细胞增殖及PI3K/AKT/mTOR信号通路相关标志蛋白表达的影响。结果:AMIGO2在NPC组织和CNE-2和SUNE-1细胞中高表达(均P<0.01)。慢病毒AMIGO2感染后,CNE-2和SUNE-1细胞的AMIGO2干扰效率均达50%以上。干扰AMIGO2表达,显著降低CNE-2和SUNE-1细胞增殖及克隆形成能力(均P<0.01)、明显提高细胞的凋亡率(均P<0.01);降低SUNE-1细胞中PI3K、AKT和mTOR磷酸化蛋白的表达水平(均P<0.01)、下调survivin和PCNA蛋白的表达水平(均P<0.01)。结论:AMIGO2通过激活PI3K/AKT/mTOR信号通路促进NPC细胞增殖并抑制其凋亡,提示AMIGO2可能是NPC治疗的潜在靶点。 叶旺忠 许元基 叶韵斌 黄心怡 刘枋 李洁羽 林智忠 柏朋刚 陈传本关键词:鼻咽癌 CNE-2细胞 血清Cyfra21-1和SELDI技术联合检测肺鳞癌的临床意义 被引量:2 2011年 目的探讨血清Cyfra21-1和SELDI技术联合应用在肺鳞癌患者中的诊断意义。方法应用电化学发光技术对59例病理确诊肺鳞癌患者和60例健康对照者血清进行Cyfra21-1检测,同时应用SELDI-TOF-MS和CM10芯片检测该血清,分析两种手段的联合诊断价值。结果电化学发光法单项检测Cyfra21-1的敏感度为77.966%、特异性为96.667%。应用SELDI技术以及肺鳞癌诊断模型进行分析,敏感度为83.051%、特异性为65.385%。而联合检测的敏感度为94.915%、特异性为95.000%。结论与单用电化学发光法检测Cyfra21-1相比,联合SELDI技术检测更能提高肺鳞癌诊断的敏感度。联合检测的特异性也比单独使用SELDI技术有明显提高。 刘枋 林志强 陈慧菁 林艳 林丽婷 陈强 叶韵斌关键词:肺鳞癌 SELDI CYFRA21-1 慢病毒介导的CARMA1稳定沉默对K562细胞侵袭转移能力的影响 目的:通过分析慢病毒介导的CARMA1的稳定沉默引发的K562细胞侵袭转移能力及相关信号通路的改变,探讨可能机制.方法:应用慢病毒质粒系统和包装细胞293T,利用磷酸钙共沉淀转染法包装合成能使CARMA1基因表达稳定沉默... 刘枋 王凌燕 叶韵斌关键词:CML RNA干扰 慢病毒 甲胎蛋白阴性的肝癌患者血清特异蛋白及其应用 本发明公开了一种甲胎蛋白阴性的肝癌患者血清特异蛋白及其应用,属生物检测技术领域。本发明应用SELDI-TOF-MS技术,通过建立甲胎蛋白阴性肝癌患者与健康对照之间血清蛋白质的指纹图谱,并进行差异分析,寻找新的蛋白质标志物... 叶韵斌 陈强 陈慧菁 周东 郝明志 刘枋 余家密 林海澜文献传递 GPC3基因在原发性肝癌中的表达意义 被引量:1 2010年 目的分析GPC3基因在肝癌组织和癌周组织中的表达及对原发性肝癌的诊断价值。方法从20例原发性肝癌及相对应的癌周组织提取总RNA,利用RT-PCR方法对AFP、GPC3基因进行半定量分析。结果AFP、GPC3基因在癌组织和癌周组织的表达存在显著差异,在癌组织的表达率分别为70.0%和75.0%,联合应用达80.0%,在癌周组织的表达率均为10.0%,组织AFP mRNA的表达与血清AFP相关,而GPC3 mRNA的表达不受血清AFP值影响,在血清AFP≤20 ug/l的肝癌组织中,GPC3 mRNA表达率为40.0%(4/8)。结论GPC3 mRNA在肝癌癌组织中的表达明显高于癌周组织的表达,GPC3基因对血清AFP阴性肝癌有一定的辅助诊断意义,可能是肝癌的一种新的潜在的肿瘤特异标志物。 余家密 陈强 叶韵彬 陈慧菁 刘枋关键词:肝肿瘤 AFP GPC3 RT-PCR SELDI-TOF-MS技术筛选鼻咽癌血清肿瘤标志物 被引量:4 2011年 目的筛选鼻咽癌患者血清蛋白差异表达并建立诊断模型,分析不同临床特征患者的血清蛋白质谱差异。方法应用SELDI技术分析102例鼻咽癌患者及118例健康对照的血清样本,Bio-marker Wizard和Biomarker Pattern软件分析两组之间的差异,建立分类树诊断模型并进行盲筛验证;进一步分析鼻咽癌不同临床分型及EB病毒感染状态对患者血清蛋白质表达谱的影响。结果发现鼻咽癌与健康对照之间有25个血清蛋白质谱峰差异有统计学意义(P<0.01),13个蛋白峰表达下调,12个蛋白峰表达上调。经Biomarker Pattern软件建立分类树模型,盲法验证其敏感度为97.56%,特异性为88.89%,准确率达92.63%;上行型和下行型鼻咽癌之间发现M/Z为10286Da、7569Da及8149Da的3个血清蛋白质峰差异有统计学意义(P<0.05);EB阳性和EB阴性鼻咽癌间M/Z为9354Da及4596Da的2个血清蛋白质峰差异有统计学意义(P<0.05)。