孙明哲
- 作品数：2 被引量：6H指数：2
- 供职机构：天津科技大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程更多>>
- 生物质降解菌系中GH11家族耐热木聚糖酶基因的克隆与鉴定被引量：2
- 2013年
- 以玉米芯粉为基质富集培养牛粪中生物质降解菌系,提取该降解菌系的宏基因组DNA,并以其为模板,通过简并引物PCR扩增出200bp左右的木聚糖酶基因片段,选择与耐热木聚糖酶相似性最高且丰度最高的基因序列,应用mTAIL-PCR扩增得到1 059bp的基因全长序列(xynHAD4),编码352个氨基酸,经序列比对分析,该木聚糖酶(XynHAD4)属于典型的GH11家族木聚糖酶,与来源于Dictyoglomus thermophilum的xylanase229B相似度为93%。将xynHAD4连接于表达载体pET22b(+),在E.coli BL21中成功得到表达,表达产物经纯化后,测定其分子质量约为36kDa,最适作用温度和pH分别为80℃和6.0,该酶在90℃保温1h,残余酶活为72%,pH作用范围较广,在pH4.0保存1h,残余酶活为82%,可见,XynHAD4属于耐热木聚糖酶,并且在酸性条件下可保持较高稳定性,在食品、饲料等领域具有潜在的应用价值。
- 郑宏臣孙明哲裴海生孟令彩曾文惠张京声刘逸寒路福平孙君社
- 关键词：宏基因组耐热木聚糖酶酶学性质
- 产耐高温木聚糖酶菌株的筛选及其产酶条件优化被引量：4
- 2013年
- 从牛粪堆肥中分离、筛选到1株产耐高温木聚糖酶的细菌NF1,经形态特征和16S rDNA序列分析,鉴定菌株NF1为类芽孢杆菌,命名为类芽孢杆菌(Paenibacillus sp.)NF1。采用响应面法对该菌种产木聚糖酶的发酵条件进行优化。首先利用Plackett Burman试验设计筛选出影响产酶量的3个主要因素,即牛肉膏浓度、NaCl浓度和初始pH值。在此基础上使用Design-Expert软件进行Box-Behnken试验设计,通过响应面分析得出菌株NF1发酵产酶的最佳条件为玉米芯20g/L、牛肉膏28.2g/L、K2HPO45g/L、MgSO40.5g/L、NaCl 7.1g/L、初始pH值为6.9;装液量40mL、转速160r/min、接种量2%、温度28℃。经过验证试验,优化后粗酶液酶活达到160.6IU/mL,与响应面预测结果一致,较优化前木聚糖酶酶活提高了51.4倍。
- 孙明哲郑宏臣孙君社裴海生刘逸寒张璟韩杨路福平
- 关键词：菌种筛选类芽孢杆菌发酵优化
