徐东刚
- 作品数:191 被引量:484H指数:11
- 供职机构:军事医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家科技重大专项国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学化学工程自动化与计算机技术更多>>
- 北京地区儿童生活方式、免疫状态及ORMDL3基因SNPs与哮喘发生的相关性研究被引量:18
- 2010年
- 目的分析ORMDL3基因的SNP rs7216389,rs7216558在中国北京地区儿童中的基因型频率,并调查其与儿童哮喘间的相关性。综合ORMDL3基因相关SNPs、儿童生活方式、IL-4、总IgE和特异性IgE所反映的免疫状态进行与儿童哮喘的相关性分析。方法采用病例-对照研究的方法,通过《国际儿童哮喘及过敏研究(ISSAC)问卷》收集生活方式信息;对聚合酶链式反应(PCR)产物进行序列分析得到SNPs的基因型;酶联免疫吸附法(ELISA)测定IL-4水平;免疫测定法测得儿童总IgE水平;放射性过敏原吸附试验法(RAST)检测特异性IgE水平。使用多元Logistics回归分析ORMDL3基因相关SNPs、生活方式、免疫状态与儿童哮喘的相关性。结果共收集到北京地区220名哮喘患儿及208名对照儿童的血液样本及相关信息。ORMDL3基因SNPs(rs7216389,rs7216558)在病例与对照组中无差异(P>0.05)。哮喘家族史与过敏性哮喘相关(P<0.05),而哮喘家族史、患儿年龄、采暖方式、家庭吸烟习惯、总IgE水平与非过敏性儿童哮喘显著相关(P<0.05)。结论在北京地区,ORMDL3基因SNPs(rs7216389,rs7216558)与儿童哮喘非显著相关。遗传因素与过敏性哮喘显著相关;而在非过敏性哮喘患儿中生活方式及免疫应激状态与哮喘相关,反映了除遗传因素以外,生活方式、免疫状态也对儿童哮喘具有重要影响。
- 金哲王金凤李红王园园王强吴奎武徐东群徐东刚
- 关键词:儿童哮喘病例对照研究SNPS
- 新型低抗原性葡激酶的构建、表达及功能分析被引量:4
- 2007年
- 目的:降低野生型葡激酶(wild-type staphylokinase,wt-SAK)的抗原性,获得新型溶栓剂。方法:利用生物信息学分析野生型SAK抗原表位,将其分子内主要的抗原决定簇编码序列定点突变为丙氨酸密码子,将其N端抗原性较强的前10位氨基酸缺失。经过筛选从系列突变体中得到突变体NSAKV。结果:生物信息学分析突变后分子抗原性,结果表明其主要抗原表位消失。该突变体(NSAKV)与原核表达载体pET17b重组后,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导获得高效表达,NSAKV占全茵总蛋白的40%-50%,以可溶性形式存在。经进一步纯化,纯度达98%以上,分子量与理论值相符。比活性2.616×10^4 AU/mg。经ELISA法和溶圈法测定,NSAKV与wt-SAK制备的兔抗wt-SAK抗血清的免疫反应性显著降低,经抗血清温育后wt-SAK活性下降程度远高于NSAKV。结论:突变体(NSAKV)保持了野生型SAK的活性,同时抗原性下降。
- 王旻王圆圆邹民吉徐涛刘深吴琛王嘉玺徐东刚
- 关键词:葡激酶抗原性突变纯化
- 丙型肝炎病毒5’非编码区PCR产物单链构象多态性分析及序列测定被引量:1
- 1997年
- 目的:研究慢性肝炎病人血清、肝细胞肝癌组织中丙型肝炎病毒(HCV)5'非编码区变异情况.方法:收集10例慢性肝炎病人及4例肝细胞肝癌病人血清和肝细胞肝癌组织,检测抗HCV抗体阳性,进行HCV5'非编码区RNA的逆转录PCR扩增,PCR产物进行单链构象多态性分析,并对部分病例序列进行测定.结果:6例慢性肝炎病人血清及3例肝细胞肝癌组织中检测到HCVRNA,单链构象多态性分析显示各例条带之间无明显差异,对1例肝细胞肝癌组织中HCV5'非编码区cDNAPCR产物的序列测定表明它与HCV-1的同源性为97.3%,与HCV-BK的同源性为97.7%.结论:我们的结果提示在西安地区HCV5'非编码区几乎是一样的,并进一步证实不同地区HCV5'非编码区的高度保守性.
