徐志卿
- 作品数：97 被引量：153H指数：7
- 供职机构：首都医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学文学更多>>
- 根皮素抑制LPS诱导的BV2小胶质细胞氧化应激反应被引量：2
- 2022年
- 目的探讨根皮素(phloretin,PHL)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)导致的BV2小胶质细胞的氧化应激损伤的抑制作用及可能的分子机制。方法利用LPS建立BV2小胶质细胞的氧化应激损伤模型,对该模型予以不同浓度的PHL预处理。利用MTS方法检测细胞活力。ELISA法检测氧化应激相关产物一氧化氮(nitric oxide,NO)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的活性。双荧光素酶活性检验方法检测抗氧化响应元件荧光素酶报告基因质粒(antioxidant reaction element luciferase reporter plasmid,ARE-LUC)报告基因转录活性。Western blotting法检测磷酸化核因子-E2相关因子2(nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2)和血红蛋白加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)蛋白表达。结果与对照组相比,LPS处理后的BV2小胶质细胞活力显著降低,氧化应激产物NO和MDA水平明显升高,GSH含量和SOD活性明显下降,但Nrf2磷酸化水平、ARE-LUC报告基因转录活性和HO-1蛋白表达略有增高。与模型组比较,高剂量PHL(20μmol/L)预处理明显改善了LPS导致的BV2小胶质细胞活力下降,降低NO和MDA的含量,增高GSH的含量和SOD的活性,且进一步增加了Nrf2的磷酸化水平,上调ARE-LUC的转录活性和HO-1蛋白的表达。结论PHL可以显著抑制LPS导致的BV2小胶质细胞的氧化应激损伤,Nrf2/ARE通路可能是根皮素发挥抑制BV2小胶质细胞氧化应激损伤作用的途径之一。
- 李琛琛徐君美贺芊芊李嘉嬴李志恒徐志卿杨予涛
- 关键词：氧化应激
- 经典瞬时感受器电位通道在炎性痛及神经病理性痛大鼠背根神经节表达水平的差异被引量：3
- 2014年
- 目的探讨背根神经节细胞经典瞬时感受器电位通道家族(TRPC)各亚型在炎性痛及神经病理性痛中表达是否存在差异性。方法选用Sprague-Dawley雄性大鼠,随机分为两大组:炎性痛组和神经病理性痛组。炎性痛组又随机分为:空白对照组,生理盐水对照组,蜜蜂毒炎性痛模型组;神经病理性痛组又随机分为:空白对照组,假手术组,坐骨神经分支选择性结扎模型组。测定各组大鼠机械刺激缩足反射阈值和热刺激缩足潜伏期;然后分别于蜜蜂毒处理后2 h及神经结扎后1周,检测各组大鼠背根神经节细胞内TRPC家族各亚型mRNA表达水平和各组背根神经节细胞内TRPC家族相应亚型蛋白表达水平。结果实时定量基因扩增荧光检测技术显示,背根神经节细胞TRPC3、4、5亚型的mRNA表达水平在蜜蜂毒炎性痛组显著增加(P<0.001);而在神经病理性痛组背根神经节细胞TRPC2 mRNA表达水平显著提高(P<0.001),同时TRPC3 mRNA表达水平却显著降低(P<0.05)。免疫组化结果显示蜜蜂毒炎性痛组大鼠背根神经节内TRPC3、4、5免疫阳性细胞数显著增加;而神经病理性痛组大鼠背根神经节内TRPC2免疫阳性细胞数显著增加。结论蜜蜂毒炎性痛模型及坐骨神经分支选择性结扎模型大鼠背根神经节细胞TRPC通道各亚型基因及蛋白表达水平存在差异,提示TRPC通道各亚型在炎性痛及神经病理性痛的发病中可能发挥着不同的作用。
- 曹晓曼张胜男张福康徐舒李慧徐志卿崔秀玉
- 关键词：炎性痛神经病理性痛
- 荧光共振能量转移技术阳性参照质粒的构建及应用被引量：2
- 2015年
