夏庆杰
- 作品数：94 被引量：397H指数：9
- 供职机构：四川大学华西医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金四川省卫生厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学动力工程及工程热物理更多>>
- 短发夹RNA／mdr1表达载体的构建及体外表达被引量：3
- 2007年
- 目的构建短发夹RNA（shRNA）／mdr1的质粒表达载体并验证其体外表达效率。方法按照pSUPER的设计要求合成mdr1基因RNAi靶序列的64bp寡核苷酸序列，退火后双酶切法（BglⅡ和HindⅢ）克隆，得到质粒pSUPER-shRNA／mdr1，转染感受态大肠杆菌，筛选阳性克隆，测序证实后扩增培养并提取，然后转染融合达90％以上的HepG2／mdr1细胞，阴性载体为对照组，实时聚合酶链反应（Real-timePCR）、流式细胞术检测mdr1基因mRNA、P-gp表达、细胞耐药性等功能变化。结果成功构建质粒载体pSUPER-shRNA／mdr1，基因测序证实靶序列插入正确；HepG2／mdr1-si组mdr1基因的mRNA表达水平是耐药株HepG2／mdr1组的56分之一；HepG2／mdr1-si组细胞和阴性对照组HepG2／mdr1细胞的P-gP表达率分别为11.0％和98．6％，P〈0．05；HepG2／mdr1组细胞耐药倍数从62．5下降到1．4，相对逆转效率99．34％；细胞内DNR累积量也明显增加，与对照组比较（79．32％比37．96％），P〈0．05。结论多药耐药基因mdr1质粒表达载体pSU-PER-shRNA／mdr1能在HepG2／mdr1内稳定表达，并逆转其耐药性。
- 潘光栋严律南夏冬杨家印夏庆杰闫乃红陈清英
- 关键词：多药耐药基因质粒
- 内皮抑素对视网膜新生血管中干扰素α表达的影响被引量：7
- 2005年
- 目的 观察血管生成抑制因子内皮抑素 (endostatin ,ES)对视网膜新生血管中干扰素α(Interferonα,IFN α)表达的影响。方法 通过缺氧的方法建立小鼠视网膜新生血管模型 36只 ,随机分为高氧组及ES治疗组。ES治疗组小鼠在出氧箱后 12h、36h ,玻璃体腔内注射 1μg的ES。另将生活在正常氧环境中的 18只同龄小鼠作为正常对照组。提取 3组小鼠视网膜总RNA ,通过RT PCR方法定量检测IFN α在 3组小鼠视网膜中的表达。结果 RT PCR结果显示氧致视网膜病变视网膜中IFN α的表达升高 ,达到 (4.92± 1.5 2 )相对拷贝数 ,与正常对照组 (3.76± 1.89)相对拷贝数比较有统计学意义 (P <0 0 5 ) ;ES作用后IFN α的表达为 (6 .81± 1.6 7)相对拷贝数 ,较给氧组比较有明显增强 ,统计学分析有差异 (P <0 .0 5 )。结论 ES可以上调IFN αmRNA基因的表达 ,这可能是ES抑制视网膜新生血管的生成机制之一。
- 张美霞张军军严密夏庆杰曹桂群
- 关键词：视网膜新生血管化血管生成抑制剂内皮抑素干扰素Α
- 中国先天性缺失牙患者PAX9基因的新突变被引量：16
- 2005年
- 目的探讨我国先天性缺失牙患者PAX9基因突变的特点,为该病发病的分子机制研究提供依据。方法应用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)分析方法,对4个常染色体显性遗传少牙畸形家系(共45名成员,22例患者)中的13例患者和9名健康成员、16例散发性牙齿发育不全患者以及196名健康对照者的PAX9基因进行研究。结合DNA序列分析方法,对发现异常SSCP条带的患者进行突变分析。结果2个少牙畸形家系(家系A和家系B)的先证者出现异常SSCP条带,家系A和家系B内患者均出现与各自先证者相同的异常SSCP条带。经过DNA序列分析,发现PAX9基因第2外显子的2个新突变:碱基插入(109InsG)导致的移码突变,碱基置换(C139T)导致的错义突变。其余家系患者、散发性患者均未发现异常SSCP条带。结论109InsG和C139T突变扩大了先天性缺失牙患者的PAX9基因突变谱,为我国先天性缺失牙的基因诊断提供依据。
