林恒 作品数:32 被引量:60 H指数:5 供职机构: 第三军医大学西南医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 烧伤与复合伤国家重点实验室开放基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
皮肤混合移植的研究现状和前景 皮肤移植是外科治疗中修复皮肤缺失的主要手术方法之一。可见,及时有效地封闭创面一直是临床治疗严重烧伤患者所面临的棘手难题,探索相应的皮肤移植技术则是烧伤医学的重要研究领域之一。通过长 彭代智 杨燕妮 林恒 伍素华 周新 刘敬 董征学文献传递 人CCL20基因特异性shRNA重组慢病毒表达载体的构建及测序 被引量:4 2006年 目的利用RNA干扰技术,以人CCL20基因为靶基因,设计CCL20基因特异性的小干扰RNA(siRNA),构建其短发夹RNA(shRNA)重组慢病毒表达载体,并进行测序鉴定。方法设计并合成人CCL20基因特异性的DNA寡核苷酸,连接到经SpeⅠ和SalⅠ双酶切线性化的pHSER dsRNA GFP SIN质粒上,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,筛选阳性菌落、扩增后提取质粒,进行DNA测序鉴定。结果将合成的两对人CCL20基因特异性DNA寡核苷酸序列退火后,分别克隆到线性化的pHSER dsRNA GFP SIN载体质粒上。在氨苄青霉素培养基条件下,筛选出相应的阳性菌落,经DNA测序鉴定确实为所需序列。结论构建成功了2对人CCL20基因特异性shRNA重组慢病毒表达载体,可进一步用于干扰CCL20基因的mRNA转录,从而为制备CCL20基因表达抑制型的人角朊干细胞奠定基础。 董征学 彭代智 刘敬 周新 田易 李芳 严泉 林恒 王勇 周光前关键词:RNA干扰 慢病毒表达载体 神经氨酸酶预处理对大鼠骨髓细胞分布及造血集落形成的影响 2006年 目的通过观察不同浓度的神经氨酸酶(neuraminidase,Neu)预处理供体骨髓细胞(donor bone marrow cells,dBMCs),经外周静脉注射后在受体内各主要组织器官的分布及对肝脏造血集落形成的影响,筛选出使dBMCs靶向性分布于肝脏的Neu最适浓度。方法以雄性SD大鼠为供体,Wistar雌性大鼠为受体。在dBMCs分布研究中,常规从雄性SD大鼠的股、胫骨制备dBMCs并用Neu处理。按Neu处理dBMCs的浓度将26只受体Wistar雌性大鼠分为4组,尾静脉注射99Tcm标记的dBMCs,5h后测定各组织器官的放射性活度。在造血集落形成研究中,受体Wistar雌性大鼠12只随机分为2组,尾静脉注射处理及未处理的dBMCs15d后,取受体各主要器官,行病理组织学检测,光镜下观察造血集落形成情况。结果在同一受体内,肝脏的dBMCs百分含量明显高于其他所测器官;以1·0U/ml浓度的Neu预处理时,受体肝脏内dBMCs百分含量高于对照组,差异显著(t=2·653,P=0·024),而肾脏内dBMCs百分含量低于对照组,差异显著(t=3·067,P=0·012),脾脏内dBMCs百分含量明显低于对照组,差异非常显著(t=3·265,P=0·009)。尾静脉注射15d后受体肝内可见造血集落形成,造血集落数量和形态上实验组与对照组无差别。结论在浓度为1·0U/ml时,神经氨酸酶预处理可增强骨髓细胞与肝脏的亲和性,使经外周静脉输注的骨髓细胞靶向性分布于受体肝脏内,但对肝脏内造血集落的形成无影响。 李芳 彭代智 周新 刘敬 董征学 严泉 林恒 付国金关键词:神经氨酸酶 骨髓细胞 整合素β1在微粒皮混合移植中的异位表达及定量分析 目的初步探索自异体微粒皮混合移植促进创面愈合的机理。方法建立自异体微粒皮混合移植大鼠动物模型。实验分两部分,第一部分分为三组:(1)自体皮组,移植面积扩张比为10:1的自体微粒皮;(2)混合1组,自异体微粒皮移植面积扩张... 林恒 彭代智 严泉 周新 刘敬文献传递 自制肝保护液对梗阻性黄疸大鼠门静脉阻断所致肝细胞损伤的保护作用 被引量:1 2011年 目的探讨自制肝保护液对梗阻性黄疸大鼠门静脉阻断所致肝细胞损伤的作用及对肝细胞MAPKs信号途径的影响。