结论 SELDI-TOF-MS技术可筛选出鼻咽癌差异性蛋白并建立鼻咽癌诊断的分类树模型,有望成为鼻咽癌早期诊断的辅助指标;并且用SEDLI技术可以发现一些与鼻咽癌临床特征相关的血清蛋白差异峰。 陈慧菁 倪晓雷 叶韵斌 李建成 徐鹭英 刘枋 潘建基关键词:鼻咽癌 蛋白质组学 Grb2-SH3抑制剂peptidimer-c对K562细胞凋亡相关基因表达的影响 2012年 目的分析peptidimer-c对K562细胞基因表达谱的影响,初步探讨peptidimer-c诱导K562细胞凋亡和抑制生长的可能机制。方法应用锥虫蓝染色法计数经不同浓度peptidimer-c分别作用不同时间后的K562活细胞数;通过透射电子显微镜观察peptidimer-c作用前后K562细胞的超微结构;应用HumanU133Plus3.0基因表达谱芯片检测peptidimer-c作用前后K562细胞的差异表达基因;并用反转录聚合酶链反应(RT.PCR)验证芯片结果。结果peptidimer-c能诱导K562细胞凋亡和抑制生长,peptidimer-c作用于K562细胞后引起大量基因表达的变化,差异表达基因有529个,其中上调455个,下调74个,影响细胞凋亡的基因包括JUN、AXUDl、TNFRSFIOB等表达明显上调;RT-PCR验证选取的15个基因的表达差异与芯片结果一致。结论peptidimer-c可通过上调肿瘤坏死因子及其受体家族成员和JUN家族,启动K562细胞凋亡。 陈淑萍 陈慧菁 刘枋 叶韵斌关键词:K562细胞 寡核苷酸序列分析 基因表达 蛋白芯片技术对甲胎蛋白阴性肝癌诊断的意义 被引量:5 2009年 目的探讨表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱(简称SELDI)技术在甲胎蛋白(AFP)阴性肝癌患者中的诊断价值。方法应用美国Ciphergen公司SELDI仪和CM10芯片检测57例血清AFP阴性(〈20ug/L)肝癌患者和55例健康对照外周血清。采用Biomarker Wizard软件分析,筛选出特征性的蛋白峰,结合临床病理资料分析该蛋白峰的诊断价值。结果筛选出的特异蛋白峰质荷比为4.2×10^3,4.1×10^3、6.7×10^3.5.7×10^3、6.5×10^3.6.9×10^3,5.8×10^3,利用差异蛋白峰对17例AFP阴性的肝癌患者和13例健康对照进行盲筛,其灵敏度和特异度分别为88.23%和92.31%。筛选出的特异蛋白峰与患者年龄、性别、肿瘤大小以及是否合并肝硬化等临床资料无关。结论应用SELDI技术筛选肝癌患者血清特异性肿瘤标志物的方法快速、有效,对血清AFP阴性患者的正确诊断有较大的辅助作用。 叶韵斌 陈慧菁 周东 郝明志 刘枋 余家密 李星 林海澜 陈强关键词:肝细胞性肝癌 SELDI 甲胎蛋白类 MICA基因多态性与乳腺癌细胞对NK细胞杀伤的敏感性 被引量:1 2018年 目的:探讨MHC-Ⅰ类链相关分子A(MHC class I chain-related molecule A,MICA)多态性与乳腺癌细胞对NK细胞杀伤敏感性的关系。方法:测序分析乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-435S和SK-BR-3的MICA等位基因,用Western blotting和流式细胞术检测MICA重组表达载体转染293T细胞(分别命名为p MCFA5.1、p MCFA4、p231A5R、p231A9和p435A5P)MICA蛋白的表达水平,用LDH法检测NK细胞对转染MICA的293T细胞的杀伤活性,酶联免疫斑点法检测NK细胞穿孔素、颗粒酶B分泌水平。结果:MCF-7细胞表达MICA*008/A5.1和MICA*001/A4,MDA-MB-231和SK-BR-3细胞均表达MICA*019/A5和MICA*002/A9,MDA-MB-435S细胞表达MICA*010/A5。转染MICA后,p MCFA5.1组293T细胞MICA蛋白的表达水平最低(P<0.05),p435A5P组次之(P<0.05),p MCFA4组、p231A5R组和p231A9组表达水平较高(均P<0.05)。NK细胞对转染MICA的293T细胞杀伤活性及穿孔素、颗粒酶B分泌:p435A5P组对NK细胞杀伤的敏感性最低(P<0.05),穿孔素、颗粒酶B分泌水平最低(均P<0.05);p MCFA5.1、p MCFA4、p231A5R和p231A9各组之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:MICA基因多态性与乳腺癌细胞对NK细胞杀伤的敏感性密切相关。 陈淑萍 周智锋 林万松 李洁羽 刘枋 叶韵斌关键词:乳腺癌细胞 MICA基因 自然杀伤细胞