- 赵计林陈扬熙鲍朗夏庆杰吴拓江周力
- 关键词：失牙患者先天性单链构象多态性基因突变谱移码突变
- 细胞增殖标记物微型染色体维持蛋白2在结肠腺瘤和腺癌中的表达差异及意义被引量：2
- 2008年
- 目的探讨细胞增殖标记物MCM2在结肠癌、结肠腺瘤及正常结肠黏膜中的表达差异及在不同临床病理特征的结肠腺瘤中的表达差异。方法应用免疫组织化学（免疫组化）SP法检测MCM2在正常结肠黏膜、结肠腺瘤及结肠癌中的表达部位；应用实时荧光定量聚合酶链反应法检测MCM2mRNA在12例结肠癌、33例结肠腺瘤及5例正常黏膜中表达量的差异并分析其意义．同时用REST—XL软件分析不同临床病理特征的腺瘤之间MCM2的表达差异及其意义。结果MCM2在正常黏膜中仅表达在腺凹底部，而在结肠腺瘤及腺癌组织中均呈全层上皮表达，但两者在MCM2 mRNA水平上的表达量差异有统计学意义（P=0．001）。结肠腺瘤与正常黏膜相比较，MCM2表达上调。但差异无统计学意义（P〉0．05）。不同临床病理特征的结肠腺瘤之间MCM2表达差异无统计学意义（P〉0．05）。结论MCM2在正常黏膜和结肠肿瘤中表达部位不同，且在结肠腺瘤及结肠癌中的表达量差异显著，可能作为早期筛查诊断结肠癌及评估腺瘤突变的指标之一。
- 王永周总光夏庆杰张文燕李红光王蓉
- 关键词：结肠腺瘤结肠肿瘤实时荧光定量聚合酶链反应
- 罗格列酮对裸小鼠移植瘤PPAR-γ表达的影响
- 2008年
- 目的探讨罗格列酮(RGZ)对裸小鼠移植瘤过氧化物酶体增殖物激素受体-γ(PPAR-γ)表达的影响。方法采用不同浓度和剂量的RGZ对荷瘤裸小鼠进行灌胃干预3周后,RT-PCR实时荧光定量检测PPAR-γ的△Ct值和表达拷贝数,测量各组瘤体体积(TV)和重量(TW),计算相对肿瘤体积(RTV)和相对肿瘤增值率(T/C%)。结果胆管癌移植瘤随RGZ剂量增高PPAR-γ的表达升高,而相对肿瘤增值率T/C%减少;高剂量组与对照组比较差异显著(P<0.001)。结论在裸小鼠移植瘤内RGZ能呈剂量依赖性地上调PPAR-γ表达。
- 吴良洪程南生杨帆熊先泽魏大鹏夏庆杰
- 关键词：过氧化物酶体增殖物激活受体-Γ罗格列酮胆管癌
- BCR/ABL融合基因表达检测技术建立及其初步应用
- 2010年
- 目的建立BCR/ABL融合基因表达定量分析的双色荧光定量PCR技术;探讨所建立的双色荧光定量PCR技术在CML早期诊断中的临床应用特点。方法据BCR/ABL融合基因序列,设计合成BCR/ABL融合基因及ABL基因特异的引物TaqM an探针。提取患者骨髓细胞标本总RNA,逆转录成cNDA;在同一PCR反应管中同时进行两种基因的双色荧光定量PCR反应,分别定量测BCR/ABL融合基因和ABL基因的表达量,并计算两种基因表达的比值。检测标本中两种基因的表达量,计算检测的阳性率,所得结果与临床诊断结果对比,以判断该技术在CML检测诊断中的价值。结果成功地建立了BCR/ABL融合基因检测的双色荧光定量PCR技术方法;在35例临床CML患者中,33例检出融合基因阳性,检测阳性率94.3%;12例正常人cDNA均未检出融合基因阳性。结论所建立的BCR/ABL融合基因检测的双色荧光定量PCR是一种快速、准确、高通量而费用又较为低廉的基因检测技术,该技术检测CML具有临床可行性。
- 张锐徐峰李启杰夏增亮李军吴苹张发强陈清英刘文涛胡迪郝素菊李健夏庆杰
- 关键词：BCR/ABL融合基因慢性粒细胞白血病
- 一种多分子微包核负载青蒿素（DHA、ARM、ARS）用于癌症治疗的制法及应用
- 为有效利用青蒿素类药物，提高其溶解性或提高其在靶器官的药物浓度，以期更好的发挥疗效，本发明提供一种多分子微包合复合物负载青蒿素类药物的新剂型来改善青蒿素类药物在临床上的应用现状。本发明在微包合复合物制剂的制备方法中，将青...
