吴青
- 作品数：40 被引量：156H指数：8
- 供职机构：华中科技大学同济医学院附属同济医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金卫生部临床学科重点项目国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 雷公藤红素对U937细胞Notch 1、NF-κB信号蛋白通路的调控作用被引量：23
- 2010年
- 背景与目的:白血病是高度依赖NF-κB的恶性肿瘤,NF-κB与肿瘤的发生和转移以及肿瘤细胞的增殖、凋亡、耐药相关,现已证实NF-κB家族是Notch信号通路的一个靶基因。本研究探讨雷公藤红素对白血病U937细胞凋亡和细胞中Notch1、NF-κB表达水平的影响。方法:以不同浓度雷公藤红素(0.25～16.0μmol/L)分别作用于U937细胞12～60h,MTT法检测细胞增殖活性,透射电子显微镜、流式细胞术观察雷公藤红素对U937细胞凋亡的影响,Western blot、RT-PCR法分别检测雷公藤红素对U937细胞内Notch1通路蛋白、基因表达水平的调控作用,激光共聚焦显微技术检测细胞凋亡时NF-κB的核浆分布变化。结果:雷公藤红素能明显抑制U937细胞增殖,具有浓度依赖和时间依赖性。此外,雷公藤红素以浓度依赖性方式诱导U937细胞凋亡,并伴随明显的凋亡细胞形态学改变,而雷公藤红素的凋亡诱导效应可能与其将细胞阻滞于G0/G1期有关。雷公藤红素对Notch1通路蛋白及基因表达水平均有不同程度的抑制作用,该抑制作用呈明显的量效关系。NF-κB在胞核表达减少,胞浆表达增多。与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:雷公藤红素明显抑制U937细胞的增殖,并诱导其凋亡,其抗白血病效应可能与下调Notch1信号通路以及NF-κB蛋白表达有关。
- 王晓南吴青杨旭张连生吴一品卢聪
- 关键词：雷公藤红素U937细胞NOTCH1NF-ΚB凋亡
- 急性髓系白血病M4及M5的化疗疗效观察
- 2003年
- 左小兵吴青
- 关键词：急性髓系白血病化疗疗效观察
- 雄黄抑制宫颈癌细胞株增殖和诱导凋亡的体外研究被引量：2
- 2007年
- 目的:体外研究中药雄黄主要成分As4S4对子宫颈癌细胞株Hela细胞的增殖抑制和诱导凋亡的作用。方法:以As4S4不同浓度(7.5、15、30、60mg/L),分12h,24h,36h,48h,60h处理Hela细胞,用光镜观察细胞变化;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞增殖抑制率;流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡率;用DNA梯状电泳(DNA ladder)检测凋亡的发生。结果:不同浓度(7.5、15、306、0 mg/L)的As4S4处理的Hela细胞,细胞增殖受到抑制,作用呈明显的时效和量效关系,差异有非常显著性(P<0.01);As4S4诱导Hela细胞的凋亡率为(8.13±1.13)%^(62.36±4.42)%,与对照组比较(2.84±1.88)%,差异有极显著性(P<0.01),并呈浓度依赖性;DNA ladder呈梯状条带。结论:雄黄体外对宫颈癌细胞株Hela细胞具有增殖抑制和促进凋亡作用。
- 尹伶濮德敏吴青郭孝鹏
- 关键词：AS4S4增殖抑制HELA细胞凋亡
- 选择性COX-2抑制剂NS-398诱导白血病细胞凋亡的作用机制被引量：9
- 2007年
- 目的探讨选择性环氧合酶-2(COX-2)抑制剂NS-398诱导白血病细胞系K562细胞凋亡的分子机制。方法采用流式细胞术检测细胞凋亡;采用蛋白印迹法(Western blot)检测凋亡相关蛋白Bcl-2、半胱氨酸酶-3(Caspase-3)的表达;并应用流式细胞术检测Caspase-3的活性。结果①NS-398作用K562细胞24h后,对照组未出现凋亡峰,各药物处理组(100~400μmol·L-1)均出现明显的凋亡峰,其凋亡率分别为(10.51±1.04)%、(27.79±2.40)%、(45.72±3.32)%和(60.22±2.03)%(P<0.01)。②不同浓度NS-398处理后,K562细胞中Bcl-2蛋白表达下降,而Caspase-3蛋白表达增加,与对照组相比差异具有显著性(P<0.05)。③NS-398能以剂量依赖方式促进Caspase-3活性的增加,表达活化Caspase-3的细胞百分率分别为(2.67±0.22)%、(9.53±0.15)%、(21.28±0.43)%、(39.63±0.8)%和(63.40±0.69)%(P<0.01)。结论选择性COX-2抑制剂NS-398可能通过调节Bcl-2蛋白表达、活化Caspase-3,从而诱导白血病K562细胞凋亡。
