张华
- 作品数：4 被引量：27H指数：3
- 供职机构：河南省动物免疫学重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家杰出青年科学基金河南省高校杰出科研人才创新工程基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- PCR克隆高GC含量牛Fcγ2R cDNA被引量：4
- 2005年
- 根据已发表的牛Fcγ2RcDNA序列设计1对引物,采用改进的RT -PCR技术从牛外周血淋巴细胞总RNA中扩增出了GC含量为6 4%的牛Fcγ2RcDNA分子,克隆片段全长795个核苷酸,含有一个完整的开放阅读框,编码2 6 5个氨基酸,和已报道的序列相比存在3个碱基突变。
- 乔松林张改平王丽张红张华付彦峰郭军庆王选年夏春
- 关键词：克隆
- 牛IgG2 Fc受体在COS-7细胞表面的稳定表达被引量：6
- 2007年
- 将牛IgG2 Fc受体(boFcγ2R)编码区cDNA亚克隆到真核表达载体pcDNA3的巨细胞病毒启动子下游,构建了重组表达质粒pc3bo2R;以重组质粒转染COS-7细胞,用玫瑰花环试验检测boFcγ2R在转染细胞表面的表达,通过G418抗性筛选和连续克隆化,在转染细胞表面稳定表达了boFcγ2R受体分子,转染细胞的玫瑰花环形成率达90%。最后获得稳定表达boFcγ2R受体分子的COS-7转染细胞系,为受体的功能研究提供了良好的技术平台。
- 李青梅郭军庆张改平杨艳艳王选年张华乔松林王丽
- 关键词：FC受体COS-7细胞细胞表面表达
- IBDV VP3结构蛋白在大肠杆菌中的表达与鉴定被引量：18
- 2005年
- 应用RT-PCR技术从鸡IBDV总RNA中克隆出893bp的VP3基因,并将其进一步克隆于pET-28a载体T7启动子的下游,构建了pETVP3原核表达载体。经IPTG诱导,在其宿主菌BL21(DE3)中成功表达了35.5,33kDa的鸡IBDVVP3蛋白。经SDS-PAGE和Westernblotting分析,VP3表达产物以包涵体形式存在,并与鸡IBDV抗血清特异性反应。
- 张改平席俊王选年乔宏兴张华王丽郭军庆
- 关键词：传染性法氏囊病病毒VP3蛋白抗原性
- 牛IgG Fc受体Ⅱ胞外区在大肠杆菌中的表达及特性鉴定被引量：1
- 2005年
- 从牛肺巨噬细胞cDNA文库中扩增编码牛IgGFc受体Ⅱ(boFcγRⅡ)胞外区基因,PCR产物经EcoRⅠ和HindⅢ双酶切后,插入原核表达载体pET28a的T7启动子下游,构建重组表达质粒pETboRⅡ。以pETboRⅡ转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。SDS-PAGE分析诱导表达菌体可见分子量约为27kDa的蛋白条带,该表达蛋白在细胞质中主要以不溶性包涵体形式存在。Westernblotting和Dotblot检测表明,boFcγRⅡ重组蛋白在变性条件下可与牛IgG特异结合,提示牛FcγRⅡ胞外区可能存在IgG线性结合表位。
- 张改平王丽李青梅张华乔松林乔宏星席俊王选年郭军庆
- 关键词：原核表达