- 唐麟夏庆杰
- 文献传递
- 绿色荧光蛋白标记的大鼠胶质细胞源性神经营养因子重组腺病毒载体的构建及其表达被引量：4
- 2005年
- 目的:构建大鼠胶质细胞源性神经营养因子基因的重组腺病毒并观察其在神经干细胞上的表达,探索胶质细胞源性神经营养因子作为基因治疗神经病变的价值。方法:实验于2004-8/12在四川大学华西医院眼疾病分子遗传实验室进行。以新生SD大鼠大脑皮层细胞RNA为模板,反转录聚合酶链反应扩增出全长的胶质细胞源性神经营养因子基因,经测序验证后,亚克隆至穿梭质粒pAdTrackCMV中,与骨架质粒pAdEasy1同源重组为腺病毒载体。线形化后转染293细胞进行包装扩增,利用AdEasy1系统上的绿色荧光蛋白鉴定病毒表达,并用病毒上清转化大鼠神经干细胞,检测胶质细胞源性神经营养因子基因的表达。结果:①胶质细胞源性神经营养因子基因扩增后进行测序显示扩增片段为653bp个核苷酸,同源性比较该序列正确。②重组腺病毒载体经酶切验证为阳性克隆,转染293细胞包装后的病毒滴度为1x109PFU/mL。③转入胶质细胞源性神经营养因子的重组腺病毒的神经干细胞扩增出653bp的带。结论:成功构建了胶质细胞源性神经营养因子重组腺病毒并见其在大鼠神经干细胞中进行了表达。
- 闫乃红陈清英曹桂群卢亦路张发强袁琼兰夏庆杰
- 关键词：神经系统干细胞脑源性神经营养因子
- ERK信号转导通路蛋白在上皮性卵巢肿瘤组织中的表达及与肿瘤恶性程度的相关性研究被引量：6
- 2006年
- 目的研究细胞外信号调节激酶p-ERK1/ERK2在上皮性卵巢肿瘤组织中的表达与临床的病理关系。方法应用免疫组织化学方法检测p-ERK1/ERK2在33例卵巢上皮细胞癌,21例良性卵巢上皮性肿瘤标本中的定性表达情况,采用Image-ProPlus图象分析系统对表达强度行半定量分析。结果①p-ERK1/ERK2在良性上皮性肿瘤中的表达率为33.3%,在卵巢上皮细胞癌中的表达率为72.7%,其中Ⅳ期、Ⅲ期的表达明显高于Ⅱ期、Ⅰ期(P<0.05);②p-ERK1/ERK2表达强度与肿瘤组织病理学分期有关(P<0.05),良性肿瘤的表达明显低于恶性肿瘤(P<0.05)。结论p-ERK1/ERK2在卵巢上皮细胞癌中高表达,且表达强度与卵巢上皮细胞癌的分期相关;ERK蛋白的表达在卵巢上皮细胞癌患者的发生、发展中可能起重要促进作用,可以作为预测卵巢上皮细胞癌恶性程度及预后的指标。
- 李延王滟杨业洲陈廉夏庆杰
- 关键词：细胞外调节蛋白激酶卵巢上皮细胞癌
- APCDD1在直肠癌及结直肠腺瘤中的定量表达被引量：2
- 2006年
- 目的建立荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测APCDD1 mRNA基因表达的方法,了解直肠癌及结直肠腺瘤组织中APCDD1 mRNA的表达水平。方法用荧光定量PCR方法检测86例直肠癌及癌旁组织、20例结直肠腺瘤及配对的正常黏膜组织APCDD1 mRNA相对表达水平并比较其差异。结果75%的结直肠腺瘤和65%的直肠癌表达上调,86例直肠癌APCDD1 mRNA平均相对表达水平为正常黏膜组的4．712倍,20例结直肠腺瘤中APCDD1 mRNA平均相对表达水平为正常黏膜组的3．872倍,直肠癌组和结直肠腺瘤组均较正常黏膜组织上调,差异有统计学意义(P＜0．05)。结论APCDD1 mRNA表达在腺瘤和直肠癌中表达上调,但在直肠癌中与病理分级无明显相关。
- 周斌周总光夏庆杰杨烈辜俊
- 关键词：结直肠癌基因表达