- 张纯吴青陈燕
- 关键词：NS-398环氧合酶-2凋亡K562细胞
- 四硫化四砷对人宫颈癌细胞Hela环氧合酶表达和PGE2产生的影响
- 2007年
- 目的研究中药雄黄主要成分四硫化四砷（As4S4）对子宫颈癌细胞Hela增殖和凋亡作用的影响及其作用机制。方法以不同浓度（7．5、15、30、60mg／L）的As4S4对Hela细胞分别处理不同的时间（12、24、36、48、60h），用四甲基偶氮唑蓝（MTY）法测定细胞增殖反应；流式细胞仪检测细胞凋亡率；Western blot检测环氧合酶-2（COX-2）蛋白的表达；用放射免疫法检测细胞PGE2释放水平。结果As4S4对Hela细胞增殖有明显的抑制作用（P〈0．01），并呈明显的时效和量效关系，作用24h时IC50的As4S4作用浓度为30ms／L。As4S4可诱导Hela细胞凋亡，与对照组相比，差异有极显著意义（P〈0．01），并呈浓度依赖性。As4S4可明显抑制Hela细胞COX-2的表达（P〈0．05），随着As4S4浓度的增加，其COX-2蛋白表达水平逐渐降低。不同浓度As4S4作用24h，可明显抑制Hela细胞PGE2的分泌水平，与对照组比较差异有极显著意义（P〈0．01）。结论As4S4对Hela细胞增殖具有抑制作用，可促进细胞凋亡，其作用机制可能与抑制细胞COX-2表达和PGE2分泌水平有关。
- 尹伶濮德敏吴青
- 关键词：砷剂HELA细胞
- 黄芪注射液对高糖所致血管内皮细胞损伤的保护作用被引量：1
- 2008年
- 背景与目的:研究黄芪注射液对50%葡萄糖所诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用。材料与方法:采用血管内皮细胞VEC-304,分为正常对照组、葡萄糖损伤对照组和加入3个不同黄芪浓度的实验组(100mg/ml、200mg/ml、300mg/ml),各组细胞孵育24h后,除正常对照组外其余各组加入50%葡萄糖(终浓度为30mg/L)诱导损伤,继续培养4h。在倒置相差显微镜下观察细胞形态学变化并采用MTT光吸收法检测细胞活力、采用考马斯亮蓝法检测蛋白质含量,用RT-PCR法和免疫细胞化学方法检测血管内皮生长因子(VEGF mRNA)及蛋白的表达。结果:正常对照组及黄芪注射液各剂量组细胞活力、蛋白质含量均高于50%葡萄糖损伤对照组,其差异均具有统计学意义(P均<0.05)。显示高糖明显抑制VEGF的活性和表达,而黄芪则具有明显的对高糖损伤的修复作用。
- 范可陈培红吴青
- 关键词：黄芪注射液
- 锰对HUVEC-304细胞生长及p53、p21^(WAF1/CIP1)蛋白表达的影响被引量：2
- 2006年
- 目的探讨锰对人脐静脉内皮细胞系HUVEC-304细胞生长及p53、p21WAF1/CIP1蛋白表达的影响。方法取指数生长期HUVEC-304细胞,以100、200、400、800μmol/L MnCl2,分别作用24、48、72 h后,以四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色实验检测细胞的存活力,筛选锰对细胞的毒性剂量。流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡,Western blot方法检测p53、p21WAF1/CIP1蛋白的表达。结果100、200、400、800μmol/L MnCl2作用24、48、72 h均对HUVEC-304细胞有显著的抑制作用(P<0.05),且呈剂量-时间效应关系。流式细胞仪检测结果表明锰能诱导HUVEC-304细胞凋亡(P<0.01),Western blot结果显示,随锰浓度的增高,p53蛋白的表达下降(P<0.05);而p21WAF1/CIP1蛋白表达上升,差异有统计学意义(P<0.05),且呈剂量依赖性。结论锰可抑制HUVEC-304细胞的增殖,诱导其发生凋亡,p53蛋白的表达减少及p21WAF1/CIP1蛋白的表达增加是其发生凋亡的机制之一。