方法 72只Wistar系大鼠完全随机分为4组:A组:胆道再通、门静脉周围游离、切除肝尾状叶,90 min后关腹腔;B组:胆道再通、肝尾状叶分流门静脉、余肝门静脉血流阻断90 min、恢复正常门静脉血流、切除肝尾状叶,关腹;C组:B组+门静脉肝侧灌注4℃乳酸林格氏液;D组:B组+门静脉肝侧灌注4℃自制肝保护液(home-made liver solution,HMLS)。术后0、6、24 h获取各组大鼠组织标本。采用RT-PCR和Western blot分别测定肝组织A20 mRNA和蛋白表达,测定肝组织中p-JNK、p-ERK、p-p38、Bcl-2、Bax和Caspase-3的蛋白表达情况,TUNEL法检测肝细胞凋亡指数。结果 D组大鼠A20 mRNA和蛋白表达均明显增加(P<0.05),p-JNK、Bax、Caspase-3蛋白表达明显下降(P<0.05),而p-ERK、Bcl-2蛋白表达明显增加(P<0.05)。C、D组大鼠与B组相比肝细胞凋亡率明显下降(P<0.05),其中D组下降更明显。结论自制肝保护液经门静脉在体持续低温灌注肝脏,可以促进A20 mRNA及其蛋白的高表达,由此激活ERK信号转导通路,抑制JNK信号转导通路,反向调节线粒体途径Bcl-2/Bax蛋白平衡的逆转,降低了其下游的凋亡执行蛋白Caspase-3,从而起到抗凋亡、保护肝细胞的作用。 冯春林 林恒 陈炜 冷凯 郑晓华 主鹤亭 别平关键词:梗阻性黄疸 整合素β1在微粒皮混合移植中的异位表达及定量分析 目的初步探索自异体微粒皮混合移植促进创面愈合的机制。方法建立自异体微粒皮混合移植大鼠动物模型。实验分两部分,第1部分分为3组:(1)自体皮组,移植面积扩张比为10:1的自体微粒皮;(2)混合1组,自异体微粒皮移植面积扩张... 林恒 彭代智 严泉 周新 刘敬文献传递 微创技术用于重症急性胰腺炎手术113例分析 被引量:8 2007年 目的探讨微创技术在重症急性胰腺炎(SAP)治疗中的效果和地位。方法回顾性分析2004年4月至2005年11月和2005年11月至2007年6月两等时段内第三军医大学西南医院肝胆外科研究中心收治的113例SAP的病例资料,对其治疗情况进行比较。结果第二阶段主要应用微创技术(如腹腔穿刺、腹腔镜探查引流等)治疗SAP,病死率由第一阶段22.2%降为第二阶段5.1%,开腹手术、反复开刀次数和并发症(如假性囊肿、深部真菌感染等)发生率大为降低。结论微创技术的介入可以替代部分外科手术。 成正军 别平 冯春林 林恒关键词:重症急性胰腺炎 微创技术 门静脉转流下门静脉缺血对梗阻性黄疸大鼠肝脏能量代谢的影响 被引量:3 2007年 目的探讨在门静脉转流下梗阻性黄疸大鼠门静脉缺血后肝脏能量代谢变化的病理特征及其与动物耐受性的关系。方法在门静脉转流下阻断门静脉不同时间后,观察梗阻性黄疸大鼠存活率、肝细胞线粒体呼吸活性、肝组织ATP含量及动脉血酮比值。结果门静脉缺血30、60及90 min后7 d大鼠存活率分别为100%、100%及40%,缺血后肝脏能量代谢功能明显受损,在再灌注后24 h,门静脉缺血30 min及60 min 2组大鼠肝脏能量代谢功能已有明显恢复,而门静脉缺血90 min组肝脏能量代谢功能仍维持在显著低水平。结论在门静脉转流下梗阻性黄疸大鼠门静脉缺血60 min以内肝脏能量代谢损害可逆,而门静脉缺血90 min引起梗阻性黄疸大鼠肝脏能量代谢功能不可逆损害,大鼠难以耐受。 冯春林 别平 林恒 谭轶峰 黄波 李昆关键词:肝脏 梗阻性黄疸 能量代谢 离体肝切除联合自体肝移植大鼠模型的建立 被引量:5 2011年 目的建立稳定的大鼠离体肝切除联合自体肝移植模型。方法采用门静脉、肝后下腔静脉单线连续缝合法、胆管支架重建法及无损伤切肝法等技术,建立SD大鼠的离体肝切除联合自体肝移植模型。结果大鼠无肝期(20.14±1.53)min。60例SD大鼠术后成活率91.7%,1周以上存活率80%。结论大鼠离体肝切除联合自体肝移植模型,成活率高,重复性好,可作为离体肝切除联合自体肝移植有关实验研究的可靠、稳定的动物模型。 刘文渊 张玉君 徐土炳 林恒 别平关键词:自体肝移植 微电流刺激角朊细胞增殖的体外培养模型 目的建立微电流对角朊细胞作用的体外模型,以便于观察微电流对角朊细胞增殖等细胞行为的影响。方法在细胞培养皿中部组建3.0 cm×1.0 cm×1.0 cm 大小的培养小室,底部用镍铬合金丝或纯铂丝分别作为电极,同时制作输出... 岳海岭 彭代智 董征学 林恒 李芳 周新 刘敬文献传递