- 王春杰王文亮逯好英逯好英孟庆华徐东刚
- 关键词:丙型肝炎病毒聚合酶链反应单链构象多态性
- A/H1N1流感的流行特点及防治被引量:1
- 2009年
- 朱泽轶邹民吉吴奎武徐东刚
- 关键词:猪流感病毒H1N1INFLUENZA自我保护意识
- 流感病毒诊断方法的研究进展被引量:6
- 2009年
- 蔡欣朱泽轶邹民吉吴奎武徐东刚
- 关键词:流感病毒流行性感冒病毒病毒基因组正黏病毒科乙型流感
- 兔动脉粥样硬化动物模型的建立和评价被引量:67
- 2008年
- 目的探索短时间内快速建立动脉粥样硬化家兔模型的方法和评价指标。方法用高胆固醇饲料喂养法与免疫反应损伤法结合建立兔动脉粥样硬化动物模型。分别于高脂饲养前、第4周和第8周测定血甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL)的含量、丙二醛的含量(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮(NO)、C反应蛋白(CRP),并于第8周后作形态学观察。结果饲养4周后,模型组血清中甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)的含量、丙二醛(MDA)的含量、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮(NO)、C反应蛋白(CRP)(P<0.01)等显著性升高。饲养8周后模型肉眼及光镜下均可见典型动脉粥样斑块。结论此法能短时间内建立兔动脉粥样硬化模型。
- 王园园龙民慧周磊磊邹民吉徐涛刘深王嘉玺徐东刚
- 关键词:动脉粥样硬化家兔动物模型
- HCV核心区与NS3区抗原表位分析及融合基因表达被引量:1
- 1997年
- HCV核心区与NS3区抗原表位分析及融合基因表达逯好英徐东刚朱分禄孟文华孟庆华军事医学科学院基础医学研究所北京100850丙型肝炎病毒(HCV)核心(C)区及NS3区抗原是第二代抗-HCV抗体诊断试剂的主要组分。核心蛋白(C22)含有191个氨基酸,...
- 逯好英徐东刚朱分禄孟文华孟庆华
- 关键词:丙型肝炎病毒核心蛋白NS3蛋白抗原
- 血管生成素与λ晶体蛋白相互作用的分子结合域
- 本发明公开了血管生成素(Ang)的氨基酸序列,尤其是涉及血管生成素(Ang)与λ晶体蛋白相互作用的特定氨基酸序列。具体来说,该关键氨基酸序列为…N<Sup>3</Sup>S<Sup>4</Sup>R<Sup>5</Sup...
- 徐东刚邹民吉蔡欣徐涛王嘉玺
- 文献传递
- 可视化环介导恒温扩增技术在日本血吸虫感染性钉螺检测中的应用研究被引量:1
- 2016年
- 目的建立一种方便、快速且灵敏度高、特异性强的日本血吸虫(SJ)感染性钉螺检测方法。方法 PCR扩增SJ基因片段,并将其克隆到T载体构建阳性参照物;建立SJ核酸恒温扩增反应体系,并通过检测经等比稀释的阳性参照物和相关样本基因组DNA分析其灵敏度和特异性;设计相应的核酸纯化方法,组装SJ感染性钉螺检测试剂,并通过检测钉螺样本对其进行验证。结果获得长度213 bp的PCR扩增产物,并用该扩增产物构建了重组T载体,即阳性参照物;建立了SJ核酸恒温扩增反应体系,该体系可根据颜色变化判定扩增结果,且灵敏度和特异性良好;组装了SJ感染性钉螺检测试剂,该试剂可检测出含1%阳性钉螺的钉螺样本。结论成功建立了一种可视化的SJ感染性钉螺检测方法,并通过应用对其进行了验证。
- 冯惊涛邢微微孙魁喻鑫玲罗志红毛金武徐东刚
- 关键词:日本血吸虫环境监测钉螺
- 环介导等温扩增法快速检测结核杆菌复合群内主要致病菌
- 2010年
- 目的快速诊断和区分结核杆菌复合群内两种主要致病菌。方法利用环介导等温扩增(LAMP)技术建立快速检测和区分结核杆菌复合群内主要致病菌的方法,利用该方法对相关的临床分离株样本进行特异性检测,并利用1∶10倍比稀释的已知菌株DNA模板分析其敏感性。反应结束后通过电泳或向反应管中加入DNA染料肉眼判定检测结果。结果该方法可以成功检测到主要的结核致病菌:人型和牛型结核分枝杆菌,与包括卡介苗在内的其余相关菌株均未见非特异性交叉反应。检测的灵敏度可达100拷贝/微升,高于常规PCR方法。结论该检测方法具有敏感、特异、低成本和快速的特点,可检测和区分人型和牛型结核分枝杆菌,并能排除卡介苗对诊断的干扰。
- 洪明查磊付文亮邹民吉李伍举吴奎武徐东刚
- 关键词:环介导等温扩增结核分枝杆菌复合群卡介苗