- 黄国香吴青郭晓鹏宋世震
- 关键词：锰P53蛋白
- As_4S_4对宫颈癌HeLa细胞增殖抑制和诱导凋亡的初步研究被引量：2
- 2006年
- 背景与目的:四硫化四砷(As4S4)是雄黄的主要成分。近年,实验显示雄黄治疗急性早幼粒细胞白血病(APL)疗效明显,发现其具有抗肿瘤作用,但对实体瘤宫颈癌未见报道,本实验体外研究中药雄黄主要成分As4S4对子宫颈癌HeLa细胞的作用,旨在观察其对HeLa细胞的增殖抑制和诱导凋亡的作用。方法:以不同浓度(7.5、15、30、60mmol/L)的As4S4,分12、24、36、48、60h处理HeLa细胞,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞增殖抑制率;流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡率;用DNA梯状电泳(DNAladder)检测凋亡的发生。结果:不同浓度(7.5、15、30、60mmol/L)的As4S4处理的HeLa细胞,细胞增殖受到抑制,作用呈明显的时效和量效关系。24h时IC50为30mmo/L,与对照组相比,差异有非常显著性(P<0.01)。As4S4诱导HeLa细胞的凋亡率分别为(8.1±1.1)%、(29.6±2.5%)、(46±3)%、(62±4)%,与对照组比较(2.8±1.8)%,差异有极显著性(P<0.01),并呈浓度依赖性;DNAladder呈梯状条带。结论:As4S4对HeLa细胞体外具有增殖抑制和促进凋亡作用。
- 尹伶濮德敏吴青程铭刘嵘李天华
- 关键词：AS4S4增殖抑制HELA细胞
- 曲古菌素A调节NB4细胞组蛋白乙酰化和p21^(WAF1/CIP1)表达被引量：4
- 2005年
- 目的 研究去乙酰化酶抑制剂曲古菌素A (trichostatin A, TSA) 对人急性早幼粒细胞白血病细胞NB4组蛋白H3乙酰化水平的调节作用及对细胞周期素依赖性激酶抑制剂 p21WAF1/CIP1 表达的影响。方法 应用 300、150、75、37 5、18 75 nmol/L浓度的TSA分别作用NB4细胞 4、8、12、24、48 h, 提取细胞的总 mRNA和总蛋白, 采用RT PCR技术检测 p21WAF1/CIP1mRNA表达情况, 并用免疫印迹技术 (Western blot) 观察组蛋白 H3 的乙酰化水平变化及 p21WAF1/CIP1蛋白的表达水平。结果 TSA对组蛋白H3乙酰化作用随时间改变而变化; 在低浓度时就可引起组蛋白H3的乙酰化。TSA对 p21WAF1/CIP1 mRNA和 p21WAF1/CIP1 蛋白表达的影响呈时间和剂量依赖性。结论 TSA能够明显上调NB4细胞组蛋白H3的乙酰化水平, 促进细胞周期依赖性激酶抑制剂 p21WAF1/CIP1的表达。
- 李新刚陈燕吴青刘红利
- 关键词：P21^WAF1/CIP1NB4细胞组蛋白乙酰化细胞周期素依赖性激酶
- 铅对大鼠脑区POU蛋白Brn-3a的mRNA转录水平的影响被引量：1
- 2007年
- 目的探讨铅对大鼠中枢神经系统神经细胞内转录因子Brn-3a基因mRNA转录水平的影响。方法雌性大鼠经围产期饮水染铅(对照组蒸馏水、低铅组0.5g/L、中铅组1.0g/L、高铅组2.0g/L)后,对其21日龄仔鼠不同脑区的Brn-3a mRNA基因转录水平进行了观察,采用逆转录酶-聚合酶链反应(RT-PCR)和组织原位杂交半定量检测Brn-3a的mRNA水平。结果RT-PCR凝胶成像系统结果显示,各染铅剂量组脑组织海马区扩增产物的电泳条带密度与对照组相比差异有显著性(P<0.05),皮层及小脑部位与对照组相比差异无显著性。原位杂交检测Brn-3a的mRNA图像分析结果显示,高铅组与对照组相比,在大脑皮层和海马部位可见平均灰度值升高(P<0.05),表明mRNA的表达量减弱,而小脑部位未见明显变化。在海马部位还可见阳性面积比显著下降(P<0.01)。结论结果表明,仔鼠大脑海马区Brn-3a基因转录水平有所下降,Brn-3a作为转录调节因子参与了铅对学习记忆损害的神经毒性过程。
- 常薇吴青安社娟陈军陈学敏
- 关键词：铅BRN-3A神经毒性