- 目的构建青色荧光蛋白(CFP)基因和黄色荧光蛋白(YFP)基因相连接的真核表达载体pYFP-CFP,并检测融合蛋白CFP-YFP的FRET转移效率,为FRET技术提供阳性参照物。方法利用基因重组法,以带有CFP基因序列的质粒(p CFP)为模板,扩增CFP基因并插入黄色荧光蛋白载体(pYFP)的多克隆位点中,构建真核表达质粒pYFP-CFP。经细胞转染后,使其表达CFP和YFP相连的融合蛋白。在激光共聚焦显微镜下采集FRET信号图和FRET转移效率(EFRET)的计算,并比较和分析表达CFP-YFP的阳性细胞与CFP和YFP共表达的阴性细胞。结果真核表达质粒pYFP-CFP构建成功,并在细胞质中表达,这与p CFP和pYFP共转染的细胞中荧光蛋白的分布略有不同,后者在细胞胞质和细胞核中均有表达。统计结果显示表达融合蛋白的阳性组EFRET明显高于共表达的阴性组,差异有统计学意义。结论融合荧光蛋白分子的青色和黄色蛋白之间具有10个氨基酸残基相连,符合FRET现象发生的条件,能够采集到很强的FRET信号,可作为FRET研究的稳定阳性实验参照。
- 金艳燕邓君金良韵肖忠新徐志卿张进禄赵君朋薛冰
- 关键词：质粒构建荧光共振能量转移
- 甘丙肽受体:表达,膜转运、分捡与信号传导
- 甘丙肽是一种广泛分布于中枢神经系统和外周组织中的神经肽,目前甘丙肽受体有三个亚型已被克隆,即甘丙肽1型受体（GalR1）、甘丙肽2型受体（GalR2）和甘丙肽3型受体（GalR3）,均为G蛋白偶联受体。大量的研究工作已证...
- 徐志卿
- 文献传递
- 深部脑磁刺激术对慢性束缚应激大鼠习得性无助样绝望行为的疗效被引量：3
- 2017年
- 目的探讨深部脑磁刺激术(DMS)对慢性束缚应激(CRS)大鼠模型习得性无助样绝望行为的治疗作用。方法 29只Sprague-Dawley大鼠随机分为对照组(n=8)和CRS组(n=21)。CRS组予以束缚应激,对照组不做任何应激处理。3周后,通过强迫游泳实验(FST)观察大鼠习得性无助样绝望行为,将具有绝望行为的CRS组大鼠随机分为假治疗组(n=6)、DMS组(n=8)和西酞普兰组(n=7),并接受相应治疗。1周后,观察各组在FST中的不动时间。结果 CRS组在FST中不动时间明显高于对照组(F=11.260,P=0.002)。治疗1周后,西酞普兰组FST中的不动时间无显著性差异(F=1.565,P=0.235);DMS组不动时间短于假治疗组(F=5.560,P=0.036),也短于治疗前(F=6.277,P=0.025)。结论 CRS可导致大鼠产生习得性无助样绝望行为,为期1周DMS治疗可改善该行为。
- 刘博张攀李达杨予涛郑云峰徐志卿
- 关键词：慢性束缚应激绝望
- 大鼠细胞外信号调节激酶1基因3'非编码区双荧光素酶报告载体的构建及rno-miR-15b-5p对其活性的影响
- 2017年
- 目的以大鼠细胞外信号调节激酶1(ERK1)基因3'非编码区(UTR)为研究对象,构建含有ERK1基因3'UTR区的野生型以及突变型重组双荧光素酶报告载体,通过分析双荧光素酶报告载体的活性,明确rno-miR-15b-5p对报告载体的调节作用。方法采用miRNeasy Mini Kit提取大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞的总RNA,以PC12细胞的c DNA为模板,利用聚合酶链式反应(PCR)将ERK1基因3'UTR克隆到pmiR-RB-Report^(TM) vector中。利用重叠延伸PCR,将ERK1基因3'UTR中的rno-miR-15b-5p潜在的靶序列TGCTGCT分别突变成CGAACGT和GTACACG,并将突变的ERK1基因3'UTR克隆到pmiR-RB-Report^(TM) vector中。结果成功构建了包含ERK1基因3'UTR区的野生型报告载体pmiR-ERK1 3'UTR和突变型报告载体pmiR-ERK1-mut 3'UTR。利用荧光素酶活性检测系统,发现rno-miR-15b-5p mimic可以降低野生型报告载体的活性(P<0.001),但不影响突变型报告载体的活性。结论成功构建ERK1基因3'UTR区野生型和突变型双荧光素酶报告载体,初步证明ERK1基因3'UTR区是rno-miR-15b-5p的结合靶点。
- 罗汉将徐云峰李晓晓杨予涛徐志卿
- 关键词：细胞外信号调节激酶1
- 催产素对产后抑郁模型大鼠的抗抑郁作用及其机制被引量：10
- 2019年
- 目的探讨孕期束缚应激诱导的产后抑郁(postpartum depression,PPD)模型大鼠前额叶皮层催产素(oxytocin,OXT)及催产素受体(oxytocin receptor,OXTR)表达情况,观察催产素及其类似物卡比托辛的抗抑郁作用及其作用机制。方法按随机数字表法将24只SPF级成年雌性SD大鼠随机分为对照组,PPD+生理盐水组,PPD+催产素组和PPD+卡比托辛组,每组6只。于孕8~21 d每天束缚2 h建立PPD模型,对照组大鼠不作任何处理。PPD+生理盐水,PPD+催产素和PPD+卡比托辛三组大鼠产后10 d分别在前额叶皮层脑区双侧注射生理盐水(1μl/每侧),催产素(30 ng/每侧)和卡比托辛(45 ng/每侧),持续注射5 d后,采用糖水偏好实验检测大鼠的抑郁样行为。产后18 d处死大鼠取材,采用ELISA法检测OXT表达水平,Western blot检测OXTR的表达,免疫荧光方法检测各组大鼠小胶质细胞激活标志物Iba-1的表达水平,qRT-PCR的方法检测各组大鼠IL-1β、IL-6和TNF-α的表达变化。结果(1)PPD+生理盐水组大鼠的糖水偏好率[(67.1±10.4)%]较对照组大鼠[(92.6±3.9)%]显著降低(t=-5.308,P<0.01)。(2)PPD+生理盐水组组大鼠前额叶皮层催产素表达[(0.03±0.01)ng/mg]较对照组大鼠[(0.08±0.05)ng/mg]显著降低(t=-2.67,P<0.05),但PPD+生理盐水组大鼠催产素受体(0.90±0.06)与对照组(0.90±0.05)比较,差异无统计学意义(t=0.709,P=0.517)。(3)PPD+生理盐水组大鼠糖水偏好率[(65.6±16.9)%]较对照组大鼠[(91.5±3.5)%]显著降低(t=-3.35,P<0.01);与PPD+生理盐水组大鼠比较,PPD+催产素组[(81.8±8.4)%]与PPD+卡比托辛组[(78.4±9.4)%]糖水偏好率增加(t=1.98,1.68,均P<0.05)。(4)PPD+生理盐水组大鼠Iba-1在前额叶脑区中的表达较对照组大鼠升高[(1.15±0.05),(1.04±0.06);t=3.50,P<0.01];与PPD+生理盐水组大鼠比较,PPD+催产素组(1.03±0.06)和PPD+卡比托辛组(1.00±0.02)Iba-1表达降低(t=-3.50,-6.55,均P<0.01)。(5)PPD+生理盐水组大鼠前额叶皮层炎性因子IL-1βmRNA(1.0±0.1)、I
- 赵维维徐涛贺星慧陈凡张浩赟邓佳卉李慧徐志卿
- 关键词：产后抑郁症前额叶皮层催产素催产素受体
- hGalR2与Cript的相互作用
- 目的 甘丙肽是一个含29个氨基酸的神经肽,其广泛分布于中枢和外周组织,参与多种生理过程,如：摄食,情绪,记忆,神经生长等.目前已经克隆出三种甘丙肽受体,分别是GalR1,GalR2,GalR3,它们都属于G蛋白偶联受体,...
- 路雅静宫夏霓李天翊徐舒杨予涛徐志卿
- 关键词：酵母双杂交
- 癫痫与抑郁障碍共患关联机制的研究进展被引量：8
- 2016年
- 抑郁症是癫痫最常见的共患精神障碍,提示癫痫与抑郁障碍可能存在很多共同的发病机制,如神经递质、神经肽及其受体、神经胶质细胞、免疫介质、神经信号转导通路、突触可塑性与神经再生等。
- 赵爽邓佳卉徐志卿张胜昌
- 关键词：癫痫抑郁障碍
- 嗅觉器官结构及嗅觉形成机理在神经生物学教学中的实践
- 2019年
- 嗅觉器官结构及嗅觉形成机理是神经生物学课程的重要组成部分,也是神经生物学教学的重点和难点之一。文章介绍了近年来在嗅觉器官结构及嗅觉形成机理教学中的经验,旨在进一步提高首都医科大学神经生物学课程的教学效果。
- 杨予涛徐志卿
- 关键词：嗅觉神经生物学教学方法
